封装胚胎的装置及方法
【专利摘要】本发明提出了一种封装胚胎的装置及方法。该装置包括：第一容器，所述第一容器的容量为lmL?10mL;第二容器，所述第二容器的容量为20mL?100mL，并且所述第二容器中设置有至少20mL的水；以及麦管，所述麦管中设置有包含胚胎的缓冲液，并且所述麦管的一端设置有纤维状塞子，所述麦管的另一端形成有折叠封闭结构，其中，所述第一容器设置在所述第二容器中，以及所述麦管设置在所述第一容器中。运输过程中，利用该装置封装胚胎可以有效保护胚胎的活性。
【专利说明】封装胚胎的装置及方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物领域，具体涉及一种胚胎运输过程中封装胚胎的装置及方法。
【背景技术】
[0002] 胚胎移植是克隆技术中重要的一环，若移植不成功，将导致上游所有努力都付之 东流，但通常情况下，由于生产胚胎的实验室与移植受体所在的实验基地并不在一个地方， 而胚胎对环境的要求较高，尤其对温度和pH值要求，这两个因素对胚胎发育的影响最大， 因而胚胎运输中对温度和pH值得控制就显得非常重要。现有的胚胎运输中所用的封装装 置通常有两种，一种是麦管，另一种是2毫升离心管，两种各有优劣。若是采用离心管装载， 运输液体积大，运输过程中对温度和pH值缓冲能力都相对强，但缺点是到了基地后还需要 捡胚，一是有一定的胚胎丢失率；二是对移植基地的仪器配置有一定的要求，比如需要带热 台的显微镜，还需要一个相对干净的胚胎操作室；三是在基地捡胚时胚胎会受到当地天气 温度的影响。而采用麦管装载，因为可以直接移植，在实验室捡胚后去基地移植不用再捡 胚，可以减少胚胎丢失现象和捡胚时温度的影响，而且在没有配制带热台的显微镜猪场也 可以适用，因此相比2毫升离心管运输更加方便。但是因为运输液体积少，运输途中对温度 和pH值得缓冲能力都较差，而且麦管封装法经常采用烧热后的镊子夹捏进行密封，对操作 要求比较高，经常会有密封不严的现象，导致胚胎随着运输液的流出而造成损失，常常需要 多次夹捏才能将其完全密封，所以该方法也存在一定的缺点。
[0003] 综上所述，传统的两种胚胎封装装置都有待于进一步的改善和提1?。
【发明内容】
[0004] 本发明旨在至少在一定程度上解决上述技术问题之一或至少提供一种有用的商 业选择。为此，本发明的一个目的在于设计一种新的封装胚胎的装置。更具体地说是一种 运输胚胎过程中所需要的封装装置及封装胚胎的方法。
[0005] 在本发明的第一方面，本发明提出了一种封装胚胎的装置。根据本方明的实施例， 该封装胚胎的装置包括：第一容器，所述第一容器的容量为lmL?10mL ;第二容器，所述第 二容器的容量为20mL?100mL，并且所述第二容器中设置有至少20mL的水；以及麦管，所 述麦管中设置有包含胚胎的缓冲液，并且所述麦管的一端设置有纤维状塞子，所述麦管的 另一端形成有折叠封闭结构，其中，所述第一容器设置在所述第二容器中，以及所述麦管设 置在所述第一容器中。发明人发现利用根据本发明实施例的封装胚胎的装置，由于第二容 器的容量为20mL?100mL，远大于麦管中储藏胚胎的空间。由此，可以有效地可以能够有效 地将胚胎保持在相对恒定的温度和pH下，从而利用根据本发明实施例的封装胚胎的装置， 能够有效地对胚胎进行封装，并且能够有效地用于对胚胎进行转移。
[0006] 根据本发明的实施例，该胚胎装置还包括如下附加技术特征：
[0007] 根据本发明实施例，所述第二容器为体积为50ml的离心管，所述离心管中预先设 置有45毫升水，并且所述第一容器为巴氏滴管。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的 效率，并且能够进一步有效地用于对胚胎进行转移。
[0008] 根据本发明实施例，所述离心管的管口处设置有泡沫板，并且所述巴氏滴管的一 端插入所述泡沫板中。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的效率，并且能够进一步有效 地用于对胚胎进行转移。
[0009] 本发明第二方面，本发明提出了一种封装胚胎的方法。根据本方明的实施例，该 方法包括：将含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中，其中，所述麦管的一端设置有纤维状塞 子，
