一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，属于植物组织培养【技术领域】。其组分为：KNO3、NH4NO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O、CaCl2·2H2O、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、Na2·EDTA、FeSO4·7H2O、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥、活性炭。本发明的有益效果是：该培养基不添加激素，且能缩短成苗时间。
【专利说明】一种诱导紫皮石斛原球莖分化的培养基
【技术领域】
[0001]本发明属于植物组织培养【技术领域】，具体涉及一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基。
【背景技术】
[0002]紫皮石斛是兰科植物以齿瓣石斛为代表的一类兰科石斛属植物(Dendrobiumdevonianum Paxt)，因其茎呈紫色，故称为紫皮石斛、紫皮兰。《神农本草经》记载:“石斛，一名林兰。味甘，平，无毒。主伤中，除痹，补五脏厚肠胃，轻身延年”。《本草纲目》称石斛有“强阴益精、厚肠胃、补内不足、轻身延年”之功效。
[0003]紫皮石斛的人工栽培始于20世纪90年代，于2006年形成分散的小规模种植，近几年随着其显著的药用保健功效日益得到了广大消费者的青睐，价格不断攀升，种植规模迅猛发展，经济效益可观。
[0004]但多年以来，紫皮石斛在通过原球茎分化时，采用的培养基内多添加激素，且成苗时间较长，严重地危害了人们的身体健康，且影响紫皮石斛的推广应用。因此，在对原球茎分化时不采用激素，还能缩短成苗时间成为了亟需解决的技术问题。
【发明内容】
[0005]本发明的目的是提供一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，该培养基不添加激素，且能缩短成苗时间。
[0006]本发明所采取的技术方案是一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，其组分及其含量为:KN03550 ~1450mg/L、NH4N0349 5 ~1245mg/L、KH2P0450 ~125mg/L、MgS04.7Η20120 ~275mg/L、CaCl2.2H20135 ~330mg/L、KI0.45 ~0.83mg/L、Η3Β033.75 ~9.00mg/L、MnSO4.4Η2013.5 ~34.5mg/L、ZnSO4.7Η205.2 ~12.8mg/L、Na2MoO4.2Η200.15 ~0.35mg/L、CuSO4.5H200.01 ~0.035mg/L、CoCl2.6H200.01 ~0.035mg/L、Na2.EDTA25 ~55mg/L、FeSO4.7H2018~42mg/L、肌醇50~300mg/L、甘氨酸L 2~2.8mg/L、盐酸硫胺素0.3~
0.7mg/L、盐酸吡哆醇 0.3 ~0.7mg/L、烟酸 0.3 ~0.7mg/L、蔗糖 18000 ~55000mg/L、琼脂2500 ~8000mg/L、香蕉泥 30000 ~75000mg/L、土豆泥 30000 ~75000mg/L、活性炭 500 ~2000mg/L。
[0007]优选的，其组分及其含量为:KN03850~1150mg/L、NH4N03750 ~990mg/L、KH2P0475 ~100mg/L、MgSO4.7H20165 ~250mg/L、CaCl2.2H20180 ~240mg/L、KI0.55 ~0.79mg/L、H3B035.5 ~7.5mg/L、MnSO4.4H2020 ~27mg/L、ZnSO4.7H207.5 ~10.5mg/L、Na2MoO4.2H200.21 ~0.3mg/L、CuSO4.5H200.02 ~0.03mg/L、CoCl2.6H200.02 ~0.03mg/L、Na2.EDTA30 ~42mg/L、FeSO4.7H2025 ~32mg/L、肌醇 70 ~250mg/L、甘氨酸 1.5 ~
