胚芽乳酸杆菌cmu995菌株的新用途

胚芽乳酸杆菌cmu995菌株的新用途
【专利摘要】本发明揭露一种胚芽乳酸杆菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株的新用途，其应用于保护肝脏。本发明另外揭露一种保护肝脏的方法，包括将上述胚芽乳酸杆菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株传输至一哺乳动物。本发明还揭露一种用于保护肝脏的益生菌组合物，其包含上述胚芽乳酸杆菌（Lactobacillus?plantarum）CMU995菌株。
【专利说明】胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的新用途
【技术领域】[0001]本发明涉及胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株的新用途,且特别是涉及应用于保护肝脏的胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的用途。
【背景技术】
[0002]乳酸菌为存在于人类和动物肠道中的主要细菌，由于其具有许多有益于人体及动物体的生理活性，故常应用于各种益生菌(probiotics)产品中。目前已有许多乳酸杆菌于抑制病原菌的应用的相关专利，例如美国专利第5，603，930号中所揭露的约氏乳酸杆菌(Lactobacillus johnsonii)菌株,可抑制肠毒素及肠侵入性病原菌；美国专利第3，953, 609号中所揭露的雷特氏乳酸杆菌菌株(Lactobacillus Iactis)菌株，可抑制消化系统中大肠杆菌的生长；以及美国专利第6，491，956号中所揭露的嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus)菌株,可预防及治疗由幽门螺旋杆菌感染所造成的胃炎、十二指肠溃瘍及胃溃瘍。
[0003]乳酸杆菌若要在动物体内有效地发挥功能，除了需要具备基本的生理或药理活性外，还需具有两个重要特性。首先，该乳酸杆菌需对动物肠胃道所分泌的胃酸和胆碱具有耐受性，始可存活于消化系统中而到达肠道。再者，该乳酸菌对动物宿主的肠道上皮细胞需有牢固的吸附能力，始可于肠胃道中与病原菌竞争吸附于肠道。两者兼备才可发挥高效率以保护肠道、排除毒素、抑制病原菌的功能。
[0004]本发明人早期筛选出的肠道吸附型新颖胚芽乳酸杆菌CMU995菌株，经由活体内及体外的相关实验证实，此菌株除了对肠道及泌尿道的病原菌具有良好的抑制效果之外，还发现对肠胃道及泌尿道的上皮细胞具有优异的附着能力，故可持久且有效地保护肠胃道和泌尿道免于病原菌的感染。

【发明内容】

[0005]本发明的胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株具有稳定肠道上皮细胞的功能，且可降低上皮细胞受到肠内毒素的破坏而死亡。在动物活体试验更发现，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可抑制酒精所引发的肠内毒素穿越肠道组织进入血液中，因此，可抑制酒精或毒素所诱发的肝脏发炎及肠道发炎现象。又以临床人体试验发现，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可有效改善肝癌及肝硬化患者的血液毒素及血氨浓度。因此，CMU995菌株可应用于预防和/或治疗因酒精和/或毒素所引发的相关疾病。
[0006]本发明的一个实施方式，提供一种胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的新用途，其应用于保护肝脏。
[0007]前述胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株保藏于财团法人食品工业发展研究所，其保藏编号为BCRC 910472，同时也保藏于德国国家菌种保藏中心(Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH, DSMZ),其保藏编号为 DSM 23780。
[0008]前述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株保护肝脏的新用途，可用于降低评估肝脏功能指针酶，为天冬氨酸转氨酶Aspartate aminotransferase (AST)和/或丙酸转氨酶Alanineaminotransferase (ALT)。