[0010] 通过折叠所述麦管，将所述麦管远离所述纤维状塞子的一端封闭；
[0011] 将所述麦管置于第一容器中，其中，所述第一容器的容量为lrnL?10mL;
[0012] 将所述装载有所述麦管的第一容器置于第二容器中，所述第二容器的容量为 20mL?100mL，并且所述第二容器中预先设置有至少20mL的运输缓冲液；以及将所述第二 容器进行封装。发明人发现利用根据本发明实施例的封装胚胎的方法，由于第二容器的容 量为20mL?100mL，远大于麦管中储藏胚胎的空间。由此，可以有效地可以能够有效地将胚 胎保持在相对恒定的温度和pH下，从而利用根据本发明实施例的封装胚胎的装置，能够有 效地对胚胎进行封装，并且能够有效地用于对胚胎进行转移。
[0013] 根据本发明的实施例，封装胚胎的方法还包括如下附加技术特征：
[0014] 根据本发明实施例，所述第二容器为体积为50mL的离心管，所述离心管中预先设 置有45mL水，并且所述第一容器为巴氏滴管。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的效 率，并且能够进一步有效地用于对胚胎进行转移。
[0015] 根据本发明实施例，在将所述含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中之前，预先将 所述麦管在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100%的环境中放置至少15 分钟。由此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过程中，以及后续运输过程 中，运输体系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可以进一步保证所封装的胚 胎的活性。
[0016] 根据本发明实施例，所述第二容器的管口处设置有泡沫板，在对所述第二容器进 行封装之前，将所述巴氏滴管的一端插入所述泡沫板中。根据本发明实施例，在所述第二容 器的管口处设置泡沫板，所以第二容器在未放入巴氏滴管前，已经通过泡沫板将其内部空 间与外界作了简单隔离。由此，保证了离心管在胚胎的封装过程中，以及后续运输过程中内 部环境的稳定性，从而进一步保证了胚胎的活性。
[0017] 根据本发明的实施例，在将所述装载有麦管的第一容器置于第二容器之前，预先 将所述设置有45毫升水的第二容器在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为 100%的环境中放置至少1小时。由此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过 程中，以及后续运输过程中，运输体系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可以 进一步保证所封装的胚胎的活性。
[0018] 根据本发明的实施例，在将所述麦管置于第一容器之前，预先将所述第一容器在 温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100%的环境中放置至少15分钟。由 此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过程中，以及后续运输过程中，运输体 系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。
[0019] 根据本发明实施例，所述运输缓冲液的pH为7. 0?7. 1，并且所述运输缓冲 液含有：NaCl、NaHC03、KC1、KH2P04、MgS0 4、乳酸钙-5H20 (Ca-Lactate-5H20)、丙酮酸钠 (Na-pyruvate)、肌醇（Myo-Inositol)、酌·红（Phenol Red)(母液 10mg/mL)、BSA 和 H20。其 中，酚红可以被预先配制为已知浓度的母液，在配制运输缓冲液时，取适量的母液即可，例 如可以配制浓度为10mg/mL的母液。根据本发明的具体实施例，所述运输缓冲液含有：
