一种微藻浓缩培养液及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种培养草鱼三毛金藻的微藻浓缩培养液及其应用，主要用在草鱼三毛金藻中毒病方面；草鱼三毛金藻中毒病诊断方法，传统上只用肉眼观察鱼体外表和病鱼活动状况，诊断不准确且易误诊，本发明增加了鱼体的内部解剖学病理、病变观察，诊断更准确、可靠；三毛金藻中毒病防治方法，传统上用黏土吸附，效果较好，但不能彻底杀死三毛金藻；也有人用0.7g／m3硫酸铜全池泼洒，但仅能抑制毒素分泌或减弱毒性；还有人全池遍洒盐酸或醋酸，可立即解毒，但成本太高；本发明用醋糟和聚丙烯酰胺处理发病池塘治疗三毛金藻中毒病，可彻底杀灭三毛金藻，对草鱼伤害小，治愈率高，原料易得，成本低，操作简便，实用性强，效益高。
【专利说明】一种微藻浓缩培养液及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于水产养殖领域，尤其涉及一种微藻浓缩培养液及其应用。
【背景技术】
[0002]三毛金藻Prymnesiacee又名土栖藻,生长于盐碱地的池塘和水库,我国北自辽宁南至广东均有发生。三毛金藻能分泌一种使鱼类中枢神经中毒的毒素，导致鱼类死亡。当水体中三毛金藻密度超过3000万个/升，水体呈黄褐色时，就会引起草、鲢、鳙、鲤等鱼类大量死亡。三毛金藻为广盐性藻类，是半咸水中的特有品种，在含盐600 — 700mg / L的水中仍能生长，生长适温为10 — 30°C，适宜pH为6.5—9.0。三毛金藻怕阳光，多生存于水体的中下层，水中有大量三毛金藻时水呈棕褐色且透明度大于50cm。三毛金藻对所有用鳃呼吸的水生动物均能造成严重危害，当其在池塘中大量繁殖时，可引起鱼类呼吸障碍，神经麻痹，急躁不安，呼吸加快，游动急促，方向不定。游动短时间后就趋于平静，反应迟钝，分泌大量粘液，鳍基部充血，鱼体后部颜色变淡，呼吸缓慢，自胸鳍以后的鱼体麻痹僵直，尾、背、腹鳍均不能动，只有胸鳍缓缓能动，鳃盖、眼框周围、下颌及体表充血，最后失去平衡而死。主要流行于盐碱地的池塘、水库这些半咸水水域，如天津、山东、河北、广东、江苏、浙江、上海、 辽宁、内蒙等地，危害鲢、鳙、鳊、草、梭、鲤、鲫及其它用鳃呼吸的水生动物，自夏花至亲鱼均可受害。一年四季都有发生，主要发生于春、秋、冬季，夏季较少发生，因为夏季水温高，蓝藻及绿藻等大量繁殖，抑制了三毛金藻生长。但当水质适合三毛金藻繁衍，尤其是总氨含量低，蓝藻及绿藻不能成为优势种时，夏季也可发生三毛金藻危害。三毛金藻引起鱼类中毒过程包括毒素的胞内合成、毒素的分泌、毒素在水中的积累、毒素被水中阳离子辅助因子激活以及被激活的毒素作用于鳃五个阶段，三毛金藻大量繁殖时，向水中分泌细胞毒素、溶血毒素和鱼毒素等五种毒素，可使鱼类和其它水生动物中毒死亡。养殖鱼类中鲢、鳙鱼最易患此病，其次是草、鲂、鲤、鲫和梭鱼。三毛金藻中毒常给水产养殖造成很大损失，故应充分重视，做好防治。
[0003]关于三毛金藻中毒防治方法，传统上用黏土吸附，即50kg池水加入0.15kg黏土吸附，效果较好，且不受温度限制，但不能彻底杀死三毛金藻。也有人用0.7g / m3硫酸铜全池泼洒，但硫酸铜仅抑制毒素分泌，或减弱毒素活性，也不能完全杀死藻细胞。还有人全池遍洒盐酸或醋酸，将池水PH调至6.5—7.0，可立即解毒，但成本太高，生产应用困难。我的实验和研究表明，用醋糟和聚丙烯酰胺处理发病池塘对治疗三毛金藻中毒有更好的效果，可彻底杀灭三毛金藻，对草鱼伤害小，治愈率高，原料易得，成本低，操作简便，实用性强，可在生产中大规模应用。
【发明内容】
[0004]为了克服目前技术的不足，本发明提供了以下技术方案；
[0005]—种用于培养草鱼三毛金藻的I号微藻浓缩培养液，配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4 克，K2HP044 克，Na2Si O 3.9H200.5 克，MgSO4.7H2025 克，NaHC034 克，九二 O 植物生长刺激素400国际单位,f/2维生素溶液100毫升,f/2微量元素溶液100毫升,人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升；其中 f / 2 微量元素溶液配方=ZnSO4.4Η2 O 23 毫克，MnCl2.4Η2 O 178 毫克，CuSO4.5Η2 O 10毫克，FeC6H5 O 7.5Η203.9 克，Na2MoO4.2Η2 O 7.3 毫克，CoCl2.6Η2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5晕克，纯水1000毫升。
