一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导等步骤,本发明通过建立青皮竹组培快繁技术体系,繁殖系数大,便于在生产上大面积推广种植。
【专利说明】一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及青皮竹组织培养的快繁方法,属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]着包,Bambusa又称篾竹、山青竹、黄竹、小青竹,禾本科,分布在华南地区,包括广东、广西、台湾、湖南、福建、云南南部,相当于北纬25度以南地区,其分布范围内年均温18?20°C,年降雨量1400mm以上都能生长良好,好生于土壤疏松、湿润、肥沃的立地;河岸溪畔、平原、丘陵、四旁均可生长(尤其是江河两岸、盆地和平原冲积土上生长最好)。适生于温暖湿润之气候环境中。主产于广东,以广宁县最多,也是全世界最大的青皮竹中心。生产实践中常用移植母竹或用竹苗造林,其内含物天竺黄,竹茹和竹浙等可以做为治疗疾病的药物。浙江、江西有引种,能耐23°C低温。青皮竹理论上有种子、埋杆、埋节、埋蔸和次生枝育苗等方法。但青皮竹很少开花,不易结实,很少采用种子育苗。南方各省采用埋杆、埋节、埋蔸,主枝及次生枝育苗繁殖等法,均已成功。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种青皮竹组织培养的快繁方法,本发明通过建立青皮竹组培快繁技术体系,繁殖系数大,便于在生产上大面积推广种植。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取青皮竹2节的嫩茎,去掉长约3mm的叶和顶芽,于20%的漂白液中冲洗15min,超净工作台上9%的次氯酸钙,并滴加两滴吐温,处理16min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的青皮竹带芽茎段,接入WPM+ZT3mg/L+NAA0.lmg/L+广大霉素15mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行芽的诱导,PH5.80,光照强度27001x,光期13h/d,温度27°C,诱导出来的腋芽放入 WPM+BAP0.3-0.5mg/L+Cadl.5_2mg/L+ 半胱氨酸 100mg/L+0.65% 琼脂 +30g/L 蔗糖培养基中进行丛生芽的增殖,PH5.80,光照35001x,光期15h/d,温度27°C,培养出来的丛生芽接Λ LS+NAA0.lmg/L+Cadl-1.2mg/L,附加 0.65% 琼脂,50g/L 蔗糖进行生根诱导,pH5.80,光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期18h/d,温度28°C,一个月后统计生根率。
[0005]采用本发明制备的青皮竹生根率高,能耗少,品质高。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取青皮竹2节的嫩茎,去掉长约3mm的叶和顶芽,于20%的漂白液中冲洗15min,超净工作台上9%的次氯酸钙,并滴加两滴吐温,处理16min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的青皮竹带芽茎段,接入WPM+ZT3mg/L+NAA0.lmg/L+广大霉素15mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行芽的诱导,pH5.80,光照强度27001x,光期13h/d,温度27°C,诱导出来的腋芽放入 WPM+BAP0.3mg/L+Cadl.5mg/L+ 半胱氨酸 100mg/L+0.65% 琼脂 +30g/L 蔗糖培养基中进行丛生芽的增殖,pH5.80,光照35001x,光期15h/d,温度27°C,培养出来的丛生芽接入LS+NAA0.lmg/L+Cadlmg/L,附加0.65%琼脂,50g/L蔗糖进行生根诱导,pH5.80,光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期18h/d,温度28°C,一个月后统计生根率,生根率89%。
[0008]实施例2
取青皮竹2节的嫩茎,去掉长约3mm的叶和顶芽,于20%的漂白液中冲洗15min,超净工作台上9%的次氯酸钙,并滴加两滴吐温,处理16min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的青皮竹带芽茎段,接入WPM+ZT3mg/L+NAA0.lmg/L+广大霉素15mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行芽的诱导,pH5.80,光照强度27001x,光期13h/d,温度27°C,诱导出来的腋芽放入WPM+BAP0.4mg/L+Cad2mg/L+半胱氨酸100mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的增殖,pH5.80,光照35001x,光期15h/d,温度27°C,培养出来的丛生芽接入LS+NAA0.lmg/L+Cadlmg/L,附加0.65%琼脂,50g/L蔗糖进行生根诱导,ρΗ5.80,光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期18h/d,温度28°C,一个月后统计生根率,生根率95%。
[0009]实施例3
取青皮竹2节的嫩茎,去掉长约3mm的叶和顶芽,于20%的漂白液中冲洗15min,超净工作台上9%的次氯酸钙,并滴加两滴吐温,处理16min,无菌水冲洗5次,消毒处理过的青皮竹带芽茎段,接入WPM+ZT3mg/L+NAA0.lmg/L+广大霉素15mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行芽的诱导,pH5.80,光照强度27001x,光期13h/d,温度27°C,诱导出来的腋芽放入WPM+BAP0.5mg/L+Cad2mg/L+半胱氨酸100mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的增殖,pH5.80,光照35001x,光期15h/d,温度27°C,培养出来的丛生芽接入LS+NAA0.lmg/L+Cadl.2mg/L,附加0.65%琼脂,50g/L蔗糖进行生根诱导,pH5.80,光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期18h/d,温度28°C,一个月后统计生根率,生根率92%。
【权利要求】
1.一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导,其主要步骤如下: (1)取青皮竹带芽的茎段,对其进行消毒处理; (2)取步骤(I)消毒处理过的青皮竹带芽茎段,接入WPM+ZT3mg/L+NAA0.lmg/L+广大霉素15mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行芽的诱导,pH5.80,光照强度27001x,光期13h/d,温度 27 °C ; (3)取步骤(2)诱导出来的腋芽放入WPM+BAP0.3-0.5mg/L+Cadl.5_2mg/L+半胱氨酸100mg/L+0.65%琼脂+30g/L蔗糖培养基中进行丛生芽的增殖,pH5.80,光照35001x,光期15h/d,温度 27 0C ; (4)取步骤(3)培养出来的丛生芽接入LS+NAA0.lmg/L+Cadl-1.2mg/L,附加0.65%琼脂,50g/L蔗糖进行生根诱导,pH5.80,光照ΙΟΟΟΟΙχ,光期18h/d,温度28°C。
2.按照权利要求1所述的一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(I)中所述青皮竹无菌芽的获得为,取青皮竹2节的嫩茎,去掉长约3mm的叶和顶芽,于20%的漂白液中冲洗15min,超净工作台上9%的次氯酸I丐,并滴加两滴吐温,处理16min,无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种青皮竹组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(3)和(4)中芽的诱导和增殖中附加了 Cad,Cad对芽的诱导和增殖具有显著的作用。
【文档编号】A01H4/00GK104285794SQ201410540391
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司