[0020] NaCl 6.312 g/l000mL; NaHCO；, 2.106 g/1000mL; KC1 0.746 g/lOOOmL; KH2P04 0.048 g/lOOOmL: MgS04 0.048 g/lOOOmL; :/!Ll!li^ii"j-5H2〇 (Ca-Lactate-SH^O) 0.616 g/lOOOmL; 丙酮酸钠（Na-pyruvate) 0.022 g/lOOOmL; C Myo-Inositol) 0.5 g/iOOOmL; 酚红（Phenol Red)(母液 10 mg/mL) lmL 母液 BSA 3g/1000mL:以及
[0021] H20 添加至终体积为1000 mL。
[0022] 由此，发明人发现通过才用本发明实施例的运输缓冲液封存运输胚胎，与传统的 运输缓冲液封存运输胚胎相比，更适于胚胎的长期存放，可以提高胚胎在运输过程中的活 性，从而进一步提1?胚胎移植的成功率。
[0023] 所述运输缓冲液的pH保持在7. 0?7. 1之间，将有利于胚胎在运输过程中生长， 同时也与移植受体体内的pH接近。所以通过控制运输缓冲液的pH值，可以提高胚胎在运 输过程中的活性，从而进一步提高胚胎移植的成功率。
[0024] 本方明的第三方面，发明人提出了一种运输胚胎的方法。根据本方明的实施例，该 方法包括：利用前面所述的方法，对待运输的胚胎进行封装；以及将经过封装的胚胎在恒 温条件下进行运输。利用该方法，能够有效地对胚胎进行运输。在本发明的一个实施例中， 将所述经过封装的胚胎置于恒温箱中，以便实现在恒温条件下进行运输，其中，所述恒温箱 的温度为38. 5±0. 5摄氏度。从而可以进一步确保在运输过程中，胚胎的活性得以维持。
[0025] 本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变 得明显，或通过本发明的实践了解到。
【专利附图】
【附图说明】
[0026] 本发明的上述和/或附加的方面和优点从结合下面附图对实施例的描述中将变 得明显和容易理解，其中 ：
[0027] 图1是根据本发明实施例的封装胚胎装置的结构示意图；
[0028] 图2是根据本发明实施例的封装胚胎方法的流程示意图。
【具体实施方式】
[0029] 下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终 相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附 图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
[0030] 此外，术语"第一"、"第二"仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性 或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有"第一"、"第二"的特征可以明示或 者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，"多个"的含义是两个或两个以 上，除非另有明确具体的限定。
[0031] 下面参考图1对本发明的封装胚胎的装置进行描述。如图1所示，根据本发明的 实施例，本发明提出了一种用于封装胚胎的装置，其包括第一容器600、第二容器700、麦管 500。其中，第一容器600的容量为lmL?10mL，第一容器600设置在第二容器700中，第二 容器700的容量为20mL?100mL，并且在该第二容器700中设置有至少20mL的水300。麦 管500设置在第一容器600中，并且在麦管500中，设置有包含胚胎的缓冲液400,并且麦 管500的一端设置有纤维状塞子，另一端形成有折叠封闭结构，换句话说，通过在麦管500 的一端塞入纤维状塞子，并且在另一端对麦管进行折叠，实现了对麦管500的封闭处理。发 明人发现利用根据本发明实施例的封装胚胎的装置，由于第二容器700的容量为20mL? 100mL，远大于麦管500中储藏胚胎的空间。由此，可以有效地可以能够有效地将胚胎保持 在相对恒定的温度和pH下，从而利用根据本发明实施例的封装胚胎的装置，能够有效地对 胚胎进行封装，并且能够有效地用于对胚胎进行转移。
[0032] 根据本发明的实施例，可以利用本发明的胚胎封装装置进行封装的胚胎的类型并 不受特别限制，可以为体细胞移植胚，体外受精胚。根据本发明的实施例，可以利用本发明 的胚胎封装装置进行封装的通过体内冲胚方法所获胚胎的胚胎体积并不受特别限制，只要 可以被根据本发明的实施例的麦管可以容纳即可。