2.2mg/L、盐酸硫胺素0.4~0.6mg/L、盐酸批P多醇0.4~0.6mg/L、烟酸0.4~0.6mg/L、鹿糖 20000 ~50000mg/L、琼脂 3000 ~7000mg/L、香蕉泥 40000 ~65000mg/L、土豆泥 40000 ~65000mg/L、活性炭 600 ~1500mg/L。[0008]特别优选的，其组分及其含量为:KN03923mg/L、NH4N03780mg/L、KH2P0485mg/L、MgSO4.7H20200mg/L、CaCl2.2H20200mg/L、KI0.685mg/L、H3B037mg/L、MnSO4.4H2025mg/L、ZnSO4.7H207.8mg/L、Na2MoO4.2H200.23mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2 *EDTA35mg/L>FeSO4.7H2028mg/L、肌醇 100mg/L、甘氨酸 1.8mg/L、盐酸硫胺素 0.5mg/L、盐酸批P多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 5000mg/L、香蕉泥 50000mg/L、土豆泥 50000mg/L、活性炭 1000mg/L。
[0009]本发明还提供一种所述培养基培养紫皮石斛原球茎的方法，将紫皮石斛原球茎接种于所述培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养35~45天，即可。特别优选的，光照强度为2200Lux，温度为20°C、22°C，培养的时间为40天。
[0010]优选的，所述光照的时间为每天14小时~18小时。特别优选的，每天光照的时间为16小时。
[0011]优选的，在所述紫皮石斛原球茎接种前，将所述培养基在121°C的条件下灭菌20分钟。
[0012]本发明的有益效果在于:应用本发明培养基培养出的紫皮石斛分化苗，无激素，叶色绿，茎粗壮，不易倒伏，具有较强的同步性。成苗时间短，仅需35~45天即可得到Icm左右的紫皮石斛分化苗，比现有60天的出苗时间，周期缩短了三分之一以上，适合工厂化育苗操作。同时本培养 基较其它传统培养基，用量少，节约成本。
【具体实施方式】
[0013]为使本领域技术人员详细了解本发明的生产工艺和技术效果，下面以具体的生产实例来进一步介绍本发明的应用和技术效果。
[0014]实施例1:
[0015]称取适量KN03、NH4NO3> KH2PO4, MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥和活性炭混匀，得pH为5的
培养基。
[0016]且该培养基中各组分的含量为:
[0017]KN03923mg/L、NH4N03780mg/L、KH2P0485mg/L、MgSO4.7H20200mg/L、CaCl2.2H20200mg/L、KI0.685mg/L、H3B037mg/L、MnSO4.4H2025mg/L、ZnSO4.7H207.8mg/L、Na2MoO4.2H200.23mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2.EDTA35mg/L、FeSO4.7H2028mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸1.8mg/L、盐酸硫胺素0.5mg/L、盐酸吡口多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 5000mg/L、香蕉泥 50000mg/L、土豆泥50000mg/L、活性炭 1000mg/L。
[0018]实施例2:
[0019]称取适量KNO3> NH4NO3' KH2PO4' MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3BO3' MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥和活性炭混匀，得pH为6的
培养基。[0020]且该培养基中各组分的含量为:
[0021]KN031450mg/L、NH4N03495mg/L、KH2P0450mg/L、MgSO4.7H20275mg/L、CaCl2.2H20330mg/L、KI0.83mg/L、H3B039.00mg/L、MnSO4.4H2034.5mg/L、ZnSO4.7H2012.8mg/L、Na2MoO4.2H200.35mg/L、CuSO4.5H200.035mg/L、CoCl2.6H200.035mg/L、Na2.EDTA55mg/L、FeSO4.7H2042mg/L、肌醇300mg/L、甘氨酸2.8mg/L、盐酸硫胺素0.7mg/L、盐酸吡口多醇 0.7mg/L、烟酸 0.7mg/L、鹿糖 55000mg/L、琼脂 8000mg/L、香蕉泥 75000mg/L、土豆泥75000mg/L、活性炭 2000mg/L。
