一种天葵组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种天葵组织培养的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、愈伤组织的分化、生根诱导等步骤，本发明方法建立了天葵组织培养的繁殖方法，为天葵的快速繁殖提供了新的途径，繁殖系数大，生长速度快，遗传稳定性好。
【专利说明】 一种天葵组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天葵组织培养的快繁方法，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]天蔡，Semiaquilegiaadoxoides (DC.)别名:紫背天葵,雷丸草,夏无踪，小乌头等，毛茛科，多年生小草本。生海拔100-1050米间的疏林下、路旁或山谷地的较阴处。块根长1-2厘米，粗3-6毫米，外皮棕黑色。茎1-5条，高10-32厘米，直径1-2毫米，被稀疏的白色柔毛，分歧。分布中国西南、华东、东北等地。产本省云台山区及南部各地；分布河南南部及长江中、下游各省，南至广西北部，北至陕西南都。天葵块根入药，有清热解毒、消肿止痛、利尿等作用，治乳腺炎、扁桃体炎、痈肿、瘰疬、小便不利等症；全草又作土农药，目前尚未见其繁殖的研究报道。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种天葵组织培养的快繁方法，本发明方法建立了天葵组织培养的繁殖方法，为天葵的快速繁殖提供了新的途径，繁殖系数大，生长速度快，遗传稳定性好。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取天葵幼嫩的叶片，于10%的漂白粉中冲洗1min,超净工作台上25mg/L抗菌素处理15min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的天葵的叶片，接入HE+P-CPA0.15mg/L+6-BA2mg/L+四环素20mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，暗光照，温度25 V，诱导出来的愈伤组织接入 HE+ZT0.5mg/L+2ip0.5mg/L+ABAlmg/L+ 0.7% 琼脂 +35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化，PH5.8，光照30001x，光期12h/d，温度25°C，分化出来的芽苗接入l/2H+AgN033-5mg/L+IAA0.1-0.2mg/L+0.7%琼脂+25g/L蔗糖培养基中进行生根诱导，PH5.8，光照150001x，光期16h/d，温度25°C，一个月后统计生根率。
[0005]采用本发明制备的天葵生根率高，能耗少，品质高。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取天葵幼嫩的叶片，于10%的漂白粉中冲洗1min,超净工作台上25mg/L抗菌素处理15min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的天葵的叶片，接入HE+P-CPA0.15mg/L+6-BA2mg/L+四环素20mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，暗光照，温度25°C，诱导出来的愈伤组织接入HE+ZT0.5mg/L+2ip0.5mg/L+ABAlmg/L+0.7%琼脂 +35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，温度25°C，分化出来的芽苗接入l/2H+AgN033mg/L+IAA0.lmg/L+0.7%琼脂+25g/L蔗糖培养基中进行生根诱导，pH5.8，光照150001x，光期16h/d，温度25°C，一个月后统计生根率，生根率87%。
[0008]实施例2
取天葵幼嫩的叶片，于10%的漂白粉中冲洗1min,超净工作台上25mg/L抗菌素处理15min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的天葵的叶片，接入HE+P-CPA0.15mg/L+6-BA2mg/L+四环素20mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，暗光照，温度25°C，诱导出来的愈伤组织接入HE+ZT0.5mg/L+2ip0.5mg/L+ABAlmg/L+0.7%琼脂 +35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，温度25°C，分化出来的芽苗接入l/2H+AgN035mg/L+IAA0.2mg/L+0.7%琼脂+25g/L蔗糖培养基中进行生根诱导，PH5.8，光照150001x，光期16h/d，温度25°C，一个月后统计生根率，生根率89%。
[0009]实施例3
取天葵幼嫩的叶片，于10%的漂白粉中冲洗1min,超净工作台上25mg/L抗菌素处理15min,无菌水冲洗5次，消毒处理过的天葵的叶片，接入HE+P-CPA0.15mg/L +6-BA2mg/L+四环素20mg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，暗光照，温度250C，诱导出来的愈伤组织接入 HE+ZT0.5mg/L +2ip0.5mg/L+ABAlmg/L+0.7% 琼脂 +35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化，PH5.8，光照30001x，光期12h/d，温度25°C，分化出来的芽苗接入l/2H+AgN035mg/L+IAA0.lmg/L+0.7%琼脂+25g/L蔗糖培养基中进行生根诱导，PH5.8，光照150001x，光期16h/d，温度25°C，一个月后统计生根率，生根率90%。
【权利要求】
1.一种天葵组织培养的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、愈伤组织的分化、生根诱导，其主要步骤如下: (1)取天葵的幼嫩叶片进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的天葵的叶片，接入HE+P-CPA0.15mg/L+6-BA2mg/L+四环素20mg/L+ 0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.8，暗光照，温度25°C ； (3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织接入HE+ZT0.5mg/L+2ip0.5mg/L+ABAlmg/L+0.7%琼脂+35g/L蔗糖培养基中进行愈伤组织的分化，pH5.8，光照30001x，光期12h/d，温度25 0C ； (4)取步骤(3)分化出来的芽苗接入l/2H+AgN033-5mg/L+IAA0.1-0.2mg/L+0.7% 琼脂+25g/L蔗糖培养基中进行生根诱导，pH5.8，光照150001x，光期16h/d，温度25°C。
2.按照权利要求1所述的一种天葵组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中天葵无菌叶片的获得为，取天葵幼嫩的叶片，于10%的漂白粉中冲洗lOmin，超净工作台上25mg/L抗菌素处理15min,无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种天葵组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(2)培养基中加入了四环素可以防止内生细菌的产生。
【文档编号】A01H4/00GK104255506SQ201410540428
【公开日】2015年1月7日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司