[0033] 根据本发明实施例，所述第二容器700为体积为50mL的离心管，所述离心管中预 先设置有45mL水，并且所述第一容器600为巴氏滴管。由此，可以进一步提高对胚胎进行 封装的效率，并且能够进一步有效地用于对胚胎进行转移。根据本发明的实施例，当采用离 心管作为第二容器，米用巴氏滴管作为第一容器，将巴氏滴管设置在离心管中的方式和手 段并不受特别限制。根据本发明实施例，所述离心管的管口处设置有泡沫板200,并且所述 巴氏滴管的一端插入所述泡沫板200中。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的效率，并 且能够进一步有效地用于对胚胎进行转移。根据该实施例，将所述巴氏滴管放置在所述离 心管中时，是通过预先在离心管口设置泡沫板200,且泡沫板200预先设置一个与巴氏滴管 直径相当的孔径，以便巴氏滴管固定在离心管中。换个方式说，就是所述巴氏滴管在离心管 里具有可支撑的物体(泡沫板)，它在离心管内部位置是固定的，不是随意性的。从而进一步 减弱了巴氏滴管在运输过程中的震动。另外，发明人发现，通过事先在离心管管设置泡沫板 200，可以减少外界环境对其内部环境的干扰。
[0034] 根据本发明的实施例，第一容器的材质并不受特别限制，可以是任何常用的容器 材料。根据本发明的实施例，可以采用橡胶材质，由此所得到的第一容器较为具有弹性，从 而可以便于通过挤压排空其内部的空气。由此，根据本发明的实施例优选采用的第一容器 可以为容量为lmL?10mL的巴氏滴管以及与巴氏滴管大小形状类似的容器。。
[0035] 另外，第二容器的类型也不受特别限制，只要其容积能够足以容纳第一容器即可。 根据本发明的实施例，可以采用的第二容器的类型为带塞的试管、离心管等，容器容量也不 受特别限制。根据本发明的实施例，优选采用20mL?100mL的离心管，更优选采用50mL的 离心管。
[0036] 在本发明实施例中，所采用的运输缓冲液的pH为7. 0?7. 1所述运输缓冲液 可以含有：NaCl、NaHC03、KC1、KH2P04、MgS0 4、乳酸钙-5H20 (Ca-Lactate-5H20)、丙酮酸钠 (Na-pyruvate)、肌醇（Myo-Inositol)、酌·红（Phenol Red)(母液 10mg/mL)、BSA 和 H20。其 中，酚红可以被预先配制为已知浓度的母液，在配制运输缓冲液时，取适量的母液即可，例 如可以配制浓度为10mg/mL的母液。根据本发明的具体实施例，优选可以采用的运输缓冲 溶液可以含有：
[0037] NaCl 6.312 g/1000mL; NaHC03 2.106 g/1000mL; KC1 0.746 g/lOOOmL; KH2P04 0.048 g/1000mL; MgSOi 0.048 g/1000mL; 乳酸?:ν5Η2() (Ca-Lactate-5H20) 0.616 g/lOOOmL; 丙_酸钠（Na-pymvate) 0.022 g/lOOOmL; JjJLl;iiV: (Myo-Inositol) 0.5 g/1000mL; 红（PhenolRed)(母液 lOmg/mL) lmL 母液 BSA 3g/1000mL:以及 H20 添加至终体积为1000 mL。
[0038] 由此，发明人发现通过才用本发明实施例的运输缓冲液封存运输胚胎，与传统的 运输缓冲液封存运输胚胎相比，更适于胚胎的长期存放，可以提高胚胎在运输过程中的活 性，从而进一步提1?胚胎移植的成功率。
[0039] 下面参考图2,对本发明封装胚胎的方法进行描述。如图2所示，根据本发明的实 施例，本发明提出了一种用于封装胚胎的方法，包括：
[0040] S100 :将含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中
