专利名称：千层金组培快繁工艺的制作方法
技术领域：
本发明涉及植物组织培养技术领域，特别是千层金组培快繁工艺。
背景技术：
千层金(Melaleuca bracteata)为桃金娘科白千层属常绿乔木,别名黄金宝树、黄金香柳、黄金串钱柳，是20世纪90年代初选育的变异新树种，1999年由新西兰首次引入中国。此树树型优美，主杆直立，嫩枝红色，易修剪成型，生长快，叶面全年金黄色或鹅黄色，气味芳香，可耐_4°C的低温和42°C的高温，既抗旱又抗涝，适宜水边生长，能抗盐碱、抗强风，是目前世界上最流行、视觉效果最好的彩叶乔木新树种之一，可用于庭院、池畔、道路中央隔离带造景，公园绿化、城市景观等。千层金除极具观赏价值外，其枝叶富含挥发油，是提取 珍贵植物精油一茶树油的主要树种之一，茶树油具有光谱抗微生物、环保、温和天然清香、无腐蚀等特性，被广泛应用于医药、化妆品、日用化工等行业。因此栽培千层金具有很高的园林观赏价值和良好的经济效益。扦插繁殖千层金可以采用嫩枝扦插、高空压条法进行繁殖，但通常以嫩枝扦插比较多，一般在4至8月雨水多且夜温不会太低的时候进行，由于生根期间湿度比较大，容易出现叶子及茎干腐烂。千层金自然繁殖率低，扦插繁殖受季节限制，后期管理流程繁琐，扦插苗成活率低，难以规模化生产。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种繁殖率高、繁殖速度快、操作简便的千层金组培快繁工艺。本发明的目的通过以下技术方案来实现千层金组培快繁工艺，它包括以下步骤
51、外植体灭菌，采集无病虫害的千层金幼嫩茎段，去掉多余叶片，于流水中冲洗半个小时以上，再用洗涤剂浸泡8 12min，最后用流水冲洗，直至无泡沫出现，再放入超净工作台上，用酒精处理15 25s,无菌水清洗I遍,升萊处理3 7min,无菌水冲洗4 6遍；
52、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2 3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中，启动培养基为MS+6-BA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，PH调整至5. 8 6. 2，于光照强度为3000LX，光照时间15 17h/d，温度22 26°C的培养室中培养2 3周，生长出腋芽；
53、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养，初代培养基为MS+6-BA
0.5mg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 5g/L，PH调整至 5. 8 6. 2，于光照强度为 3000LX，光照时间15 17h/d，温度22 26°C的培养室中培养3 4周，植株生长并生根，在叶腋处重新生长出腋芽；
54、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中，继代培养基与启动培养基相同，培养3 4周后，在植株的叶腋处又重新分化出新的腋芽；
55、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，移栽基质为草炭土混合蛭石，草炭土与蛭石的混合比例I 3:1。本发明具有以下优点
本方法是一种从千层金茎段直接诱导腋芽增殖，再使腋芽生根的快速繁殖方法，利用组织培养技术，获得了千层金组培苗。本发明培养基配方简单，培养流程简捷，操作简便，繁殖系数较高，能够比较容易的获得千层金无菌苗，炼苗易成活；省时省力，为千层金工厂化育苗及其深加工提供了技术支持。
图I为本发明的启动培养的示意图
图2为本发明的初代培养诱导腋芽的示意图 图3为本发明的继代培养的示意图 图4为本发明的组培苗的示意图 图5为本发明的组培苗根系的示意图 图6为本发明的炼苗成活的示意图。
具体实施例方式下面结合附图及实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述
实施例I :
千层金组培快繁工艺，它包括以下步骤
51、外植体灭菌，采集无病虫害的千层金幼嫩茎段，去掉多余叶片，于流水中冲洗半个小时以上，再用洗涤剂浸泡lOmin，最后用流水冲洗，直至无泡沫出现，再放入超净工作台上，用酒精处理20s,无菌水清洗I遍,升萊处理5min,无菌水冲洗5遍；
52、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2 3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中，启动培养基为MS+6-BA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，PH调整至5. 8 6. 2，于光照强度为3000LX,光照时间16h/d，温度24°C的培养室中培养，培养2 3周后，腋芽生长2 4cm，如图I所示；
53、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养，初代培养基为MS+6-BA
0.5mg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 5g/L，PH调整至 5. 8 6. 2，于光照强度为 3000LX，光照时间16h/d,温度24°C的培养室中培养，培养3 4周后,植株生长6 7cm,开始生根，根系发达，生根数为2 4根,根长3 5cm,在叶腋处重新生长出腋芽，增殖系数在8 10左右，如图2所示；
54、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中，继代培养基与启动培养基相同，培养3 4周后，在植株的叶腋处又重新分化出新的腋芽，如图3所示；
55、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，如图4、图5所示，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，如图6所示，移栽基质为草炭土混合蛭石，混合比例2:1，注意遮光降温保湿，成活率高，可达100%。实施例2
千层金组培快繁工艺，它包括以下步骤51、外植体灭菌，采集无病虫害的千层金幼嫩茎段，去掉多余叶片，于流水中冲洗半个小时以上，再用洗涤剂浸泡8min，最后用流水冲洗，直至无泡沫出现，再放入超净工作台上，用酒精处理15s,无菌水清洗I遍,升萊处理7min,无菌水冲洗6遍；