[0006]—种草鱼三毛金藻中毒病的预防方法:1)预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用；1号微藻浓缩培养液配方:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP O 44克，Na2SiO3.9H2 O
0.5克，MgSO4.7Η2025克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f / 2微量兀素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升,羊粪浸出液15毫升,土壤抽出液30毫升,纯水1000毫升；其中f / 2微量兀素溶液配方:ZnSO4.4Η2 O23 毫克，MnCl2.4Η2 O 178 毫克，CuSO4.5Η2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5Η203.9 克，Na2MoO4.2Η2O 7.3毫克，CoCl2.6Η2 O 12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克,维生素B1IOO毫克,维生素H0.5毫克,纯水1000毫升；
[0007]2)配置中药消毒液:由以下重量比的物质组成:黄芩7~10份、黄秋葵粉3~5份、鱼腥草3~5份、大黄5~10份、甘草5~10份；将上述药材放入可加热的容器中，加入3~5倍体积的纯净水，煮沸后持续煮30~50分钟，后过滤，沉淀I~2小时，后取澄清液即可；所述黄秋葵粉是清洗干净并烘干后的黄秋葵茎叶、花及籽粒经超微粉碎机粉碎至250目，然后搅匀、灭菌所得；
[0008]3)沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率；具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次；在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监测和管理，如水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒所述的I号微藻浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高；这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
[0009]一种草鱼三毛金藻饲养池的灭菌方法:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米，再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，所述I号微藻浓缩培养液，配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP044克，Na2SiO3.9H200.5克，MgSO4.7Η2 O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f / 2微量兀素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升,羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升,纯水1000毫升；其中f/2微量兀素溶液配方:ZnS04.4Η2 O 23毫克，MnCl2.4Η2 O 178 毫克，CuSO4.5Η2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5Η2 O 3.9 克，Na2MoO4.2Η207.3毫克，CoCl2.6Η2 O 12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克,维生素B1IOO毫克,维生素H0.5毫克,纯水1000毫升；
[0010]培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，同时加入，权利要求2中步骤2)所述的中药消毒液，加入量为每立方米池水泼洒I~2升的量，7天后饲养池即恢复正常，中毒鱼类同时可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
[0011]所述的草鱼三毛金藻中毒病的诊断方法如下:
