专利名称：地钱的无性繁育方法
技术领域：
本发明涉及一种地钱的繁育方法，特别涉及一种地钱的无性繁育方法。
背景技术：
地钱属于苔藓类植物，从植物分类学的角度属于苔藓植物门，苔纲，地钱目，地钱科，地钱属。地钱整体入药，味淡性凉，入脾肺经。有祛热、收敛、益气、清补、明目等功效。可以治疗火眼夜盲、烫伤烧伤、肺热咳嗽和久痢脱肛。以色列魏茨曼研究的科学家研究发现，地钱所含的一种成分可以抑制人大脑中的乙酰胆碱酯酶的活性，从而能对老年痴呆症产生疗效。作为食物时，其又具有显著的食疗作用1.降脂明目。地耳是一种很好的低脂肪营养保健菜，能降脂减肥，同时，对目赤、夜盲、脱肛等病症也有一定疗效。2.清热降火。地钱性寒而滑，具有清热解毒的功效，内服外用，可辅助治疗烧伤、烫伤及疮疡肿毒。3.补充营养。地钱含有丰富的蛋白质、钙、磷、铁等，可为人体提供多种营养成分， 具有补虚益气，滋养肝肾的作用。因此地钱具有良好的市场价值。目前的地钱繁育技术多采用花盆土壤组织块培养方法。这种方法由于需要准备花盆、土壤等，一方面占用空间大，移动起来比较麻烦，另一方面繁育效率不高。
发明内容
鉴于背景技术中提到的目前地钱繁育技术的缺点，本发明提供了一种新的地钱繁
育方法。众所周知，地钱属于苔类植物，其整个生命周期中包含孢子体和配子体两大阶段， 而具有经济价值的是配子体(又称叶状体)。地钱的配子体具有茎、叶结构，但是不具备植物学意义上的根。配子体的茎在成长过程中慢慢形成类似根状结构，该结构被称为假根。配子体就是通过假根来吸收生长所需的养分。由于配子体的茎叶均无法在水中呼吸，因此到目前为止对地钱的繁育均使用土壤栽培或者固体培养基培养的方法。本发明所述的方法则是利用液体培养基对地钱进行繁育。具体的繁育方法如下(1)配制MS或B5液体培养基。具体配方如下MS液体培养基硝酸钾1900mg/l，硝酸铵1650mg/l，磷酸二氢钾170mg/l，硫酸镁 370mg/l，氯化钙 440mg/l，碘化钾 0. 83mg/l，硼酸 6. 2mg/l，硫酸锰 22. 3mg/l，硫酸锌 8. 6mg/ 1，钼酸钠0. 25mg/l，硫酸铜0. 025mg/l，氯化钴0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二钠37. 3mg/l，硫酸亚铁27. 8mg/l，肌醇100mg/l，甘氨酸aiig/Ι，盐酸硫胺素0. lmg/1，盐酸吡哆醇0. 5mg/l, 烟酸 0. 5mg/l。B5液体培养基硝酸钾2500mg/l，硫酸镁250mg/l，氯化钙150mg/l，硫酸铵13%ig/l，碘化钾 0. 75mg/l，硼酸 3. Omg/1，硫酸猛 10mg/l，硫酸锌 2. Omg/1，钼酸钠 0. 25mg/ 1，氯化钴0. 025mg/l，硫酸铜0. 025mg/l，乙二胺四乙酸二钠37. 3mg/l，硫酸亚铁27. 8mg/l， 肌醇100mg/l，烟酸1. Omg/1，盐酸吡哆醇1. Omg/1，盐酸硫铵1 Omg/1,(2)获取培养组织块取材可以是地钱(M. polymorpha)，裂托地钱(M. cuneiloba)和风兜地钱 (M. diptera)等。将地钱的叶状体剪碎，剪碎的叶状体组织块的大小控制在2X2mm_3X3mm。 利用粗眼的土壤筛可以将过小的组织块筛选掉。(3)组织块的消毒首先用自来水将剪碎的组织块洗干净，然后在超净台上用70%的酒精浸泡1分钟，再用0. 的升汞溶液杀菌5分钟，然后使用无菌水冲洗5次，然后用无菌吸水纸洗干。(4)假根的诱导将步骤(1)中所配置的液体培养基倒入大培养皿，将塑料支架的高度调节至与培养基高度相同，然后将塑料支架放置于培养皿中。将步骤(3)中所获得的无菌组织块放置于塑料支架上，让组织块的底部能接触到培养基。并且保证组织块没有被浸没在培养基中。 温度控制在20 22°C左右，培养4 6天。所培养的组织块从碎片边缘一方面长出叶状体带有生长点的顶端部分，另一方面长出假根组织。