[0009]前述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株保护肝脏的新用途，可用以降低血液中的脂质、胆固醇、内毒素、炎性细胞激素TNF- α和/或酒精含量，也可直接降低肝脏中的胆固醇和/或
内毒素含量。
[0010]前述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株保护肝脏的新用途，也可用以预防酒精、细胞激素TNF-α和/或内毒素所引发的肝脏发炎。
[0011]通过上述用途，一方面减轻肝脏代谢的负担，另一方面预防肝炎的发生，并降低AST和/或ALT的肝脏功能指数，进而达到保护肝脏的功效。
[0012]根据本发明的一个实施方式，提供一种能保护肝脏的方法，包括将前述胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum) CMU995菌株传输至一哺乳动物，且哺乳动物可为人类。
[0013]本发明的一个实施方式是在提供一种用于保护肝脏的益生菌组合物，其包含前述胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株，其中CMU995菌株的有效浓度范围为 I X 105CFU/g 至 I X 1012CFU/g 的干燥粉末。
[0014]根据本发明的一个实施方式，前述保护肝脏的益生菌组合物，其为药品、饲料、饮料、营养补充品、乳制品、食品、健康食品。根据本发明的一个实施方式，前述保护肝脏的益生菌组合物，其形式可为粉剂、锭剂、造粒、栓剂、微胶囊、安瓿(安瓶；ampoule/ampule)、液剂、喷剂或塞剂等剂型。另外 ，保护肝脏的益生菌组合物也可用以预防或治疗包括降低酒精及毒素所引发的全身性发炎、肝炎、肠炎或肾炎等相关疾病，并可降低毒素所诱导的脏器病变，例如:肾脏发炎、肾衰竭或大肠癌生成等的器官病变。
[0015]本发明的技术及实施方式，将描述于以下内容中，以供本发明所属领域普通技术人员据以明了本发明的特征。
【专利附图】

【附图说明】
[0016]为了使本发明的上述和其它目的、特征、优点与实施例能更明显易懂，提供附图，在附图中:
[0017]图1绘示本发明的一个实施例的血清中天冬氨酸转胺酶(AST, aspartateaminotransferase)在实验期间的浓度变化图。
[0018]图2绘示本发明的一个实施例的血清中丙氨酸转氨酶(ALT, alanineaminotransferase)在实验期间的浓度变化图。
[0019]图3绘示本发明的一个实施例的血清中三酸甘油酯在实验期间的浓度变化图。
[0020]图4绘示本发明的一个实施例的血清中总胆固醇在实验期间的浓度变化图。
[0021]图5绘示本发明的一个实施例的血清中内毒素在实验期间的浓度变化图。
[0022]图6绘示本发明的一个实施例的肝脏中内毒素在实验期间的浓度变化图。
[0023]图7绘示本发明的一个实施例的肝脏中TNF-α的浓度在实验期间的浓度变化图。
[0024]图8绘示本发明的一个实施例的大肠中TNF-α的浓度在实验期间的浓度变化图。
[0025]图9a绘示本发明的一个实施例的服用包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物的肝硬化患者血液中TNF- α变化数据。
[0026]图9b绘示本发明的一个实施例的服用包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物的肝硬化患者血液中血氨变化数据。
[0027]图9c绘示本发明的一个实施例的服用包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物的肝硬化患者血液中内毒素变化数据。
【具体实施方式】
[0028]下述将更详细讨论本发明的实施方式。然而，此实施方式可为各种发明概念的应用，可被具体实行在各种不同的特定范围内。特定的实施方式是仅以说明为目的，且不受限于揭露的范围。
[0029]本申请新颖用途的胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum),或可称为植物乳酸杆菌，菌株是本发明人早期所筛选出，并将之命名为CMU995菌株，其保藏于财团法人食品工业发展研究所，保藏编号为BCRC 910472，以下称为胚芽乳酸杆菌CMU995菌株。