[0012]显微镜诊断:取0.4米深处的池水25毫升，滴加鲁哥氏碘液I毫升，5分钟后在显微镜10X40(目镜X物镜)暗视野下(关掉显微镜的光圈)，观察是否有带有三根鞭毛的三毛金藻，再结合养殖池的水温、水质各项指标、病鱼临床症状、内部解剖特征等情况仔细诊断是否为三毛金藻中毒。三毛金藻中毒初期，鱼焦躁不安，呼吸频率加快，游动急促，方向不定；不久就趋于平静，反应逐渐迟钝，鱼集中在鱼池背风浅水角落，少数鱼静止不动，受到惊吓，即游向深水处，不久又返回。鱼体分泌大量粘液，胸鳍基部充血明显，逐渐各鳍基部都充血，鱼体后部颜色变淡，反应更为迟钝而平静，呼吸频率逐渐减小；随着中毒时间的延长，自胸鳍以后的鱼体麻痹、僵直，尾鳍、背鳍和腹鳍都不能摆动，只有胸鳍尚能摆动，触之无反应，鳃盖、眼眶周围、体表充血，红斑大小不一，有的连成片，头朝岸边，排列整齐，分布在池四角及浅水处，在水面下静止不动，但不浮头，受到惊吓也毫无反应，这时呼吸极困难且微弱，每分钟22次或更少，死前出现间歇性挣扎，不久即失去平衡而死，但也有极少数鱼死后仍保持自然状态。整个中毒过程，鱼不浮头，不到水面吞取空气，而是在平静的麻痹和呼吸困难中死去。中毒鱼体内部解剖学特征:剖开鱼体腹部，可见肠壁内血管扩张、充血；病鱼鳃丝腐烂，末端软骨外露，鳃瓣变灰白或白色，鳃瓣边缘附着污物或大量粘液；鳃盖骨内表皮充血，皮下肌肉充血、出血，病鱼口腔上下颌、头顶部、眼眶周围、鳃盖、鳃及鳍条基部都充血，肠道发炎、充血，呈紫红色；肛门红肿，鳞片松弛，轻压腹部或从头提起，有黄色黏液或血脓从肛门流出；眼球突出，剥除鱼的皮肤，可见肌肉呈点状或块状充血、出血，严重时全身肌肉呈紫黑色，肠壁充血，但仍具韧性，肠内无食物，肠系膜及周围脂肪、鳔、胆囊、肝、脾、肾也有出血点或血丝。发病池水呈棕褐色，透明度大于50厘米，溶氧丰富，为8 — 12mg / L，总氨含量小于0.25mg / L0
[0013]预防方法:预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用。I号微藻浓缩培养液配方:NH4N035 克，CaCO3L 4 克，K2HP O 44 克，Na2SiO3.9H2 O 0.5 克，MgS O 4.7H2 O 25 克，NaHC O 34克，九二 O植物生长刺激素`400国际单位，f / 2维生素溶液100毫升，f / 2微量元素溶液100毫升，人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升。其中f / 2微量元素溶液配方=ZnSO4.4Η2 O 23毫克，MnCl2.4Η2 O178 毫克，CuSO4.5Η2010 毫克，FeC6H5O7.5Η2 O 3.9 克，Na2MO O 4.2Η207.3 毫克，CoCl2.6Η2O 12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升。配置中药消毒液:由以下重量比的物质组成:黄芩7~10份、黄秋葵粉3~5份、鱼腥草3~5份、大黄5~10份、甘草5~10份；将上述药材放入可加热的容器中，加入3~5倍体积的纯净水，煮沸后持续煮30~50分钟，后过滤，沉淀I~2小时，后取澄清液即可；所述黄秋葵粉是清洗干净并烘干后的黄秋葵茎叶、花及籽粒经超微粉碎机粉碎至250目，然后搅匀、灭菌所得；
[0014]沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率。具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次。在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监测和管理，如发现水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒I号浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高。这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
[0015]治疗方法:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米，再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，7天后中毒鱼类即可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
[0016]有益效果
[0017]关于草鱼三毛金藻中毒病的诊断方法，传统上只用肉眼观察鱼体外表和病鱼的行为及活动状况，因本病症状与鱼体缺氧、草鱼出血病和烂鳃病症状有很多相似之处，传统方法诊断不准确，不可靠，易误诊。本发明在传统诊断方法基础上，增加了鱼体的内部解剖学病理观察，特别是注重对病鱼眼、鳍条、肠道、鳔、胆囊、肝、脾、肾、肛门的详细检查，重点检查有无三毛金藻中毒特有症状，再加上显微镜检查水中微藻，连同池水水质的化学检测，诊断更加准确、可靠，为下一步的治疗提供坚实基础。关于三毛金藻中毒防治方法，传统上用黏土吸附，即50kg池水加入0.15kg黏土吸附，效果较好，且不受温度限制，但不能彻底杀死三毛金藻。也有人用0.7g / m3硫酸铜全池泼洒，但硫酸铜仅能抑制毒素分泌，或减弱毒素活性，也不能完全杀灭该藻。还有人全池遍洒盐酸或醋酸，使池水的PH调至6.5 — 7.0，可立即解毒，但成本太高，生产应用困难。我的实验和研究表明，用醋糟和聚丙烯酰胺处理发病池塘治疗三毛金藻中毒 效果更好，不仅能彻底杀灭三毛金藻，对草鱼伤害小，治愈率高，而且原料易得，成本低，操作简便，实用性强，可在生产中大面积推广应用。
