专利名称：铁皮石斛工厂化栽培方法
技术领域：
本发明涉及药用植物铁皮石斛的栽培方法，尤其涉及铁皮石斛工厂化栽培方法。
背景技术：
铁皮石斛是石斛的一个优良品种，别名黑节草，为兰科多年生附生草本植物。铁皮石斛具有独特的药用价值，以其茎入药，中药名即石斛，属补益药中的补阴药，《中国药典》 益胃生津，滋阴清热，位居“九大仙草”之首。铁皮石斛等少数品种之嫩茎，扭成螺旋状或弹簧状，晒干，商品称为耳环石斛，又名枫斗。多年来，由于产区药农毁灭性采挖，使得野生铁皮石斛资源濒临灭绝，国家已将其列为国家二级保护植物濒危中药材。近年来，我国已经有一些科研机构和企业单位对铁皮石斛的组培和人工栽培技术进行了不断的探索和试验。虽然石斛产业已初具规模，同时在技术上取得了一定的突破，对保护野外种源，提高群众收入也发挥了很大的作用，但该产业尚存在以下问题1、种苗扩繁速度慢、组培苗炼苗、移栽成活率低，极大地限制了铁皮石斛工厂化的发展规模和速度。目前，铁皮石斛人工种植主要采用组培育苗、扦插育苗和分蔸繁殖三种方式。这三种方式工厂化生产又以组培育苗为最好，但目前铁皮石斛组培技术尚不成熟、管理不当等问题致使种苗扩繁速度慢、组培苗炼苗、移栽成活率低。2、铁皮石斛生长速度慢、产量不高、有效成分含量低。比如说铁皮石斛在人工种植时未能施足基肥、追肥，未能控制好温度、湿度都会导致其生长速度和产量跟不上，甚至会产生一些病虫害等。所以提高铁皮石斛的种苗扩繁速度、组培苗的成活率、生长速度、产量以及有效成分含量乃是燃眉之急。
发明内容
本发明的目的是提供一种铁皮石斛种苗扩繁速度快、炼苗成活率高、移栽成活率高、产量高、有效成分含量高的“四高一快”工厂化栽培方法。本发明的目的可以通过以下技术方案来实现铁皮石斛工厂化栽培方法，包括以下具体步骤1、扩繁 将处理过的种子经过消毒程序，放入MS基本培养基+NAA (a-萘酸)0. 4mg/L+ 土豆汁20 % (V/V) +琼脂7g/L的培养基里，进行种子萌发培养，培养温度22 25°C，每日光照 10小时，光强1800 25001X，约2周后种子逐渐转绿，二个月形成原球茎，用放大镜看，可看到原球茎有针叶出现；将原球茎转入MS基本培养基+BA (6-苄基腺嘌呤)0. 2mg/L+ 土豆汁20% (V/V) +琼脂7g/L培养基里，进行原球茎增殖、分化培养，约2个月可观察到瓶内原球茎分化出小苗，高约Icm左右，同时伴随着有部分新的原球茎产生；将小苗转入MS基本培养基+NAAO. 3mg/L+ 土豆汁20% (V/V) +琼脂8g/L的培养基里，进行壮苗生根培养，约2个月可观察到小苗发育成2.0 3. 5cm的中苗，将中苗再转接到同样的培养基里，再进行大苗培养，约2个月可培养出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶炼苗、移栽。2.炼苗组培苗在组培室培养时处于人工控制温度、光照、水分和养分的理想化无菌环境， 移栽到外界后，需要尽可能提供与实验室接近的条件，逐步转换到自然条件使其适应外界环境、从异养到自养的过程。将挑好的大苗从培养架上取下，要轻拿轻放，迅速移到有双层遮阳网(阴雨天与早上傍晚时可以把遮阳网拉开)的大棚里，均勻地放在地上，保证四周不能通风(如果有炼苗室方法会有所变化)，在中午气温有点高时往瓶壁喷点水(保湿、降温)；24小时后掀开一层遮阳网，保湿；48小时后把盖子拧开，但不要拿下(半透气状态)，保湿；72小时后把盖子全拿下(全透气状态)，及时往瓶内喷水保湿；直至茎呈深绿色即可移栽。3.配制、消毒基质铁皮石斛在基质配比泥炭树皮刨花=2:4:4 ；在基地双层遮荫大棚中进行，搭设种植床栽培，床离地20cm高架空，宽2m，长21m。树皮、刨花和细锯末需高温蒸煮发酵处理后使用。在夏季高温季节，在大棚中把基质堆成1. 2m高、2. 5m宽的基质堆，将基质喷湿，使基质含水量超过80%，然后用塑料薄膜覆盖基质堆，密闭于大棚内。每隔IOd揭开薄膜翻堆 1次，翻堆5 6次基质变褐后发酵完全，将基质摊开冷却后装袋备用。泥炭不做处理。用搅拌机将各基质按比例均勻混合后，铺设到种植床中。移栽前喷施0. 05%新洁尔灭溶液杀菌。4.移栽将组培苗瓶苗用水注满，轻轻摇晃瓶子，连同培养基一同倒入盆里，不可强拉硬扯，统一选择株高2. 