[0030]经由活体内及体外的相关实验，上述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株，除了具有抑制病原菌活性的功效之外，尚发现对肠胃道或泌尿道的上皮细胞具有优异的附着能力，故可持久且有效地保护肠胃道和泌尿道免于病原菌的感染。
[0031]由于胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可持久且有效地保护肠胃道和/或泌尿道免受病原菌感染，使用胚芽乳酸杆菌CMU995菌株，可降低酒精进入生体的血液中，因此可制成具有代谢酒精或抵挡酒精进入血液功能的解酒药品或食品或饮料等制剂，由此运用于保护肝脏。此外，因为酒精也会引发肠道内病原菌及毒素的增加，而胚芽乳酸杆菌CMU995菌株也具有抑制肠内毒素产生的功能，故可降低毒素进入血液内而运行至肝脏及其它器官组织。因此，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株具有排除毒素的功效及保护肝脏的用途。
[0032]本发明的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株及其益生菌组合物，可制造成药品、健康食品、营养补充品、饮料、酸奶、一般食品及动物饲料等形式的食用品。再者，前述保护肝脏的益生菌组合物，其剂型可为粉剂、胶囊、造粒、微胶囊、锭剂、喷剂、液剂或塞剂等剂型。根据本发明的一个实施例的含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物，其具有预防或治疗疾病的功效，可应用于保护肠道细胞、降低肠道及血液毒素、抑制酒精吸收，进而达到保护肝脏器官的效果。
[0033]现以下列具体实施例进一步例示说明本发明。下列实施例仅提供作为说明，而非用以限制本发明的范畴。
[0034][实施例1]
[0035]附着力分析
[0036](I)制备乳酸杆菌菌株
[0037]进行肠胃道细胞的附着力分析所使用的乳酸杆菌包括:本发明的Lactobacillusplantarum CMU995> Lactobacillus rhamnosus GG (LGG,鼠李糖乳酸杆菌，ATCC 53103) >Lactobacillus plantarum 299v 及 Lactobacillus casei strain Shirota0 以 MRS 培养液(Difco)活化所有受试乳酸杆菌两次后，分别将菌株接种至5毫升的MRS培养液中进行培养。24小时后，取I毫升菌液，并以6000转/分钟离心10分钟，以pH 7.2的磷酸盐缓冲溶液(PBS)清洗两次后， 以吸光值600nm调整浓度至IxlO9个菌落形成单位(Colony-FormingUnit, CFU)/mL以进行后续的吸附试验。
[0038](2)培养肠胃道细胞株
[0039]本试验使用的肠胃道细胞株为Caco-2 & HT-29人体肠癌细胞株(human colonadenocarcinoma)及AGS胃癌细胞株(gastric adenocarcinoma),皆购自台湾生物资源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center, BCRC)。Caco-2 & HT-29细胞的培养基为DMEM培养基，AGS细胞的培养基为F-12培养基，以上培养基皆需添加10体积％的胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)细胞经活化稳定后才进行后续实验。
[0040](3)乳酸杆菌附着性分析
[0041]将实验B中制备的细胞分装于96孔细胞培养盘中，每个孔中加入I X IO4个细胞，每天置换200微升(μ?的新鲜培养基。于细胞培养箱中培养48小时后，加入20微升实验A所制备的不同乳酸菌于细胞中，进行附着I小时后，使用磷酸盐缓冲溶液清洗3次，以去除未附着的乳酸菌，以10%的福尔马林液固定细胞及乳酸菌，30分钟后，再以磷酸盐缓冲溶液清洗细胞3次，最后以100微升结晶紫进行染色5分钟，再以75%酒精清洗以去除细胞上的染色剂。利用相差显微镜观察各种乳酸菌对肠胃道上皮细胞的吸附性，并随机在不同的显微镜视野下，观察并计算约50个细胞的总乳酸菌吸附量，最后计算每个细胞的平均吸附菌数。
[0042]附着力分析的实验结果
[0043]结果如下列表1所示。由表1结果可知，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株相较于其它菌株，具有更优异的肠胃道上皮细胞附着能力。
[0044]表1各菌株对不同的肠胃道上皮细胞的附着能力比较乳酸菌附着数(菌落形成单位 / 细胞)(CFU/cell)