【具体实施方式】
[0018]I)九二 O植物生长刺激素为白色结晶粉末，不易溶解于水，可先用酒精充分溶解(每克用50毫升酒精或60度白酒溶解I小时以上)，再按所需浓度兑水稀释；
[0019]2)因为FeC6H5O7.5Η2 O较难溶解，可加少量自来水在火炉上微热至80 — 90°C，并不断搅拌至全部融化；
[0020]3)人尿制备方法:取人尿1000毫升，烧瓶煮沸15分钟后，冷却24小时，装入白色
透明磨口塞试剂瓶，密封，置于4°C冰箱保存，备用；
[0021]4)羊粪浸出液制备方法:取新鲜羊粪10公斤，加入麸皮I公斤，玉米面0.5公斤，自来水I升，充分搅拌，装入塑料袋发酵10天，后取2公斤放入盆中，加入6升蒸馏水，充分搅拌15分钟，静置，36小时后500目筛絹过滤，取滤液加热煮沸30分钟，杀死其中的病毒等微生物，冷却，静置72小时，取上清液，即为羊粪浸出液，装入磨口塞试剂瓶，密封，置于4°C冰箱保存，备用；
[0022]5)牛粪浸出液制备方法:取牛粪50公斤，加入麸皮3公斤，玉米面I公斤，自来水4升，充分搅拌，堆成圆锥状，自然发酵15天，后摊成薄层，阳光下暴晒3天，后取3公斤放入水桶中，加入10升蒸馏水，充分搅匀，静置，48小时后400目筛絹过滤，取滤液加热，煮沸45分钟，杀死其中的细菌、霉菌、病毒等，冷却，沉淀48小时，取上清液，即得牛粪浸出液，装入磨口塞试剂瓶，密封，置于4°C冰箱保存，备用；
[0023]6) 土壤抽出液制备方法:取草地上层有机质较多且较松散土壤I公斤，加蒸馏水5000毫升，再加入Na0H2.5克，充分搅拌，煮沸45分钟，冷却后过滤，将清液置于暗处静置48小时，取上清液装入棕色试剂瓶，密封，置于4°C冰箱保存，备用；
[0024]7)配制I号微藻浓缩培养液的过程中需不断搅水，纯水中加完一种营养盐，不停地搅拌，隔3分钟，再加下一种，而且各种营养盐按配方提供的顺序加入，以免发生化学反应；
[0025]8)配制I号微藻浓缩培养液过程中各种营养盐特别是f / 2维生素溶液需预先配成母液，置于4°C冰箱冷藏保存，备用；
[0026]9)配制I号微藻浓缩培养液和防治草鱼三毛金藻中毒病过程中所用化学药品纯度均需化学纯级别；
[0027]10)治疗过程中所用醋糟必须新鲜；
[0028]11)欲从根本上消除三毛金藻的危害，预防最重要，尤其是冬季和早春，保持池水适当的肥度是预防三毛金藻中毒的最好方法。在早春或晚秋，加强池塘水质监测和管理，发现水体透明度加大、池水PH值偏高，应及时施肥，即按每立方米池水泼洒I升的量全池均匀泼洒I号微藻浓缩培养液，培肥水质，促进有益藻类的繁殖来抑制三毛金藻的生长。
[0029]12)草鱼三毛金藻中毒病的诊断方法:显微镜诊断:取0.4米深处的池水25毫升，滴加鲁哥氏碘液I毫升，5分钟后在显微镜10X40(目镜X物镜)暗视野下(关掉显微镜的光圈)，观察是否有带有三根鞭毛的三毛金藻，再结合养殖池的水温、水质各项指标、病鱼临床症状、内部解剖特征等情况仔细诊断是否为三毛金藻中毒。三毛金藻中毒初期，鱼焦躁不安，呼吸频率加快，游动急促，方向不定；不久就趋于平静，反应逐渐迟钝，鱼集中在鱼池背风浅水角落，少数鱼静止不动，受到惊吓，即游向深水处，不久又返回。鱼体分泌大量粘液，胸鳍基部充血明显，逐渐各鳍基部都充血，鱼体后部颜色变淡，反应更为迟钝而平静，呼吸频率逐渐减小；随着中毒时间的延长，自胸鳍以后的鱼体麻痹、僵直，尾鳍、背鳍和腹鳍都不能摆动，只有胸鳍尚能摆动，触之无反应，鳃盖、眼眶周围、体表充血，红斑大小不一，有的连成片，头朝岸边，排列整齐，分布在池四角及浅水处，在水面下静止不动，但不浮头，受到惊吓也毫无反应，这时呼吸极困难且微弱，每分钟22次或更少，死前出现间歇性挣扎，不久即失去平衡而死，但也有极少数鱼死后仍保持自然状态。整个中毒过程，鱼不浮头，不到水面吞取空气，而是在平静的麻痹和呼吸困难中死去。中毒鱼体内部解剖学特征:剖开鱼体腹部，可见肠壁内血管扩张、充血；病鱼鳃丝腐烂，末端软骨外露，鳃瓣变灰白或白色，鳃瓣边缘附着污物或大量粘液；鳃盖骨内表皮充血，皮下肌肉充血、出血，病鱼口腔上下颌、头顶部、眼眶周围、鳃盖、鳃及鳍条基部都充血，肠道发炎、充血，呈紫红色；肛门红肿，鳞片松弛，轻压腹部或从头提起，有黄色黏液或血脓从肛门流出；眼球突出，剥除鱼的皮肤，可见肌肉呈点状或块状充血、出血，严重时全身肌肉呈紫黑色，肠壁充血，但仍具韧性，肠内无食物，肠系膜及周围脂肪、鳔、胆囊、肝、脾、肾也有出血点或血丝。发病池水呈棕褐色，透明度大于50厘米，溶氧丰富，为8 — 12mg/L，总氨含量小于0.25mg / L。