[0041] 在该步骤中，将含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中，其中，所述麦管的一端设置 有纤维状塞子。根据本发明的实施例，可以利用本发明的方法进行封装的胚胎的类型不受 特别限制。可以为体细胞移植胚，体外受精胚。根据本发明的实施例，可以利用本发明的 胚胎封装装置进行封装的通过体内冲胚方法所获胚胎的胚胎体积并不受特别限制，只要 可以被根据本发明的实施例的麦管可以容纳即可。本领域技术人员可以采用任何本领域 中已知的方法进行胚胎收集，具体的，可以采用口吸管进行胚胎收集。根据本发明的实施 例，通过在麦管的一端设置纤维状塞子，优选地，通过在麦管的一端设置棉花，由此，可以防 止外界污染物进入麦管，并保持麦管的一端密闭，使得缓冲溶液不能漏出。在本发明实施 例中，所述运输缓冲液可以包含：主要成分NaCl、NaHC0 3、KC1、KH2P04、MgS04、乳酸钙-5H 20 (Ca-Lactate_5H20)、丙酮酸钠（Na-pyruvate)、肌醇（Myo-Inositol )、酌·红（Phenol Red) (母液10mg/mL)、BSA和H20。其中，酚红可以被预先配制为已知浓度的母液，在配制运输缓 冲液时，取适量的母液即可，例如可以配制浓度为10mg/mL的母液。根据本发明的具体实施 例，优选可以采用的缓冲溶液包括：
[0042] NaCI 6.312 g/1000mL; NaHCOi 2.106 g/1000mL; KC1 0.746 g/lOOOmL; KH2P〇4 0.048 g/lOOOmL; MgS04 0.048 g/lOOOmL; 乳酸?!!』-5Η20 (Ca-Lactate-5H20) 0.616 g/lOOOmL; W+酮酸钠（Na-pyravate) 0.022 g/lOOOmL; ( Myo-Inositol) 0.5 g/iOOOmL; _红（PhenolRed)(母液 lOmg/mL) lmL 母液 BSA 3g/1000mL;以及 H20 添加至终体积为1000 mL。
[0043] 由此，发明人发现通过才用本发明实施例的运输缓冲液封存运输胚胎，与传统的 运输缓冲液封存运输胚胎相比，更适于胚胎的长期存放，可以提高胚胎在运输过程中的活 性，从而进一步提高胚胎移植的成功率。根据本发明的实施例，将含有胚胎的运输缓冲液装 载入麦管中之前，预先将麦管在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100% 的环境中放置至少15分钟。由此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过程 中，以及后续运输过程中，运输体系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可以进 一步保证所封装的胚胎的活性。
[0044] S200 :通过折叠，将麦管的一端封闭
[0045] 在该步骤中，将含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中之后，可以通过折叠麦管，将 麦管远离棉花的一端封闭。具体的，可以通过在离麦管无棉塞的一端1厘米处折一下并用 镊子将折痕夹紧，后将折下的一部分再次反向折一下并用镊子将折痕夹紧，随后坚直麦管 检测液面有无下降，如有则用镊子再次夹紧折痕或者将折下部分再折一次形成三道折痕。 对单纯使用麦管和利用本发明所述胚胎封装装置的运输液运输前后pH进行测量对比。发 明人发现，本发明所述的胚胎封装装置中的运输液颜色不变化，而单用麦管运输的运输液 颜色加深。颜色变化是对运输液pH值变化的直观反应。而pH值是衡量溶液酸碱度的一个 指标。胚胎在移植前活性指数是保证移植成功率的关键因素之一。因而本发明所采用封装 胚胎装置大大提高了运输液的pH缓冲能力。从而为胚胎提供了较为稳定的液体环境。
[0046] 根据本发明的实施例，将所述装载有所述麦管的第一容器置于第二容器之前，预 先将所述设置有45毫升水的第二容器在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度 为100%的环境中放置至少1小时。由此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装 过程中，以及后续运输过程中，运输体系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可 以进一步保证所封装的胚胎的活性。
[0047] S300 :将麦管置于第一容器中