5cm、带2 3条根的小苗，用清水洗净根部的培养基和菌源，再用800 倍多菌灵浸泡3min，再移栽到种植床中，3株1穴，穴行距14cmX Hem。移栽后浇定根水，以基质浇透为准。养护时每天定时喷雾4 5次，湿度保持在80%左右，待新根长出后逐步减少喷雾次数。5.采收采收时期传统上，中药材的采收都是在产量(生物量)最高时进行，这实际上只考虑了采收期的一个因子，更重要的还应该看其有效成分何时达积累高峰。对同一药材的不同治病目的来讲，有效成分往往是不同的，不同的有效成分也就有可能在不同的时期才能达到其最高的积累量。故此在选择采收期时，既要考虑产量，又要考虑质量(有效成分)， 既要看不同有效成分含量的高低又要看同一成分对不同治病目的所起作用的大小(在数学表达式中以权值表示)。采收方法用刀切下株丛近半，留余继续生长。药用有鲜石斛与干石斛两种，鲜石斛四季勻可采收，但以秋后采者质好。挖回后如在冬天则放置于带有少量水分的石板地或砂石地上，用少量水湿润，也可平放在竹筐内，上盖蒲包，注意空气流通，即可药用。通过本发明技术方案具有以下有益效果有效解决铁皮石斛种苗的来源和种苗的地道性，与传统种苗扩繁相比，种苗的扩繁速度提高了 37%，炼苗、移栽成活率提高到90%以上，产量提高30%以上；与野生铁皮石斛的有效成分含量相比，本发明栽培的铁皮石斛多糖含量与野生铁皮石斛相当，氨基酸、微量元素含量略高于野生铁皮石斛含量。
具体实施例方式下面结合具体实施例进一步阐述本发明的技术特点。1、扩繁将野生铁皮石斛原产地成熟的蒴果种子采回清洗干净后，用次氯酸钠浸泡 IOmin,再用清水洗干净，然后用温水浸泡15min，再用纱布包裹起来放在干净的培养皿里， 保持湿润，待其裂开后，放入MS基本培养基+NAA (a-萘酸)0. 4mg/L+ 土豆汁20 % (V/V) + 琼脂7g/L的培养基里，进行种子萌发培养，培养温度22 25°C，每日光照10小时，光强 1800 25001x，约2周后种子逐渐转绿，1个月形成原球茎，用放镜看，可看到原球茎有针叶出现；将原球茎转入MS基本培养基+BA (6-苄基腺嘌呤)0. 2mg/L+ 土豆汁20 % (V/V) +琼脂7g/L培养基里，进行原球茎增值、分化培养，约1个月可观察到瓶内原球茎分化出小苗， 高约Icm左右，同时伴随着有部分新的原球茎产生；将小苗转入MS基本培养基+NAAO. 3mg/ L+土豆汁20% (V/V)+琼脂8g/L的培养基里，进行壮苗生根培养，约2个月可观察到小苗发育成2. 0 3. 5cm的中苗，将中苗再转接到同样的培养基里，再进行大苗培养，约2个月可培养出5cm高以上的大苗，大苗可出瓶练苗、移栽。2.炼苗将挑好的大苗从培养架上取下，要轻拿轻放，迅速移到有双层遮阳网(阴雨天与早上傍晚时可以把遮阳网拉开)的大棚里，均勻地放在地上，保证四周不能通风(如果有炼苗室方法会有所变化)，在中午气温有点高时往瓶壁喷点水(保湿、降温)；24小时后掀开一层遮阳网，保湿；48小时后把盖子拧开，但不要拿下(半透气状态)，保湿；72小时后把盖子全拿下(全透气状态)，及时往瓶内喷水保湿；直至茎呈深绿色即可移栽。3.基质的配制、消毒所述的基质配比为泥炭(苏州太湖)树皮刨花=2:4: 4;在基地双层遮阳网的大棚中进行，搭设种植床栽培，床离地20cm高架空，宽2m，长21m。树皮、刨花和细锯末需发酵处理后使用。在夏季高温季节，在大棚中把基质堆成 1. ail高、2. 5m宽的基质堆，将基质喷湿，使基质含水量超过80%，然后用塑料薄膜覆盖基质堆，密闭于大棚内。每隔IOd揭开薄膜翻堆1次，翻堆5 6次基质变褐后发酵完全，将基质摊开冷却后装袋备用。泥炭不做处理。用搅拌机将各基质按比例均勻混合后，铺设到种植床中。移栽前喷施0.05%新洁尔灭溶液杀菌。4.移栽将组培苗瓶苗用水注满，轻轻摇晃瓶子，连同培养基一同倒入盆里，不可强拉硬扯，统一选择株高2. 5cm、带2 3条根的小苗，用清水洗净根部的培养基和菌源，再用800 倍多菌灵浸泡3min，再移栽到种植床中，3株1穴，穴行距14cmX14cm。移栽后浇定根水， 以基质浇透为准。4天左右喷施一次1/2MS营养液。养护时每天定时喷雾4 5次，湿度保持在85%左右，待新根长出后逐步减少喷雾次数。当有3-5条新根时，可以适当喷施800 倍尿素，促使其进行营养生长。上述扩繁、炼苗和移栽在管理的过程中，应根据当地实际情况，按照国家GAP质量