[0045]
大肠上皮细胞株结肠上皮细胞株胃上皮细胞株
菌株种类
Caco-2HT-29AGS
CMU99553.6±6.858.2±10.5M 7±6，
LGG (ATCC 53103)7.5±1.56.7+2.94.4±0.8
LaciohaciIhis casei

3.2 士 3.45.5 土 2.12.8 土 3.0
strain Shirota
LaciohacilIus

15.7=3.516.5:3.212.6 士 2.4
plantarum 299v
[0046][实施例2]
[0047]动物试验
[0048](1)实验分组
[0049]本试验的酒精性肝炎模式乃参考Segawa等人(2008)的研究报告。将8周大的C57BL/6J小鼠随机分成6组，每组8只，起始体重为23± I克，实验分组如下:
[0050]A组；正常对照组(Control):小鼠可任意取食无酒精添加的Lieber-DeCarli流质饲料，且每天管灌喂食0.2mL灭菌的生理食盐水。[0051]B组；阴性对照组(酒精肝损伤组，Alcohol):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流质饲料,且每天管灌喂食0.2mL灭菌的生理食盐水。
[0052]C 组；Lactobacillus plantarum CMU995 实验组(CMU995):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流质饲料，且每天管灌喂食0.2mL浓度为2X 1010CFU/mL的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株。
[0053]D组；Lactobacillus rhamnosus GG实验组(LGG):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流质饲料，且每天管灌喂食0.2mL浓度为2X 1010CFU/mL的LGG益生菌。
[0054]E 组；Lactobacillus casei strain Shirota 实验组(LC):小鼠可任意取食含酒精的Lieber-DeCarli流质饲料，且每天管灌喂食0.2mL浓度为2X1010CFU/mL的Lactobacillus casei strain Shirota 益牛菌。
[0055](2)菌液的制备
[0056]各菌株的实验菌粉为菌数浓度达I X 10nCFU/g的冷冻干燥粉末，菌粉放置于4°C冰箱中。于每日喂食小鼠前新鲜制备，将菌粉精秤I克装入无菌离心管中，以灭菌的生理食盐水充分混合配制成浓度为2X 101(lCFU/mL的菌液。
[0057](3)益生菌喂食与肝炎诱导
[0058]实验初期，各组小鼠皆以Lieber-DeCarli流质饲料给予自由摄食，待适应环境一周后即开始进行实验。首先，各组小鼠开始每天管灌喂食0.2mL不同的实验样品，A、B组喂食生理食盐水，C、D、E组则喂食新鲜制备的益生菌菌液，连续每天喂食I次至小鼠牺牲为止。肝炎诱导则从益生菌投予的第3天开始进行，除了 A组之外，其余B、C、D、E组的小鼠饲料中均添加入酒精，酒精起始浓度为1.25%，以每两天增加1.25%剂量的酒精浓度于饲料中，最后增加到最高酒精浓度为5%，并持续喂食此酒精浓度6周，肝炎诱导期共7周。
[0059](4)小鼠牺牲与检体收集
[0060]本试验定义在小鼠开始喂食酒精以诱导肝炎之日为实验期的第O天，小鼠于第7周结束后(第49天)牺牲。在小鼠适应环境及肝炎诱导实验期间，于实验期的第O天及第28天以脸颊采血法收集适量每只小鼠的血液，于牺牲前隔夜禁食，牺牲时以断头法收集每只小鼠的全血，并小心解剖后取出小鼠的肝脏及大肠段后，放入_80°C冷冻冰箱中急速冷冻。
[0061](5)血液、肝脏及肠道的分析
[0062]将冰冻的肝脏或大肠段分别取出适当重量后放入研钵中，倒入液态氮研磨检体后，收集检体粉末至离心管，秤重后加入定量的HEPES缓冲溶液，混合均匀后准备进行后续分析工作。血液则以低速离心后取出血清准备后续分析。分析以全自动血液分析仪(CobasMira plus, Roche, USA)或酶联免疫分析仪进行各项生化检测,项目包含天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、三酸甘油酯、总胆固醇、内毒素、TNF-α的浓度测定。
[0063](6)统计分析