[0030]13)预防方法:预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用。I号微藻浓缩培养液配方:NH4N035 克，CaC O 31.4 克，K2HP O 44 克，Na2Si O 3.9Η2 O 0.5 克，MgSO4.7Η2O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f / 2微量兀素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升,羊粪浸出液15毫升,土壤抽出液30毫升,纯水1000毫升。其中f/2微量兀素溶液配方:ZnS04.4Η2 O 23晕克，MnCl2.4Η2 O 178 毫克，CuSO4.5Η2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5Η2 O 3.9 克，Na2MO O 4.2Η2 O7.3毫克，CoCl2.6Η2 O 12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升。沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率。具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次。在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监测和管理，如发现水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒I号浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高。这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
[0031]14)治疗方法:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米，再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，7天后中毒鱼类即可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
[0032]—种用于培养草鱼三毛金藻的I号微藻浓缩培养液，配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4 克，K2HP044 克，Na2SiO3.9Η2 O 0.5 克，MgSO4.7Η2 O 25 克，NaHC034 克，九二 O 植物生长刺激素400国际单位,f/2维生素溶液100毫升,f/2微量元素溶液100毫升,人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升；其中 f / 2 微量元素溶液配方=ZnSO4.4H2 O 23 毫克，MnCl2.4H20178 毫克，CuSO4.5H2 O 10毫克，FeC6H5O7.5Η203.9 克，Na2MoO4.2Η2 O 7.3 毫克，CoCl2.6Η2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液`配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5晕克，纯水1000毫升。
[0033]一种草鱼三毛金藻中毒病的预防方法:1)预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用;1号微藻浓缩培养液配方:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP044克，Na2SiO3.9H2 O
0.5克，MgSO4.7H2 O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f / 2微量兀素溶液100毫升,人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升,羊粪浸出液15毫升,土壤抽出液30毫升,纯水1000毫升；其中f / 2微量兀素溶液配方:ZnSO 4.4H2 O 23 毫克，MnCl2.4H2 O 178 毫克，CuS O 4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5H2 O 3.9克，Na2MoO4.2H2 O 7.3 毫克，CoCl2.6H2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35 克，纯水 1000 毫升；f /2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升;
