一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法
【专利摘要】本发明公开了一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，包括材料的选择、孵化方法和对比试验方法；所述孵化方法为泉水流水孵化法；所述材料的选择包括受精卵的选择、受精环境的选择以及水源的选择。且本发明表明孵化密度的大小直接影响孵化率的高低,用大鲵胚胎恒温多层充氧孵化器进行孵化,以每层放200～300颗受精卵最适宜,既节约空间又利于规模化批量生产,放200粒受精卵孵化率最高为93%；同时在最适温度19±0.5℃和最适密度下，对比三种不同孵化器对大鲵胚胎孵化的效果，结果表明三种孵化器并无畸形幼苗的出现，进一步肯定温度对畸形率影响最大；自制恒温多层充氧孵化器的孵化效果明显好于传统的孵化盆和孵化网箱，达到92.5%，且孵化卵粒数是前两者的三倍。
【专利说明】一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，具体是一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法及对比试验方法。
【背景技术】
[0002]中国大鲷(Andrias davidianus),俗称娃娃鱼，属两栖纲(AmpHibia)、有尾目(Vrodtle)JtJgJji^A (Cryptobrahidae)、大鲷属(Andrias),是世界上最大的珍稀两栖动物，为我国特有的国家二级保护动物，属暖水性山溪大型珍贵两栖动物，具有很高的科研、营养、食用、药用等价值。主要分布于黄河、长江、珠江及其支流中，尤以四川、湖北、湖南、贵州、陕西等省为多.但近几年，由于大鲵的栖息环境污染严重，其分布范围急剧缩小，仿天然条件的生态养殖已经不能阻挡大鲵种质资源急剧下降的趋势。
[0003]目前关于大鲵的研究，主要集中在如何提高大鲵的孵化率、生态习性、营养需求、养殖技术、繁殖等方面，刘鉴毅等虽然对怎样提高大鲵孵化率进行了大量的研究，但到目前为，大鲵的孵化率仍然不乐观，所以提高大鲵孵化率及规模化养殖等实际增养殖技术已成为当前中国大鲵保护和养殖中的关键问题。
本研究通过不同温度对大鲵胚胎发育的影响，结合实际养殖条件设计相关孵化器，旨在提高大鲵孵化率 ，并为大鲵规模化人工养殖创造条件和提供理论指导。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种高孵化率、低畸形率的大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0004]为实现上述目的，本发明提供如下技术方案:
一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，包括试验材料的选择、孵化方法和对比试验方法，所述孵化方法为泉水流水孵化法；所述试验材料的选择包括:
受精卵:试验用受精卵为贵定县岩下娃娃鱼在自然条件下所得的受精卵；
水源:为山泉水，水温常年13。。_18°C左右，溶氧5.5—7.5mg/L, ρΗ7.5-8.3 ；
孵化器:采用3种孵化器:(1)孵化盆，规格为60CmX60CmX30Cm的塑料盆，将网纱铺于盆内侧，水深为3cm,米用微流水并充入适量氧气；(2)孵化网箱,规格为60cmX60cmX80cm，将塑孵化网箱置于水面，水浸没孵化网箱底部并高出3cm固定，将网纱铺于篮子内侦彳，采用微流水并充入氧气；(3)大鲵胚胎恒温多层充氧孵化器，规格为60CmX60cmX50cm。
[0005]所述对比试验是将孵化器放入孵化池中进行的，且试验方法包括:
(1)温度对比试验，采用孵化网箱，孵化温度范围为15-23°C，每2°C设置一个梯度，共设置5个梯度；每个孵化网箱放入受精卵200粒，放入后开始进行温度的升降变化，以一天改变1°C，直至达到试验所需温度并保持恒温；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率；
(2)三种孵化器比较试验，向三种孵化器中分别放入200粒受精卵；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率；
(3)孵化密度试验，在孵化器筛网中分别放入200粒、250粒、300粒、350粒、400粒受精卵，每组试验设两个平行试验；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池进行孵化；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率。
[0006]作为本发明进一步的方案:温度对比试验中升温采用加热棒加热，降温用冰瓶降温。
[0007]作为本发明再进一步的方案:所述三种孵化器比较试验和孵化密度试验中的孵化条件均为:选取同一批卵，试验水流控制在4L / min，孵化水温19±0.5°C。