[0064]实验数据使用SAS 统计分析软件(Statistical Analysis System, V.8.02ForWindows, 2001)进行ANOVA分析各组间的差异性,显著性差异的判断标准为p < 0.05,实验结果以SigmaPlot 10.0软件作图。
[0065]动物试验的结果
[0066]参照图1及图2，其分别绘示血清中AST及ALT在实验期间的浓度变化图。由图中可见，喂食胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的小鼠，血液中所检测到的肝脏功能评估指针酶AST及ALT明显较其它喂食酒精诱导肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸杆菌CMU995菌株有良好的保护肝脏效果，可降低酒精对肝脏的伤害。
[0067]参照图3及图4，其分别绘示血清中三酸甘油酯以及总胆固醇在实验期间的浓度变化。由图中可见，喂食胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的小鼠，血液中所检测到的三酸甘油酯及总胆固醇明显较其它喂食酒精诱导肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可降低酒精所引发的闻血脂症。
[0068]参照图5及图6，其分别绘示血清中内毒素(Endotoxin)以及肝脏中内毒素在实验期间的浓度变化。由图中可见，喂食胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的小鼠，在血液及肝脏中所检测到的内毒素均明显较其它喂食酒精诱导肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可降低酒精所引发的毒素进入体内。
[0069]参照图7及图8，其分别绘示肝脏以及大肠中发炎细胞激素TNF-α的浓度在实验期间的浓度变化。由图中可见，喂食胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的小鼠，肝脏及肠道中所检测到的发炎细胞激素TNF-α明显较其它喂食酒精诱导肝炎的小鼠低，表示胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可降低肝脏及肠道的发炎现象。
[0070][实施例3]
[0071]临床试验
[0072]试验规划收集肝硬化的患者，完成试验的受试者共26人。参与研究的受试者于试验前及服用胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum) CMU995益生菌组合物4周后,分别收集患者的血液及粪便以进行检验分析。
[0073](1)试验的主要纳入与排除条件:
[0074]A.纳入条件:
[0075]1.肝硬化的病患，年龄30-70岁。
[0076]B.排除条件:
[0077]1.其它主要门静脉高压症并发症，如肝肾综合征或细菌性腹膜炎者。
[0078]2.其它神经系统疾病患者和急性代谢疾病，如中风，心脏衰竭或呼吸衰竭或急性肾衰竭或败血症者。
[0079]3.严重肝昏迷(心理状态等级3-4)者。
[0080]4.同时合并有严重系统性疾病，包括癌症、肾脏及心肺功能不全者。
[0081]5.目前服用含有益生菌的相关组合物或产品者。
[0082]6.女性病患有怀孕及哺乳者。
[0083](2)益生菌组合物:
[0084]临床试验所施用的益生菌组合物为胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株及其它赋形剂所组成。前述益生菌组合物每单位为3克粉末，内含总益生菌菌数为3xl01(lCFU，即菌粉的菌数浓度为lxl01(lCFU/g。
[0085](3)检验分析
[0086]实验规划共收集26例肝硬化的患者，经签署受试者同意书后给予患者4周份量的益生菌组合物，每日服用一单位，于餐后服用。于服用益生菌组合物前及服用益生菌组合物4周后，采集患者的血液以供检验，分析项目包括血清炎性细胞激素TNF-α、血液内毒素及血氨浓度，以评估益生菌治疗前后对患者的改善情形。实验分析操作步骤皆按照发明人所在单位的药学系微生物实验室的微生物标准分析步骤进行，血液分析则依照现有商业试剂盒步骤进行检测，并以其标准品做检量线。最后所得到的数据以SigmaPlotl0.0进行作图及统计分析。
[0087]临床试验的结果