[0034]2)配置中药消毒液:由以下重量比的物质组成:黄芩7~10份、黄秋葵粉3~5份、鱼腥草3~5份、大黄5~10份、甘草5~10份；将上述药材放入可加热的容器中，加入3~5倍体积的纯净水，煮沸后持续煮30~50分钟，后过滤，沉淀I~2小时，后取澄清液即可；所述黄秋葵粉是清洗干净并烘干后的黄秋葵茎叶、花及籽粒经超微粉碎机粉碎至250目，然后搅匀、灭菌所得；
[0035]3)沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率；具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次；在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监测和管理，如水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒所述的I号微藻浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高；这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
[0036]一种草鱼三毛金藻饲养池的灭菌方法:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米，再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，所述I号微藻浓缩培 养液，配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP044克，Na2SiO3.9H2
O0.5克，MgSO4.7H2 O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f/2微量元素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升,纯水1000毫升；其中f/2微量兀素溶液配方:ZnSO4.4H2 O 23 毫克，MnCl2.4H2 O 178 毫克，CuSO4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5H2 O 3.9克，Na2MoO4.2H2 O 7.3 毫克，CoCl2.6H2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35 克，纯水 1000 毫升；f /2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升;
[0037]培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，同时加入，权利要求2中步骤2)所述的中药消毒液，加入量为每立方米池水泼洒I~2升的量，7天后饲养池即恢复正常，中毒鱼类同时可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
[0038]所述的草鱼三毛金藻中毒病的诊断方法如下:
[0039]显微镜诊断:取0.4米深处的池水25毫升，滴加鲁哥氏碘液I毫升，5分钟后在显微镜10X40(目镜X物镜)暗视野下(关掉显微镜的光圈)，观察是否有带有三根鞭毛的三毛金藻，再结合养殖池的水温、水质各项指标、病鱼临床症状、内部解剖特征等情况仔细诊断是否为三毛金藻中毒。三毛金藻中毒初期，鱼焦躁不安，呼吸频率加快，游动急促，方向不定；不久就趋于平静，反应逐渐迟钝，鱼集中在鱼池背风浅水角落，少数鱼静止不动，受到惊吓，即游向深水处，不久又返回。鱼体分泌大量粘液，胸鳍基部充血明显，逐渐各鳍基部都充血，鱼体后部颜色变淡，反应更为迟钝而平静，呼吸频率逐渐减小；随着中毒时间的延长，自胸鳍以后的鱼体麻痹、僵直，尾鳍、背鳍和腹鳍都不能摆动，只有胸鳍尚能摆动，触之无反应，鳃盖、眼眶周围、体表充血，红斑大小不一，有的连成片，头朝岸边，排列整齐，分布在池四角及浅水处，在水面下静止不动，但不浮头，受到惊吓也毫无反应，这时呼吸极困难且微弱，每分钟22次或更少，死前出现间歇性挣扎，不久即失去平衡而死，但也有极少数鱼死后仍保持自然状态。整个中毒过程，鱼不浮头，不到水面吞取空气，而是在平静的麻痹和呼吸困难中死去。中毒鱼体内部解剖学特征:剖开鱼体腹部，可见肠壁内血管扩张、充血；病鱼鳃丝腐烂，末端软骨外露，鳃瓣变灰白或白色，鳃瓣边缘附着污物或大量粘液；鳃盖骨内表皮充血，皮下肌肉充血、出血，病鱼口腔上下颌、头顶部、眼眶周围、鳃盖、鳃及鳍条基部都充血，肠道发炎、充血，呈紫红色；肛门红肿，鳞片松弛，轻压腹部或从头提起，有黄色黏液或血脓从肛门流出；眼球突出，剥除鱼的皮肤，可见肌肉呈点状或块状充血、出血，严重时全身肌肉呈紫黑色，肠壁充血，但仍具韧性，肠内无食物，肠系膜及周围脂肪、鳔、胆囊、肝、脾、肾也有出血点或血丝。发病池水呈棕褐色，透明度大于50厘米，溶氧丰富，为8 — 12mg / L，总氨含量小于0.25mg / L0