管理规范科学管理。
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与传统种苗扩繁相比，种苗的扩繁速度提高了 37%，炼苗、移栽成活率提高到 90%以上，产量提高30%以上；与野生铁皮石斛的有效成分含量相比，本发明栽培的铁皮石斛多糖含量与野生铁皮石斛相当，氨基酸、微量元素含量略高于野生铁皮石斛含量。
权利要求
1.铁皮石斛エ厂化栽培方法，其特征在于包括以下具体步骤1)扩繁将处理过的种子经过消毒程序，放入组成为MS基本培养基、0. %ig/L的NAA、20%的土豆汁和7g/L的琼脂的培养基里，进行种子萌发培养；1个月后形成原球茎，将原球茎转入组成为MS基本培养基、0. 2mg/L的BA、20%的土豆汁和7g/L的琼脂的培养基里，进行原球茎増殖、分化培养；1个月后原球茎分化出Icm士0.2高的小苗，将小苗转入组成为MS基本培养基、 NAAO. :3mg/L、土豆汁20%和琼脂8g/L的培养基里，进行壮苗生根培养；2个月后小苗发育成2. 0 3. 5cm的中苗，将中苗再转接到同样的培养基里，再进行大苗培养；2个月后培养出高5cm以上的大苗，大苗可出瓶练苗、移栽；2)炼苗将大苗从培养架上取下，迅速移到有双层遮阳网的大棚里，均勻地放在地上，保证四周不能通风，并在中午气温有点高时往瓶壁喷点水ク4小时后掀开ー层遮阳网，保湿；48小时后把盖子拧开，但不要拿下，保湿；72小时后把盖子全拿下，及时往瓶内喷水保湿；直至苗的茎成深緑色即可移栽；3)配制、消毒基质所述的基质配比为泥炭树皮刨花=2:4:4 ；树皮、刨花和细锯末需高温蒸煮发酵处理后使用；在基地双层遮阳网大棚中搭设种植床栽培，床离地高20cm架空，宽2m，长 21m。4)移栽将组培苗瓶苗用水注满，轻轻摇晃瓶子，连同培养基一同倒入盆里，选择株高2. 5cm、带 2 3条根的小苗，用清水洗浄根部的培养基和菌源；再用800倍多菌灵浸泡:3min后移栽到种植床中，3株1穴，穴行距14cmX 14cm ；移栽后浇定根水，以基质浇透为准；养护时每天定时喷雾4 5次，湿度保持在80士 2%，待新根长出后逐步减少喷雾次数；5)采收用刀切下株丛近半，留余继续生长，鲜石斛四季勻可采收，挖回后如遇冬天则放置于带有少量水分的石板地或砂石地上，用少量水湿润，也可平放在竹筐内，上盖蒲包，注意空气流通，即可药用。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛エ厂化栽培方法，其特征在干步骤1)中，所述的种子萌发培养温度为22 25°C，每日光照10小吋，光强1800 25001x。
3.根据权利要求1所述的铁皮石斛エ厂化栽培方法，其特征在干步骤幻中，所述的基质高温蒸煮发酵处理方法为在夏季高温季节，在大棚中把基质堆成1. ail高、2. 5m宽的基质堆，将基质喷湿，使基质含水量超过80%，然后用塑料薄膜覆盖基质堆，密闭于大棚内； 每隔IOd揭开薄膜翻堆1次，翻堆5 6次基质变褐后发酵完全，将基质摊开冷却后装袋备用，泥炭不做处理；用搅拌机将各基质按比例均勻混合后，铺设到种植床中；移栽前喷施 0. 05%新洁尔灭溶液杀菌。
4.根据权利要求1所述的铁皮石斛ェ厂化栽培方法，其特征在于步骤幻中，鲜石斛在秋后采收。
全文摘要
本发明公开了一种铁皮石斛工厂化栽培方法，属中药材栽培技术领域。本发明以新鲜野生铁皮石斛种子为原始材料，获得铁皮石斛无菌培养系，包括种子处理、种苗扩繁、组培苗炼苗、移栽等相关技术，能有效解决铁皮石斛种苗的来源和种苗的地道性，与传统种苗扩繁相比，种苗的扩繁速度提高了37％，炼苗、移栽成活率提高到90％以上，产量提高30％以上；与野生铁皮石斛的有效成分含量相比，本发明栽培的铁皮石斛多糖含量与野生铁皮石斛相当，氨基酸、微量元素含量略高于野生铁皮石斛含量。
文档编号A01G31/00GK102523881SQ20121001299
公开日2012年7月4日 申请日期2012年1月16日 优先权日2012年1月16日
发明者朱恩灿, 邢斌, 魏渊源 申请人:澄思源生物科技(上海)有限公司