[0022]实施例3:
[0023]称取适量KN03、NH4NO3> KH2PO4, MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3BO3' MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥和活性炭混匀，得pH为5.5
的培养基。
[0024]且该培养基中各组分的含量为:KN03550mg/L、NH4NO31245mg/L、KH2P04125mg/L、MgSO4.7H20120mg/L、CaCl2.2H20135mg/L、KI0.45mg/L、H3B033.75mg/L、MnSO4.4H2013.5mg/UZnSO4.7H205.2mg/L、Na2MoO4.2H200.15mg/L、CuSO4.5H200.01mg/L、CoCl2.6H200.01mg/L> Na2.EDTA25mg/L、FeSO4.7H2018mg/L、肌醇 50mg/L、甘氨酸 1.2mg/L、盐酸硫胺素 0.3mg/L、盐酸批P多醇 0.3mg/L、烟酸 0.3mg/L、鹿糖 18000mg/L、琼脂 2500mg/L、香蕉泥 30000mg/L、土豆泥 30000mg/L、活性炭 500mg/L。
[0025]实施例4:
[0026]称取适量KN03、NH4NO3> KH2PO4, MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥和活性炭混匀，得pH为5.2
的培养基。
[0027]且该培养基中各组分的含量为:KN03850mg/L、NH4N03750mg/L、KH2P0475mg/L、MgSO4.7H20165mg/L、CaCl2.2H20180mg/L、KI0.55mg/L、H3B035.5mg/L、MnSO4.4H2020mg/L、ZnSO4.7H207.5mg/L、Na2MoO4.2H200.21mg/L、CuSO4.5H200.02mg/L、CoCl2.6H200.02mg/L、Na2.EDTA30mg/L> FeSO4.7H2025mg/L、肌醇 70mg/L、甘氨酸 1.5mg/L、盐酸硫胺素 0.4mg/L、盐酸批卩多醇 0.4mg/L、烟酸 0.4mg/L、鹿糖 20000mg/L、琼脂 3000mg/L、香蕉泥 40000mg/L、土豆泥 40000mg/L、活性炭 600mg/L。
[0028]实施例5:
[0029]称取适量KN03、NH4NO3> KH2PO4, MgSO4.7H20、CaCl2.2H20、K1、H3B03、MnSO4.4Η20、ZnSO4.7Η20、Na2MoO4.2Η20、CuSO4.5Η20、CoCl2.6Η20、Na2.EDTA、FeSO4.7Η20、肌醇、甘氨酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇、烟酸、蔗糖、琼脂、香蕉泥、土豆泥和活性炭混匀，得pH为5.8
的培养基。
[0030]且该培养基中各组分的含量为=KNO31150mg/L、NH4N03990mg/L、KH2PO4100mg/L、MgSO4.7H20250mg/L、CaCl2.2H20240mg/L、KI0.79mg/L、Η3Β037.5mg/L、MnSO4.4H2027mg/L、ZnSO4.7H2010.5mg/L、Na2MoO4.2H200.3mg/L、CuSO4.5H200.03mg/L、CoCl2.6H200.03mg/L、Na2.EDTAAZmgziUFeSO4.7Η2032π^/1、肌醇 250mg/L、甘氨酸 2.2mg/L、盐酸硫胺素 0.6mg/L、盐酸批卩多醇 0.6mg/L、烟酸 0.6mg/L、鹿糖 50000mg/L、琼脂 7000mg/L、香蕉泥 65000mg/L、土豆泥 65000mg/L、活性炭 1500mg/L。
[0031]为验证本发明培养基的技术效果，将上述各实施例所得的培养基在121°C的条件下灭菌20分钟，然后特将紫皮石斛原球茎接种于培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养35~45天，光照的时间为每天14小时~18小时，即可得到Icm左右的紫皮石斛分化苗。相比现有的培养基或不在本发明申请所要求保护范围的组分及其含量内的技术方案，成苗时间大大缩短，成本减少，并且无激素，叶色绿，茎粗壮，不易倒伏，具有较强的同步性，具有显著的技术进步。