[0040]预防方法:预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用。I号微藻浓缩培养液配方:NH4N035 克，CaC O 31.4 克，K2HP O 44 克，Na2Si O 3.9H2 O 0.5 克，MgS O 4.7H2 O25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f/2维生素溶液100毫升，f /2微量兀素溶液100毫升，人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升,土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升。其中f / 2微量元素溶液配方=ZnSO4.4H2 O 23毫克，MnCl2.4H20178 毫克，CuSO4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5H2 O 3.9 克，Na2MoO4.2H2 O 7.3毫克，CoCl2.6H2012毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克,维生素B1IOO毫克,维生素H0.5毫克,纯水1000毫升。配置中药消毒液:由以下重量比的物质组成:黄芩7~10份、黄秋葵粉3~5份、鱼腥草3~5份、大黄5~10份、甘草5~10份；将上述药材放入可加热的容器中，加入3~5倍体积的纯净水，煮沸后持续煮30~50分钟，后过滤，沉淀I~2小时，后取澄清液即可；所述黄秋葵粉是清洗干净并烘干后的黄秋葵茎叶、花及籽粒经超微粉碎机粉碎至250目，然后搅匀、灭菌所得；
[0041]沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率。具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次。在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监测和管理，如发现水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒I号浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高。这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
[0042]治疗方法:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米，再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，7天后中毒鱼类即可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
[0043]最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例 对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。
【权利要求】
1.一种用于培养草鱼三毛金藻的I号微藻浓缩培养液，其特征在于配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4 克，K2HP O 44 克，Na2Si O 3.9H2 O 0.5 克，MgS O 4.7H2 O 25 克，NaHC034 克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f / 2维生素溶液100毫升，f / 2微量元素溶液100毫升，人尿100毫升，牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升；其中f/2微量元素溶液配方=ZnSO4.4H2 O 23毫克，MnCl2.4H2 O 178毫克，CuSO4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5H2 O 3.9 克，Na2MoO4.2H2 O 7.3 毫克，CoCl2.6H2 O 12毫克，Na2EDTA4.35克，纯水1000毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO晕克，维生素H0.5晕克，纯水1000毫升。