[0008]与现有技术相比，本发明的有益效果是:孵化密度的大小直接影响孵化率的高低，用大鲵胚胎恒温多层充氧孵化器进行孵化，以每层放200~300颗受精卵最适宜，既节约空间又利于规模化批量生产，放200粒受精卵孵化率最高为93% ;同时在最适温度19±0.5°C和最适密度下，对比三种不同孵化器对大鲵胚胎孵化的效果，结果表明三种孵化器并无畸形幼苗的出现，进一步肯定温度对畸形率影响最大；自制恒温多层充氧孵化器的孵化效果明显好于 传统的孵化盆和孵化网箱，达到92.5%，且孵化卵粒数是前两者的三倍。
【具体实施方式】
[0009]下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0010]本发明实施例中，一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，包括试验材料的选择、孵化方法和对比试验方法，所述孵化方法为泉水流水孵化法；所述试验材料的选择包括:
受精卵:试验用受精卵为贵定县岩下娃娃鱼在自然条件下所得的受精卵。
[0011]水源:为山泉水，水温常年12-16°c，溶氧10.0—12.4mg/L, pH7.6。
[0012]孵化器:本发明采用3种孵化器:(1)孵化盆，规格为60cmX60cmX30cm的塑料盆，将网纱铺于盆内侧，水深为3cm，采用微流水并充入适量氧气；(2)孵化网箱，规格为60cmX60cm XSOcm的水泥池，注入适量水，将大小适宜的塑料篮子置于水面，水浸没篮子底部并高出3cm固定，将网纱铺于篮子内侧，采用微流水并充入适量氧气；(3)恒温多层充氧孵化器，由孵化箱、恒温水箱、充氧机、进水管、溢水管、排污管、充氧管、控制阀构成；所述孵化箱内从上到下依次设有3层相互隔离的孵化腔，规格为60cmX60cm X50cm每一层孵化腔的中部都设置有一水平的筛板，每一层的孵化腔都连接有进水支管和充氧管均通过控制阀控制水流速度和充氧量以及溢水管可调节孵化腔内的水位高低，每一层孵化腔的底部都设置有排污管。
[0013]所述对比试验的试验步骤包括:
(I)温度对比试验，采用孵化网箱，孵化温度范围为15-23°C，每2°C设置一个梯度，共设置5个梯度；每个孵化网箱放入受精卵200粒，放入后开始进行温度的升降变化，以一天改变rc，直至所设温度下保持恒温；各组温度均由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池进行孵化；升温采用加热棒加热，降温用冰瓶降温，每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率，得表1:
表1不同温度下胚胎发育所需时间
【权利要求】
1.一种大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，包括试验材料的选择、孵化方法和对比试验方法，其特征在于，所述孵化方法为泉水流水孵化法；所述试验材料的选择包括: 受精卵:试验用受精卵为贵定县岩下娃娃鱼在自然条件下所得的受精卵； 水源:为山泉水，水温常年13。。-18°c左右，溶氧5.5—7.5mg/L, ρΗ7.5-8.3 ； 孵化器:采用3种孵化器:(1)孵化盆，规格为60CmX60CmX30Cm的塑料盆，将网纱铺于盆内侧，水深为3cm,米用微流水并充入适量氧气；(2)孵化网箱,规格为60cmX60cmX80cm，将塑孵化网箱置于水面，水浸没孵化网箱底部并高出3cm固定，将网纱铺于篮子内侦彳，采用微流水并充入氧气；(3)大鲵胚胎恒温多层充氧孵化器，规格为60CmX60cmX 50cm ;所述对比试验是将孵化器放入孵化池中进行的，且试验方法包括:(1)温度对比试验，采用孵化网箱，孵化温度范围为15_23°C，每2°C设置一个梯度，共设置5个梯度；每个孵化网箱放入受精卵200粒，放入后开始进行温度的升降变化，以一天改变1°C，直至达到试验所需温度并保持恒温；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率；(2)三种孵化器比较试验，向三种孵化器中分别放入200粒受精卵；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率；(3)孵化密度试验，在孵化器筛网中分别放入200粒、250粒、300粒、350粒、400粒受精卵，每组试验设两个平行试验；由恒温箱控制水温恒定后再输入孵化池进行孵化；每隔2h观察一次并翻滚受精卵；20天后，每天中午观察一次直至幼鲵孵出；以出膜一半的量为孵化时间，记录孵化时间、孵化率、畸形率。
2.一种如权利要求1所述的大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，其特征在于，温度对比试验中升温采用加热棒加热，降温用冰瓶降温。
3.—种如权利要求1所述的大鲵胚胎发育试验研究及对比试验方法，其特征在于，所述三种孵化器比较试验和孵化密度试验中的孵化条件均为:选取同一批卵，试验水流控制在 4L / min，孵化水温 19±0.5°C。
【文档编号】A01K67/02GK103947604SQ201410149865
【公开日】2014年7月30日 申请日期:2014年4月15日 优先权日:2014年4月15日
【发明者】欧阳力剑, 陈永祥, 王雷, 瞿继勇 申请人:毕节学院