(5)叶状体的增殖当地钱的组织块长出假根组织后，将塑料支架略微调高，使假根浸没在培养基中， 使叶状体的其他部分不接触培养基。这样能使叶状体的茎和叶更好地呼吸，更有效率地利用假根从培养基中吸收的养分。更重要的是，这样能避免叶状体发生腐烂死亡的现象。将温度控制在20 25°C，培养8 10天，待叶状体的宽度达到1厘米，即可收获。其中步骤(3)中所述的塑料支架的作用在于解决待培养的组织块不能浸没在液体中这一问题。所使用的塑料支架的平面上密集地设置孔洞，孔洞的大小以直径0.5毫米到1毫米为宜。优选地，所述的塑料支架的支撑腿具有内外两层结构，内层与外层可以相对活动， 内外层依靠相互之间的摩擦力定位。这样就可以方便地调节塑料支架的高度，以满足实际生产的需要。本发明所述的方法为地钱的无性繁育提供了一种新的方法。利用液体培养基对地钱进行繁育，能够节省空间，节约成本。而且由于没有接触土壤，通过这种方法获得的地钱非常干净，在作为食材进行加工时特别省时省力。另外，由于植物从液体培养基中吸收养分的效率要高于从土壤或固体培养基中吸收养分，因此使用本发明所述的方法繁育地钱，其成熟周期比使用土壤或固体培养基进行培育要快。根据实验数据，本发明所述的方法繁育的地钱大约15天成熟，而土壤或固体培养基培育的地钱大约20天成熟，这样一来缩短了繁育周期，从另一方面提高了产量。
图1是本发明所述的方法中将塑料支架放置于培养皿的示意图。图2是本发明所述的方法中的塑料支架的结构示意图。其中1是培养皿，2是塑料支架，3是塑料支架的支撑腿。具体实施例实施例1(1)配制MS液体培养基。具体配方如下硝酸钾1900mg/l，硝酸铵1650mg/l，磷酸二氢钾170mg/l，硫酸镁370mg/l，氯化钙440mg/l,碘化钾0. 83mg/l,硼酸6. 2mg/l,硫酸锰22. 3mg/l,硫酸锌8. 6mg/l,钼酸钠 0. 25mg/l，硫酸铜0. 025mg/l,氯化钴0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二钠37. 3mg/l，硫酸亚铁 27. 8mg/l，肌醇100mg/l,甘氨酸2mg/l,盐酸硫胺素0. lmg/1,盐酸吡哆醇0. 5mg/l，烟酸 0. 5mg/lο(2)获取培养组织块取材地钱(M. polymorpha)。将地钱的叶状体剪碎为2X 2mm的组织块。利用粗眼的土壤筛可以将过小的组织块筛选掉。(3)组织块的消毒首先用自来水将剪碎的组织块洗干净，然后在超净台上用70%的酒精浸泡1分钟，再用0. 的升汞溶液杀菌5分钟，然后使用无菌水冲洗5次，然后用无菌吸水纸洗干。(4)假根的诱导将步骤(1)中所配置的液体培养基倒入大培养皿，将塑料支架的高度调节至与培养基高度相同，然后将塑料支架放置于培养皿中。将步骤(3)中所获得的无菌组织块放置于塑料支架上，让组织块的底部能接触到培养基。并且保证组织块没有被浸没在培养基中。 温度控制在20°C左右，培养6天。所培养的组织块从碎片边缘一方面长出叶状体带有生长点的顶端部分，另一方面长出假根组织。(5)叶状体的增殖当地钱的组织块长出假根组织后，将塑料支架略微调高，使假根浸没在培养基中， 使叶状体的其他部分不接触培养基。这样能使叶状体的茎和叶更好地呼吸，更有效率地利用假根从培养基中吸收的养分。更重要的是，这样能避免叶状体发生腐烂死亡的现象。将温度控制在25°C，培养8天，叶状体的宽度达到1厘米，进行收获。实施例2(1)配制B5液体培养基。具体配方如下硝酸钾2500mg/l，硫酸镁250mg/l，氯化钙150mg/l，硫酸铵i;34mg/l，碘化钾0. 75mg/l,硼酸3. Omg/1,硫酸锰10mg/l,硫酸锌2. Omg/1,钼酸钠0. 25mg/l,氯化钴 0. 025mg/l,硫酸铜0. 025mg/l,乙二胺四乙酸二钠37. 3mg/l,硫酸亚铁27. 8mg/l,肌醇 100mg/l，烟酸1. Omg/1，盐酸吡哆醇1. Omg/1，盐酸硫铵IOmg/L·(2)获取培养组织块取材裂托地钱(M. cuneiloba)。将地钱的叶状体剪碎为2X 2mm的组织块。利用粗眼的土壤筛可以将过小的组织块筛选掉。(3)组织块的消毒首先用自来水将剪碎的组织块洗干净，然后在超净台上用70%的酒精浸泡1分钟，再用0. 的升汞溶液杀菌5分钟，然后使用无菌水冲洗5次，然后用无菌吸水纸洗干。(4)假根的诱导