2.—种草鱼三毛金藻中毒病的预防方法:1)预先制备I号微藻浓缩培养液，放4°C冷库备用；1号微藻浓缩培养液配方:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP O 44克，Na2SiO3.9H2 O0.5克，MgSO4.7H2 O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f / 2维生素溶液100毫升，f/2微量兀素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升,羊粪浸出液15毫升,土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升；其中f / 2微量兀素溶液配方:ZnSO4.4H2 O 23 毫克，MnCl2.4H2 O 178 毫克，CuSO4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5H2 O 3.9克，Na2MoO4.2Η207.3 毫克，CoCl2.6Η2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35 克，纯水 1000 毫升；f / 2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1100毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升。 2)配置中药消毒液:由以下重量比的物质组成:黄芩7~10份、黄秋葵粉3~5份、鱼腥草3~5份、大黄5~10份、甘草5~10份；将上述药材放入可加热的容器中，加入3~5倍体积的纯净水，煮沸后持续煮30~50分钟，后过滤，沉淀I~2小时，后取澄清液即可；所述黄秋葵粉是清洗干净并烘干后的黄秋葵茎叶、花及籽粒经超微粉碎机粉碎至250目，然后搅匀、灭菌所得。 3)沿海新开发的池塘进行淡水鱼养殖，鱼塘必须经过反复的浸泡、换水，以降低池塘的盐碱度，减少三毛金藻病发病率；具体做法是:向池内加注新鲜淡水，至50厘米水深，搅动池水，7天后排掉；重新加注新鲜淡水50厘米深，搅动池水，7天后再排掉，如此反复进行5次；在早春或晚秋季节，加强池塘的水质监`测和管理，如水体透明度较大、池水较瘦，向池中全池泼洒所述的I号微藻浓缩培养液，具体用量是每立方米池水泼洒I号微藻浓缩培养液I升，每隔15天泼洒一次，共泼洒3次，每次泼洒完后，开动增氧机45分钟，使营养盐均匀分布全池并改善水质，避免局部浓度太高；这样可培肥水质，有利于其它藻类繁殖，抑制三毛金藻生长。
3.一种草鱼三毛金藻饲养池的灭菌方法，其特征在于:三毛金藻中毒发生后，立即补充新鲜淡水，冲淡小三毛毒素，缓解中毒症状，加水量是使池水深度增加40厘米,再按每亩泼洒40公斤的量全池泼洒醋糟解毒，待病鱼中毒症状消失后，按1.5克/米3池水的量全池泼洒聚丙烯酰胺，杀灭毒藻，再过48小时按每立方米池水泼洒I升的量全池泼洒I号微藻浓缩培养液，所述I号微藻浓缩培养液，配方如下:NH4N035克，CaCO3L 4克，K2HP O 44克，Na2SiO3.9H2 O 0.5克，MgSO4.7H2 O 25克，NaHC034克，九二 O植物生长刺激素400国际单位，f / 2维生素溶液100毫升/ 2微量元素溶液100毫升,人尿100毫升,牛粪浸出液25毫升，羊粪浸出液15毫升，土壤抽出液30毫升，纯水1000毫升；其中f / 2微量元素溶液配方=ZnSO4.4H2 O 23 毫克，MnCl2.4H2 O 178 毫克，CuSO4.5H2 O 10 毫克，FeC6H5O7.5Η203.9克，Na2MoO4.2Η2 O 7.3 毫克，CoCl2.6Η2 O 12 毫克，Na2EDTA4.35 克，纯水 1000 毫升；f /2维生素溶液配方:维生素B120.5毫克，维生素B1IOO毫克，维生素H0.5毫克，纯水1000毫升; 培育有益藻类，然后开动增氧机45分钟，同时加入，权利要求1 一 2中步骤2)所述的中药消毒液，加 入量为每立方米池水泼洒I~2升的量，7天后饲养池即恢复正常，中毒鱼类同时可恢复正常，随后加注15厘米深的新鲜淡水并开动增氧机60分钟，以改善水质并增加水中溶氧。
【文档编号】A01N65/30GK103834569SQ201410073505
【公开日】2014年6月4日 申请日期:2014年3月3日 优先权日:2014年3月3日
【发明者】王培磊 申请人:临沂大学