[0048] 在将麦管封闭之后，将麦管置于第一容器中，根据本发明的实施例，第一容器的容 量可以为lmL?10mL。根据本发明的实施例，第一容器的材质并不受特别限制，可以是任何 常用的容器材料。根据本发明的实施例，可以采用橡胶材质，由此所得到的第一容器较为具 有弹性，从而可以便于通过挤压排空其内部的空气。由此，根据本发明的实施例优选采用的 第一容器可以为容量为lmL?10mL的巴氏滴管以及与巴氏滴管大小形状类似的容器。根据 本发明的实施例，在将所述麦管置于第一容器中之前，预先将所述第一容器在温度为38. 5 摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100%的环境中放置至少15分钟。由此，发明人发 现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过程中，以及后续运输过程中，运输体系内温度和 pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可以进一步保证所封装的胚胎的活性。
[0049] S400 :将第一容器置于第二容器中
[0050] 在将麦管装入第一容器之后，可以将第一容器置于第二容器中，根据本发明的实 施例，第二容器的容量为20mL?100mL，并且第二容器中预先设置有至少20mL的运输缓冲 液。在将第一容器置于第二容器中之后，将所述第二容器进行封装，由此实现了对胚胎的 封装。第二容器的类型也不受特别限制，只要其容积能够足以容纳第一容器即可。根据本 发明的实施例，可以采用的第二容器的类型为带塞的试管、离心管等，容器容也不受特别限 制。根据本发明的实施例，优选采用20mL?100mL的离心管，更优选采用50mL的离心管。
[0051] 根据本发明的实施例，将所述装载有所述麦管的第一容器置于第二容器之前，预 先将所述设置有45mL水的第二容器在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为 100%的环境中放置至少1小时。由此，发明人发现可以有效地进一步保证在胚胎的封装过 程中，以及后续运输过程中，运输体系内温度和pH值以及二氧化碳浓度的稳定。由此，可以 进一步保证所封装的胚胎的活性。
[0052] 根据本发明实施例，所述第二容器为体积为50mL的离心管，所述离心管中预先设 置有45mL水，并且所述第一容器为巴氏滴管。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的效 率，并且能够进一步有效地用于对胚胎进行转移。根据本发明的实施例，当采用离心管作为 第二容器，采用巴氏滴管作为第一容器式，将巴氏滴管设置在离心管中的方式和手段并不 受特别限制。根据本发明实施例，所述离心管的管口处设置有泡沫板，并且所述巴氏滴管的 一端插入所述泡沫板中。由此，可以进一步提高对胚胎进行封装的效率，并且能够进一步有 效地用于对胚胎进行转移。根据该实施例，将所述巴氏滴管放置在所述离心管中时，是通过 预先在离心管口设置泡沫板，且泡沫板预先设置一个与巴氏滴管直径相当的孔径，以便巴 氏滴管固定在离心管中。换个方式说，就是所述巴氏滴管在离心管里具有可支撑的物体(泡 沫板)，它在离心管内部位置是固定的，不是随意性的。从而进一步减弱了巴氏滴管在运输 过程中的震动。另外，发明人发现，通过事先在离心管管设置泡沫板，可以减少外界环境对 其内部环境的干扰。
[0053] 根据本发明的实施例，发明人首先将胚胎置于含有棉花的麦管中，并对麦管进行 折叠封闭，从而对胚胎提供第一道安全保护屏障，随后又将含有胚胎的麦管置于平衡好的 巴氏滴管中，即为胚胎提供了第二道安全保护屏障(稳定的气体环境)。之后，又将巴氏滴管 置于含有45mL温度为38. 5摄氏度的纯净水的离心管。而装载胚胎的麦管所含的运输液仅 为200mL，离心管中含有液体体积远远大于麦管所含运输液的体积，如此，便间接的对胚胎 不断提供所需要的热能，增加运输液对环境温度变化的缓冲能力，使得胚胎所处环境温度 处在相对稳定状态；其次，巴氏滴管本身是固定结构，而水是液态。所以将巴氏滴管置于远 远大于自身体积液态里，就减弱了运输过程中的震动。
[0054] 由此，本发明的又一方面，本发明提出了一种运输胚胎的方法。根据本方明的实施 例，该方法包括：利用前面所述的方法，对待运输的胚胎进行封装；以及将经过封装的胚胎 在恒温条件下进行运输。利用该方法，能够有效地对胚胎进行运输。在本发明的一个实施 例中，将所述经过封装的胚胎置于恒温箱中，以便实现在恒温条件下进行运输，其中，所述 恒温箱的温度为38. 5±0. 5摄氏度。从而可以进一步确保在运输过程中，胚胎的活性得以 维持。