将步骤(1)中所配置的液体培养基倒入大培养皿，将塑料支架的高度调节至与培养基高度相同，然后将塑料支架放置于培养皿中。将步骤(3)中所获得的无菌组织块放置于塑料支架上，让组织块的底部能接触到培养基。并且保证组织块没有被浸没在培养基中。 温度控制在22°C左右，培养6天。所培养的组织块从碎片边缘一方面长出叶状体带有生长点的顶端部分，另一方面长出假根组织。(5)叶状体的增殖当地钱的组织块长出假根组织后，将塑料支架略微调高，使假根浸没在培养基中， 使叶状体的其他部分不接触培养基。这样能使叶状体的茎和叶更好地呼吸，更有效率地利用假根从培养基中吸收的养分。更重要的是，这样能避免叶状体发生腐烂死亡的现象。将温度控制在23°C，培养9天，叶状体的宽度达到1厘米，进行收获。本领域技术人员可以根据本发明公开的内容和所掌握的本领域技术对本发明内容作出替换或变型，但是这些替换或变型都不应视为脱离本发明构思的，这些替换或变型均在本发明要求保护的权利范围内。
权利要求
1.一种地钱的无性繁育方法，其特种在于该方法包括以下步骤(1)配制MS或B5液体培养基；(2)获取培养组织块将地钱的叶状体剪碎，剪碎的叶状体组织块的大小控制在2 X 2mm-3 X 3mm。利用粗眼的土壤筛可以将过小的组织块筛选掉；(3)组织块的消毒首先用自来水将剪碎的组织块洗干净，然后在超净台上用70%的酒精浸泡1分钟，再用0. 的升汞溶液杀菌5分钟，然后使用无菌水冲洗5次，然后用无菌吸水纸洗干；(4)假根的诱导将步骤(1)中所配置的液体培养基倒入大培养皿，将塑料支架的高度调节至与培养基高度相同，然后将塑料支架放置于培养皿中，将步骤(3)中所获得的无菌组织块放置于塑料支架上，让组织块的底部能接触到培养基，并且保证组织块没有被浸没在培养基中，温度控制在20 22°C左右，培养4 6天，所培养的组织块从碎片边缘一方面长出叶状体带有生长点的顶端部分，另一方面长出假根组织；(5)叶状体的增殖当地钱的组织块长出假根组织后，将塑料支架略微调高，使假根浸没在培养基中，使叶状体的其他部分不接触培养基，这样能使叶状体的茎和叶更好地呼吸，更有效率地利用假根从培养基中吸收的养分，更重要的是，这样能避免叶状体发生腐烂死亡的现象，将温度控制在20 25°C，培养8 10天，待叶状体的宽度达到1厘米，即可收获。
2.权利要求1中所述的地钱的无性繁育方法，其特种在于步骤O)中使用的地钱可以是地钱(M. polymorpha)，裂托地钱(M. cuneiloba)和风兜地钱(M. diptera)。
3.权利要求1或2中所述的地钱的无性繁育方法，其特种在于其中所述的塑料支架的平面上密集地设置孔洞，孔洞的大小为直径0. 5毫米到1毫米。
4.权利要求1或2或3中所述的地钱的无性繁育方法，其特种在于其中所述的塑料支架的支撑腿具有内外两层结构，内层与外层可以相对活动，内外层依靠相互之间的摩擦力定位。
全文摘要
本发明提供了一种新的地钱繁育方法。所述的方法是利用液体培养基对地钱进行繁育。在液体培养基中设置塑料支架，使地钱的组织块不浸没在培养基中。并且对地钱组织块长出假根之前和之后分别管理，从而达到快速高效繁育地钱的目的。
文档编号A01H4/00GK102550407SQ20111044250
公开日2012年7月11日 申请日期2011年12月26日 优先权日2011年12月26日
发明者杜春林 申请人:溧阳市澳谷信息科技有限公司