[0088]参照图9a至图9c，其分别绘示服用包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物的肝硬化患者血液中的炎性细胞激素TNF-α、血氨及内毒素的变化数据。由图中可见，肝硬化的患者每日服用含有胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的益生菌组合物，4周后，血液中的炎性细胞激素TNF-α、血氨及内毒素皆有显著性降低(a，b英文小写字母不同表示治疗前后有显著性差异JPP〈0.05)。因此，证明肝硬化的患者服用前述益生菌组合物后，血液确实有改善的现象。
[0089]由上述本发明实施方式可知，应用本发明具有下列优点:
[0090]1.此胚芽乳酸杆菌CMU995菌株对胃酸及胆盐具有良好的耐受力，并且对动物宿主的肠道上皮细胞有牢固的附着能力，因此，可常驻生存于胃肠道消化系统中，进而与肠道中的病原菌竞争吸附，达到排除病原菌的效果。前述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株也可牢固地附着于泌尿道的上皮细胞，故也可与泌尿道中的病原菌竞争吸附，达到保护泌尿道的功效。更进一步地，经由肠道细胞、动物及人体实验证实，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株对肠道细胞具有稳定的效果，可降低细胞受到内生性或外生性的毒素伤害。再以动物及人体临床实验证实，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可抑制酒精和/或毒素穿越肠道进入人体或动物体内，而达到保护肠道、肝脏及其它器官的效果。
[0091]2.就预防应用而言，可将胚芽乳酸杆菌CMU995菌株添加于如饲料、饮料、营养补充品、或保健食品中，使此菌株附着及保护食用者的`肠胃道上皮细胞，而抑制内毒素、酒精、霉菌毒素或细菌侵入体内，而产生保护肝脏、降低毒素进入血液、解酒、排毒、抑制发炎、降低器官病变及抗癌等的效果。
[0092]3.就治疗应用方面，当人体或动物体的体内遭受病原菌产生的毒素、酒精或其它有毒物质侵入时，而造成血液异常或疾病病征时，例如:内毒素、血氨等毒化物过高时，可服用包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的药物或食品，透过胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的摄取后可达成降低血液毒素的效果。举例而言，肝癌或肝炎患者可服用胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的相关制剂，来降低血氨过高、肝脏发炎或肠道发炎的现象。因此，总体来说，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可达到预防或治疗因毒素或酒精所引发的肠胃道和肝脏等的相关疾病。
[0093]4.胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可通过稳定肠道细胞来抑制肠胃道中的毒素转入血液之外，尚可抑制细菌或毒素在肠道中累积，经由此二种排毒机制的加乘作用来保护摄取者。『排毒』一词的『毒』，为有害物质、霉菌毒素、致癌物等，例如:肠道内毒素、血液毒素、肠道中病原菌、酒精、有毒药物、化学性有害物质及塑化剂等，这些毒素会进入血液而运行至动物或人类的全身，而导致肝脏或其它器官的病变和伤害。又，本菌株及其组合物也具有帮助血液或肠道中的有毒物质、病原菌或酒精加速从体内排除的功效。
[0094]5.由于本发明菌株的具有抑制毒素进入血液及排除毒素的双重特性，其可广泛地运用于各种医疗及保健产品中。因此，本发明也提供一种用以保护肝脏的益生菌组合物，其包含胚芽乳酸杆菌CMU995菌株。基于上述胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的特性，前述益生菌组合物可用于抑制各种毒物吸收、抑制酒精吸收或抑制病原菌。
[0095]6.胚芽乳酸杆菌CMU995菌株可用于抑制肠胃道中的各种有害物质，举例而言，可抑制选自以下群组的有害物质:细菌产生毒素、霉菌产生毒素、病毒产生毒素、酒精、饮食中的毒素、农药、药物、食品添加物、化学性有害物质、塑化剂及前述的组合，尤其是用于抑制酒精及微生物所产生的毒素。
[0096]7.本发明的保护肝脏的益生菌组合物可呈任何形式，包含:药品、饲料、饮料、营养补充品、食品、保健食品、乳制品或塞剂。胚牙乳Ife杆囷CMU995囷株也可添加于食品中，例如制成包含此菌株的乳制品等。