52、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2 3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中，启动培养基为MS+6-BA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，PH调整至5. 8 6. 2，于光照强度为3000LX,光照时间15h/d，温度26°C的培养室中培养，培养2 3周后，腋芽生长2 4cm，如图I所示；
53、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养，初代培养基为MS+6-BA
0.5mg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 5g/L，PH调整至 5. 8 6. 2，于光照强度为 3000LX，光照时间15h/d,温度26°C的培养室中培养，培养3 4周后,植株生长6 7cm,开始生根，根系发达，生根数为2 4根,根长3 5cm,在叶腋处重新生长出腋芽，增殖系数在8 10左右，如图2所示；
54、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中，继代培养基与启动培养基相同，培养3 4周后，在植株的叶腋处又重新分化出新的腋芽，如图3所示；
55、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，如图4、图5所示，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，如图6所示，移栽基质为草炭土混合蛭石，混合比例3:1，注意遮光降温保湿，成活率高，可达100%。实施例3
千层金组培快繁工艺，它包括以下步骤
51、外植体灭菌，采集无病虫害的千层金幼嫩茎段，去掉多余叶片，于流水中冲洗半个小时以上，再用洗涤剂浸泡12min，最后用流水冲洗，直至无泡沫出现，再放入超净工作台上，用酒精处理25s,无菌水清洗I遍,升萊处理3min,无菌水冲洗4遍；
52、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2 3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中，启动培养基为MS+6-BA 0. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，PH调整至5. 8 6. 2，于光照强度为3000LX,光照时间17h/d，温度22°C的培养室中培养，培养2 3周后，腋芽生长2 4cm，如图I所示；
53、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养，初代培养基为MS+6-BA
0.5mg/L+NAA 0. 2mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 5g/L，PH调整至 5. 8 6. 2，于光照强度为 3000LX，光照时间17h/d，温度22°C的培养室中培养，培养3 4周后，植株生长6 7cm，开始生根，根系发达，生根数为2 4根,根长3 5cm,在叶腋处重新生长出腋芽，增殖系数在8 10左右，如图2所示；
54、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中，继代培养基与启动培养基相同，培养3 4周后，在植株的叶腋处又重新分化出新的腋芽，如图3所示；
55、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，如图4、图5所示，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，如图6所示，移栽基质为草炭土混合蛭石，混合比例1:1，注意遮光降温保湿，成活率高，可达100%。
权利要求
1.千层金组培快繁工艺，其特征在于它包括以下步骤 S1、外植体灭菌，采集无病虫害的千层金幼嫩茎段，去掉多余叶片，于流水中冲洗半个小时以上，再用洗涤剂浸泡8 12min，最后用流水冲洗，直至无泡沫出现，再放入超净工作台上，用酒精处理15 25s,无菌水清洗I遍,升萊处理3 7min,无菌水冲洗4 6遍； S2、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2 3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中，启动培养基为MS+6-BA O. 5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5g/L，PH调整至5. 8 6. 2，于光照强度为3000LX，光照时间15 17h/d，温度22 26°C的培养室中培养2 3周，生长出腋芽； S3、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养，初代培养基为MS+6-BAO. 5mg/L+NAA O. 2mg/L+蔗糖 30g/L+琼脂 5g/L，PH调整至 5. 8 6. 2，于光照强度为 3000LX，光照时间15 17h/d，温度22 26°C的培养室中培养3 4周，植株生长并生根，在叶腋处重新生长出腋芽； S4、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中，继代培养基与启动培养基相同，培养3 4周后，在植株的叶腋处又重新分化出新的腋芽； S5、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中，移栽基质为草炭土混合蛭石，草炭土与蛭石的混合比例I 3:1。
全文摘要
本发明公开了千层金组培快繁工艺，它包括以下步骤S1、外植体灭菌，S2、启动培养，将灭菌后的外植体切割至2～3cm幼嫩茎段，接种于启动培养基中培养；S3、初代培养，将腋芽切下转移至初代培养基上进行培养；S4、继代培养，将腋芽切下转移至继代培养基中进行培养；S5、炼苗移栽，将生根健壮的千层金组培苗，洗掉培养基后，直接移栽进温室大棚苗床中。本发明的有益效果是本发明利用组织培养技术，获得千层金组培苗，培养基配方简单，培养流程简捷，操作简便，繁殖系数较高，能够比较容易的获得千层金无菌苗，炼苗易成活；省时省力，为千层金工厂化育苗及其深加工提供了技术支持。
文档编号A01H4/00GK102960248SQ20121049395
公开日2013年3月13日 申请日期2012年11月28日 优先权日2012年11月28日
发明者冯爱云, 马建华, 王小辉, 晏强, 罗丽君 申请人:巴中市光雾山植物研究所