专利名称：含硒ms组织培养基的制作方法
技术领域：
本发明涉及MS组培基质技术，特别是一种含硒MS组织培养基。
背景技术：
MS组培基质和诱导基质是组织培养的核心技术。现有技术中的MS组织培养基中含有碳、氢、氧、氮、氯、钾、钙、磷、硫、镁、铁、钠、锰、锌、硼、铜、钼、碘、钴十几种元素组成的化合物或有机物，通常其配方如下1、大量成份硝酸钾1900毫克/升、硝酸铵1650毫克/ 升、氯化钙440毫克/升、硫酸镁370毫克/升、硫酸亚铁27. 8毫克/升、磷酸二氢钾170 毫克/升、乙二铵四乙酸钠37. 3毫克/升。2、微量成份硫酸锰22. 3毫克/升、硫酸锌8. 6 毫克/升、硼酸6. 2毫克/升、硫酸铜0. 025毫克/升、碘化钾0. 83毫克/升、氯化钴0. 025 毫克/升、钼酸钠0. 25毫克/升。3、有机成份腺嘌呤5毫克/升、甘氨酸2毫克/升、肌醇100毫克/升、烟酸0. 5毫克/升、维B10. 1毫克/升、维B60. 5毫克/升、吲哚乙酸1毫克/升、6-苄基腺嘌呤1毫克/升、蔗糖30000毫克/升、琼脂8000毫克/升、H+1995纳摩尔οMS培养基中的MS是培养基发明人穆拉希吉克(MuraShige，T.)和斯科克(Skoog， F.)的缩写。MS培养基其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，它的硝酸盐含量高，其养分的数量和比例合适，能满足植物细胞的营养和生理需要，因而适用范围比较广，多数植物组织培养快速繁殖用它作为培养基的基本培养基。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。但是，发明人发现，在脱毒组培的实践中，采用MS组织培养基育种的组培苗长成后抗病、虫害能力差，植入土壤中后，成活率只有70%。
发明内容
本发明针对现有技术中存在的缺陷或不足，提供一种含硒MS组织培养基，以提高组培苗长成后抗病、虫害能力，及其植入土壤中后的成活率。本发明的技术方案如下含硒MS组织培养基，其特征在于，在现有不含有硒元素的MS组织培养基中加入硒元素。所述加入硒元素以有机硒型式加入。所述加入硒元素以无机硒型式加入。所述加入硒元素以硒酵素型式加入。所述硒元素的加入量与现有不含有硒元素的MS组织培养基的重量比为0. 1 10 1000000。所述现有不含有硒元素的MS组织培养基是指由碳、氢、氧、氮、氯、钾、钙、磷、硫、 镁、铁、钠、锰、锌、硼、铜、钼、碘和钴元素组成的组织培养基。
本发明的技术效果如下现有技术的配方中恰恰缺少了植物生长的一个必需元素——硒。硒是动、植物生长的必需元素，是谷胱甘肽过氧化物歧化酶和P—蛋白的组成部分。在大地生长的植物，由于土壤中或多或少含有硒元素，植根有吸收来源，所以植物较好生长。但在组培基质中，如果不加入硒元素，就缺乏该元素，组培苗长成后抗病、虫害能力差，植入土壤中后，成活率只有70%。本发明技术在现有不含有硒元素的MS组织培养基中加入硒元素，培养出的组培苗，健壮、抗病虫害能力强，植物土壤后，成活率96%以上，比不加硒酵素高沈％。对于加入硒元素，可以采用生物发酵技术，将硒元素加入发酵液体培养基中，通过发酵将硒转化成有机硒，将含硒酵素按一定比例加入至MS培养基中。