[0055] 下面通过具体的实施例对本发明进行说明，这些实施例仅仅是说明性的，而不以 任何方式限制本发明的范围。
[0056] 1.工具与试剂准备：
[0057] 1)在50mL离心管中注入45mL纯净水，并将泡沫塞入离心管，然后放置于加热台 (38. 5摄氏度）预热；
[0058] 2)将巴斯滴管和装有至少800 μ L运输液（PZM3)离心管放入培养箱中（38. 5摄氏 度，5%C02，最大湿度）分别平衡至少15分钟和4小时；
[0059] 2.胚胎装载（以下步骤均除非特别说明，均在38. 5摄氏度热台上进行操作）：
[0060] 1)在60mm Petri dish中用运输液(平衡好的PZM3)做3个体积为300 μ L滴(编 号1、2和3)
[0061] 2)将胚胎从各个盘中收集到1号ΡΖΜ3滴中，然后转入2号滴中进行清洗，将转入 时带入的油滴洗掉，然后再转入3号滴中准备装载(尽量保持聚集以便装载）；
[0062] 3) -手拿移液器，一手拿麦管，先将移液器枪口对准麦管带有棉塞一端，然后连同 ΡΖΜ3吸入所有囊胚（200yL左右）；
[0063] 4)对麦管进行封闭，在离麦管无棉塞的一端1厘米处折一下--用镊子将折痕夹 紧--后将折下的一部分再次反向折一下--再用镊子将折痕夹紧--坚直麦管检测液 面有无下降，如有则用镊子再次夹紧折痕或者将折下部分再折一次形成三道折痕；
[0064] 5)将麦管装进预先平衡好的巴氏滴管中，然后将巴氏滴管放入培养箱中平衡10 分钟?15分钟；
[0065] 6)捏住巴氏滴管口将其从培养箱中拿出，然后用夹子夹住口，放入平衡好的50mL 离心管中；
[0066] 3.离心管横着固定在保温箱中，运输到基地。
[0067] 4.移植时直接从离心管中拿出巴氏滴管，用剪刀剪去管口一段，轻轻倒出麦管，然 后剪去麦管密封端，进行移植。
[0068] 在该实施例中，将部分运输液预先在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及 湿度为100%的环境中平衡。根据本发明实施例，发明人准备好三支麦管(编号1、2和3)，其 中在1号管中加入未平衡的运输液，2号和3号管中加入平衡好的运输液，各管均加入了 pH 值指示剂，观察三支麦管，可以发现1号管中运输液因未平衡颜色较深，2和3号管中的运 输液经过在培养箱中平衡颜色相同（浅)，另外，又将3号管放入预先平衡且密封的巴氏滴管 中，1号和2号管暴露在空气中，经过5小时放置后，2号管中运输液颜色逐渐加深，而3号 管中的运输液仍为最浅。颜色变化是对运输液pH值变化的直观反应。而pH值是衡量溶液 酸碱度的一个指标。从该实施例中，可以看出预先对运输液进行平衡是保证运输液pH值不 变的前提，而对平衡好运输液放置环境选择是必要的。由此，证明了，巴氏滴管的预先平衡 和密封保证了运输液pH值的稳定。在运输过程中，只有运输液的酸碱度保持稳定，才能保 证胚胎生物性状不发生改变，也就可以进一步提高胚胎在移植中成活率。因此本发明的胚 胎封装装置大大提高了运输液的pH缓冲能力。从而为胚胎提供了较为稳定的液体环境。 [0069] 在本说明书的描述中，参考术语"一个实施例"、"一些实施例"、"示例"、"具体示 例"、或"一些示例"等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特 点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不 一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何 的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0070] 尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例 性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在不脱离本发明的原理和宗旨 的情况下在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
【权利要求】