[0097]8.另外，也可视需要于本发明益生菌组合物中添加任何适宜的添加物，而进一步加强胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的附着效果，和/或抑制毒素进入血液，和/或加速毒素排除的效果。又或可以添加其它营养成分或药物成分，以增加组合物的运用灵活性与调配度。举例言之，本发明的益生菌组合物可另含有一种或多种如综合维生素，或添加其它益生菌，亦或其它中草药成分等物质，以加强排毒作用或肝脏的代谢，只要添加的该活性成分对胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的效益没有不利的影响，将可与胚芽乳酸杆菌CMU995菌株混合，用以发挥协同或加成的效果。
[0098]9.本发明的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株及其组合物，具有多种应用形式用以保护肠道细胞、降低肠道及血液毒素、抑制酒精吸收、保护肝脏及全身其它器官等的效果。例如，胚芽乳酸杆菌CMU995菌株及其组合物可制造成医药组合物、健康食品、营养补充品、饮料、酸奶、一般食品及动物饲料等型式，以预防或治疗疾病。
[0099]虽然本发明已以实施方式揭露如上，然而其并非用以限定本发明，任何本领域技术人员，在不脱离本发明的精神和范围内，可作各种修改与改变，因此本发明的保护范围以权利要求书中所界定为准。`
【权利要求】
1.一种胚芽乳酸杆菌(Lactobacillus plantarum)CMU995菌株的用途,其应用于保护肝脏。
2.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该胚芽乳酸杆菌CMU995菌株保藏于财团法人食品工业发展研究所，其保藏编号为BCRC 910472，及保藏于德国国家菌种保藏中心，其保藏编号为DSM23780。
3.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低评估肝脏功能指针天冬氨酸转氨酶(AST)和/或丙氨酸转氨酶(ALT)以保护肝脏。
4.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低血液和/或肝脏中的胆固醇以保护肝脏。
5.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低血液中的血脂以保护肝脏。
6.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低血液中的酒精含量以保护肝脏。
7.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低血液中的内毒素以保护肝脏。
8.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低肝脏的内毒素以保护肝脏。
9.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以降低血液中的炎性细胞激素TNF- α以保护肝脏。
10.根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株的用途，其中该应用于保护肝脏是用以预防酒精、炎性细胞激素TNF-α或内毒素所引发的肝脏发炎。
11.一种保护肝脏的方法，包括将权利要求1的胚芽乳酸杆菌(Lactobacillusplantarum) CMU995菌株传输至一哺乳动物。
12.根据权利要求11的保护肝脏的方法，其中该哺乳动物为人类。
13.一种用于保护肝脏的益生菌组合物，其包含根据权利要求1的胚芽乳酸杆菌CMU995菌株，其中该胚芽乳酸杆菌CMU995菌株系浓度为I X 105CFU/g至I X 1012CFU/g的干燥粉末。
14.根据权利要求13的保护肝脏的益生菌组合物，其作为药品、饲料、饮料、营养补充品、乳制品、食品、健康食品O
15.根据权利要求13的保护肝脏的益生菌组合物，其用以预防或治疗包括降低酒精及内毒素所引发的肝脏发炎，并降低内毒素所诱导的病变和/或癌症的生成。
16.根据权利要求13的保护肝脏的益生菌组合物，其形式为粉剂、锭剂、造粒、栓剂、微胶囊、安瓿、液剂、喷剂或塞剂。
【文档编号】A23K1/16GK103655637SQ201210380750
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年10月9日 优先权日:2012年8月29日
【发明者】林文鑫, 吴启瑞 申请人:中国医药大学