具体实施例方式MS组培基质和诱导基质是组织培养的核心技术，现有技术培养基质中含有碳、 氢、氧、氮、氯、钾、钙、磷、硫、镁、铁、钠、锰、锌、硼、铜、钼、碘、钴十九种元素组成的化合物或有机物，其配方如下1、大量成份硝酸钾1900毫克/升、硝酸铵1650毫克/升、氯化钙440 毫克/升、硫酸镁370毫克/升、硫酸亚铁27. 8毫克/升、磷酸二氢钾170毫克/升、乙二铵四乙酸钠37. 3毫克/升。2、微量成份硫酸锰22. 3毫克/升、硫酸锌8. 6毫克/升、硼酸6. 2毫克/升、硫酸铜0. 025毫克/升、碘化钾0. 83毫克/升、氯化钴0. 025毫克/升、钼酸钠0. 25毫克/升。3、有机成份腺嘌呤5毫克/升、甘氨酸2毫克/升、肌醇100毫克/ 升、烟酸0. 5毫克/升、维B10. 1毫克/升、维B60. 5毫克/升、吲哚乙酸1毫克/升、6-苄基腺嘌呤1毫克/升、蔗糖30000毫克/升、琼脂8000毫克/升、H+1995纳摩尔。该配方缺少了植物生长的一个必需元素——硒，硒是动、植物生长的必需元素，是谷胱甘肽过氧化物歧化酶和P—蛋白的组成部分。在大地生长的植物，由于土壤中或多或少含有硒元素，植根有吸收来源，所以植物较好生长。但在组培基质中，如果不加入硒元素，就缺乏该元素，组培苗长成后抗病、虫害能力差，植入土壤中后，成活率只有70%。本项技术采用生物发酵技术，将硒元素加入发酵液体培养基中，通过发酵将硒转化成有机硒，将含硒酵素按一定比例加入至MS培养基中。培养出的组培苗，健壮、抗病虫害能力强，植物土壤后，成活率96%以上，比不加硒酵素高沈％。加硒组培基质配方为硒酵素占10%，其它同于MS培养基。本领域技术人员能够参照或参考中华人民共和国农业部发布的农业行业标准，NY/ T1212-2006，马铃薯脱毒种薯繁育技术规程，进一步了解MS组织培养基等相关技术概念。含硒MS组织培养基，其特征在于，在现有不含有硒元素的MS组织培养基中加入硒元素。所述加入硒元素以有机硒型式加入。所述加入硒元素以无机硒型式加入。所述加入硒元素以硒酵素型式加入。所述硒元素的加入量与现有不含有硒元素的MS组织培养基的重量比为0. 1 10 1000000。所述现有不含有硒元素的MS组织培养基是指由碳、氢、 氧、氮、氯、钾、钙、磷、硫、镁、铁、钠、锰、锌、硼、铜、钼、碘和钴元素组成组织培养基。硒有机型式甲硒胺酸(selenomethione)、硒半胱胺酸(selenocysteine)等。硒无机型式硒酸盐(selenate)、亚硒酸盐(selenite)等。在此指明，以上叙述有助于本领域技术人员理解本发明创造，但并非限制本发明创造的保护范围。任何没有脱离本发明创造实质内容的对以上叙述的等同替换、修饰改进和/或删繁从简而进行的实施，均落入本发明创造的保护范围。
权利要求
1.含硒MS组织培养基，其特征在于，在现有不含有硒元素的MS组织培养基中加入硒元ο
2.根据权利要求1所述的含硒MS组织培养基，其特征在于，加入硒元素以有机硒型式加入。
3.根据权利要求1所述的含硒MS组织培养基，其特征在于，所述加入硒元素以无机硒型式加入。
4.根据权利要求1所述的含硒MS组织培养基，其特征在于，所述加入硒元素以硒酵素型式加入。
5.根据权利要求1所述的含硒MS组织培养基，其特征在于，所述硒元素的加入量与现有不含有硒元素的MS组织培养基的重量比为ο. 1 10 1000000。
6.根据权利要求1所述的含硒MS组织培养基，其特征在于，所述现有不含有硒元素的 MS组织培养基是指由碳、氢、氧、氮、氯、钾、钙、磷、硫、镁、铁、钠、锰、锌、硼、铜、钼、碘和钴元素组成的组织培养基。
全文摘要
含硒MS组织培养基，以提高组培苗长成后抗病、虫害能力，及其植入土壤中后的成活率，其特征在于，在现有不含有硒元素的MS组织培养基中加入硒元素。
文档编号A01H4/00GK102342247SQ201110296119
公开日2012年2月8日 申请日期2011年9月28日 优先权日2011年9月28日
发明者李亚雄 申请人:金色种业有限公司