[0032]最后应说明的是，以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域技术人员应当理解，依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范 围中。
【权利要求】
1.一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN03550 ~1450mg/L、NH4N0349 5 ~1245mg/L、KH2P0450 ~125mg/L、MgSO4.7H20120 ~275mg/L、CaCl2.2H20135 ~330mg/L、KI0.45 ~0.83mg/L、Η3Β033.75 ~9.00mg/L、MnSO4.4Η2013.5 ~34.5mg/L、ZnSO4.7Η205.2 ~12.8mg/L、Na2MoO4.2Η200.15 ~0.35mg/L、CuSO4.5Η200.01 ~0.035mg/L、CoCl2.6Η200.01 ~0.035mg/L、Na2.EDTA25 ~55mg/L、FeSO4.7H2018~42mg/L、肌醇50~300mg/L、甘氨酸L 2~2.8mg/L、盐酸硫胺素(λ 3~0.7mg/L、盐酸吡哆醇 0.3 ~0.7mg/L、烟酸 0.3 ~0.7mg/L、蔗糖 18000 ~55000mg/L、琼脂2500 ~8000mg/L、香蕉泥 30000 ~75000mg/L、土豆泥 30000 ~75000mg/L、活性炭 500 ~2000mg/L。
2.根据权利要求1所述的一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN03850 ~1150mg/L、NH4N03750 ~990mg/L、KH2P0475 ~100mg/L、MgSO4.7H20165 ~250mg/L、CaCl2.2H20180 ~240mg/L、KI0.55 ~0.79mg/L、H3B035.5 ~7.5mg/L、MnS04.4Η2020 ~27mg/L、ZnS04.7Η207.5 ~10.5mg/L,Na2MoO4.2Η200.21 ~0.3mg/L、CuSO4.5H200.02 ~0.03mg/L、CoCl2.6H200.02 ~0.03mg/L、Na2.EDTA30 ~42mg/L、FeSO4.7H2025 ~32mg/L、肌醇 70 ~250mg/L、甘氨酸 1.5 ~2.2mg/L、盐酸硫胺素 0.4 ~0.6mg/L、盐酸批P多醇 0.4 ~0.6mg/L、烟酸 0.4 ~0.6mg/L、鹿糖 20000 ~50000mg/L、琼脂3000 ~7000mg/L、香蕉泥 40000 ~65000mg/L、土豆泥 40000 ~65000mg/L、活性炭 600 ~1500mg/L。
3.根据权利要求2所述的一种诱导紫皮石斛原球茎分化的培养基，其特征在于:其组分及其含量为:KN03923mg/L、NH4N03780mg/L、KH2P0485mg/L、MgSO4.7H20200mg/L、CaCl2.2H20200mg/L、KI0.685mg/L、H3B037mg/L、MnSO4.4H2025mg/L、ZnSO4.7H207.8mg/L、Na2MoO4.2H200.23mg/L、CuSO4.5H200.025mg/L、CoCl2.6H200.025mg/L、Na2.EDTA35mg/L、FeSO4.7H2028mg/L、肌醇100mg/L、甘氨酸1.8mg/L、盐酸硫胺素0.5mg/L、盐酸吡口多醇 0.5mg/L、烟酸 0.5mg/L、鹿糖 30000mg/L、琼脂 5000mg/L、香蕉泥 50000mg/L、土豆泥50000mg/L、活性炭 1000mg/L。
4.一种利用权利要求1-3任一项所述培养基培养紫皮石斛原球茎的方法，其特征在于:将紫皮石斛原球茎接种于所述培养基中，置于光照强度为2000~2500LUX，温度为18~25°C的环境下进行培养，培养35~45天，即可。
5.根据权利要求4所述培养基培养紫皮石斛原球茎的方法，其特征在于:所述光照的时间为每天14小时~18小时。
6.根据权利要求5所述培养基培养紫皮石斛原球茎的方法，其特征在于:在所述紫皮石斛原球茎接种前，将所述培养基在121°C的条件下灭菌20分钟。
【文档编号】A01H4/00GK103891614SQ201410118983
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年3月27日 优先权日:2014年3月27日
【发明者】李旦, 王俊, 陈远书, 潘瑶 申请人:西南林业大学