1. 一种用于封装胚胎的装置，其特征在于，包括： 第一容器，所述第一容器的容量为lmL?10mL ; 第二容器，所述第二容器的容量为20mL?100mL，并且所述第二容器中设置有至少 20mL的水；以及 麦管，所述麦管中设置有包含胚胎的缓冲液，并且所述麦管的一端设置有纤维状塞子， 所述麦管的另一端形成有折叠封闭结构， 其中， 所述第一容器设置在所述第二容器中，以及 所述麦管设置在所述第一容器中。
2. 根据权利要求1所述的装置，其特征在于，所述第二容器为体积为50mL的离心管，所 述离心管中预先设置有45mL水，并且所述第一容器为巴氏滴管； 任选地，所述离心管的管口处设置有泡沫板，并且所述巴氏滴管的一端插入所述泡沫 板中。
3. -种胚胎封装方法，其特征在于，包括： 将含有胚胎的运输缓冲液装载入麦管中，其中，所述麦管的一端设置有纤维状塞子， 通过折叠所述麦管，将所述麦管远离所述纤维状塞子的一端封闭； 将所述麦管置于第一容器中，其中，所述第一容器的容量为lmL?10mL ; 将所述装载有所述麦管的第一容器置于第二容器中，所述第二容器的容量为20mL? 100mL，并且所述第二容器中预先设置有至少20mL的运输缓冲液；以及 将所述第二容器进行封装。
4. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述第二容器为体积为50mL的离心管，所 述离心管中预先设置有45毫升水，并且所述第一容器为巴氏滴管； 任选地，所述第二容器的管口处设置有泡沫板，在对所述第二容器进行封装之前，将所 述巴氏滴管的一端插入所述泡沫板中。
5. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在将所述含有胚胎的运输缓冲液装载入 麦管中之前，预先将所述麦管在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100% 的环境中放置至少15分钟。
6. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，将所述装载有所述麦管的第一容器置于 第二容器之前，预先将所述设置有45mL水的第二容器在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度 为5%以及湿度为100%的环境中放置至少1小时。
7. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在将所述麦管置于第一容器中之前，预先 将所述第一容器在温度为38. 5摄氏度、二氧化碳浓度为5%以及湿度为100%的环境中放置 至少15分钟。
8. 根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述运输缓冲液的pH为7. 0?7. 1，并且 所述运输缓冲液含有：似(：1、似!10)3、1((：1、腿2?0 4、1%504、乳酸钙-5!120、丙酮酸钠、肌醇、酚红、 BSA 和 H20， 任选地，所述运输缓冲液含有： NaCl 6.312 g/lOOOmL; NaHCO:. 2.106 g/IOOOmL; KC1 0.746 g/lOOOmL; KH：P〇4 0.048 g/lOOOmL; MgS04 0.048 g/lOOOmL; 乳酸饵-5卜丨20 0.616 g/lOOOmL; 丙酮酸钠 0.022 g/lOOOmL; JJJL故 0.5 g/lOOOmL; 酚红 lmL BSA 3g/1000mL;以及 H20 添加至终体积为]000 mL。
9. 一种运输胚胎的方法，其特征在于，包括： 根据权利要求3?8任一项所述的方法，对待运输的胚胎进行封装；以及 将经过封装的胚胎在恒温条件下进行运输。
10. 根据权利要求9所述的方法，其特征在于，将所述经过封装的胚胎置于恒温箱中， 以便实现在恒温条件下进行运输，其中，所述恒温箱的温度为38. 5±0. 5摄氏度。
【文档编号】A01N1/02GK104206375SQ201310207233
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2013年5月29日 优先权日:2013年5月29日
【发明者】刘田宾, 杜玉涛, 徐颖 申请人:深圳华大方舟生物技术有限公司, 深圳华大基因科技有限公司