一种越南槐组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种越南槐组织培养的快速繁殖方法，包括越南槐无菌芽的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽等步骤，本发明方法通过对各培养阶段最适培养条件的优化，完善了越南槐组织培养的快繁体系，为大规模栽培和开发利用提供技术支持。
【专利说明】一种越南槐组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及越南槐组织培养的快繁方法，属于植物【技术领域】。
【背景技术】
[0002]越南槐，tonkinensis Gagnep.,豆科,又称柔枝槐、广豆根,灌木,羽状复叶互生，柱头上簇生长柔毛。荚果连珠状。花期5-6月，果期7-8月。产广西、贵州、云南。生于亚热带或温带的石山或石灰岩山地的灌木林中；海拔1000-2000米。越南北部也有分布。国内分布于龄，桂，滇，主产广西。生于海拔1000-2000的石灰岩山地或岩石缝中。根较粗壮，含有苦参碱类生物碱，可入药，具有清热解毒，消炎止痛之效，繁殖方法主要是自然繁殖，野外采收。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种越南槐的快速繁殖方法，本发明方法通过对各培养阶段最适培养条件的优化，完善了越南槐组织培养的快繁体系，为大规模栽培和开利用提供技术支持。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取越南槐带芽茎段，毛刷去除表面污物，流水冲洗3h，超净工作台上70%的酒精处理22s，无菌水冲洗3次，0.2%的次氯酸钠处理13min，无菌水冲洗4次，消毒处理过的越南槐带芽茎段接入HE+6-BA5mg/L+2，4-D0.02mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照22001x，光照时间13h/d，温度25°C，诱导出来的腋芽放入培养基HE+6-BA1.5mg/L+2ip0.5mg/L进行继代培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光照时间15h/d，温度25°C，增殖后的芽苗接入培养基1/4MS+IBA0.7mg/L+GA3lmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5.8g/L，Ph6.0，光照120001x，光照时间18h/d，温度25°C，以每丛6株为单位，洗净培养基，在0.5%的高锰酸钾溶液中浸蘸20s，移栽到盛有用0.5%的高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中，基质为田园土:蛭石=2:1，温度25°C，空气相对湿度82%，每天喷水3次。幼苗茎段的诱导中附加了赤霉素，可以促进茎段的诱导，一个月后统计成活率。
[0005]采用本发明制备的越南槐生根率高，周期短，产量大，污染小，利于大规模种植。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取越南槐带芽茎段，毛刷去除表面污物，流水冲洗3h，超净工作台上70%的酒精处理22s，无菌水冲洗3次，0.2%的次氯酸钠处理13min，无菌水冲洗4次，消毒处理过的越南槐带芽茎段接入HE+6-BA5mg/L+2，4-D0.02mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照22001x，光照时间13h/d，温度25°C，诱导出来的腋芽放入培养基HE+6-BA1.5mg/L+2ip0.5mg/L进行继代培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光照时间15h/d，温度25°C，增殖后的芽苗接入培养基1/4MS+IBA0.7mg/L+GA3lmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5.8g/L，Ph6.0，光照120001x，光照时间18h/d，温度25°C，以每丛6株为单位，洗净培养基，在0.5%的高锰酸钾溶液中浸蘸20s，移栽到盛有用0.5%的高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中，基质为田园土:蛭石=2:1，温度25°C，空气相对湿度82%，每天喷水3次。幼苗茎段的诱导中附加了赤霉素，可以促进茎段的诱导，一个月后统计成活率，成活率89%。
[0008]实施例2
取越南槐带芽茎段，毛刷去除表面污物，流水冲洗3h，超净工作台上70%的酒精处理22s，无菌水冲洗3次，0.2%的次氯酸钠处理13min，无菌水冲洗4次，消毒处理过的越南槐带芽茎段接入HE+6-BA5mg/L+2，4-D0.02mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照22001x，光照时间13h/d，温度25°C，诱导出来的腋芽放入培养基HE+6-BA1.5mg/L+2ip0.5mg/L进行继代培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光照时间15h/d，温度25°C，增殖后的芽苗接入培养基1/4MS+IBA0.7mg/L+GA3lmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5.8g/L，Ph6.0，光照120001x，光照时间18h/d，温度25°C，以每丛6株为单位，洗净培养基，在0.5%的高锰酸钾溶液中浸蘸20s，移栽到盛有用0.5%的高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中，基质为田园土:蛭石=2:1，温度25V，空气相对湿度82%，每天喷水3次。幼苗茎段的诱导中附加了赤霉素，可以促进茎段的诱导，一个月后统计成活率，成活率87%。
[0009]实施例3
取越南槐带芽茎段，毛刷去除表面污物，流水冲洗3h，超净工作台上70%的酒精处理22s，无菌水冲洗3次，0.2%的次氯酸钠处理13min，无菌水冲洗4次，消毒处理过的越南槐带芽茎段接入HE+6-BA5mg/L+2，4-D0.02mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照22001x，光照时间13h/d，温度25°C，诱导出来的腋芽放入培养基HE+6-BA1.5mg/L+2ip0.5mg/L进行继代培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照30001x，光照时间15h/d，温度25°C，增殖后的芽苗接入培养基1/4MS+IBA0.7mg/L+GA3lmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5.8g/L，Ph6.0，光照120001x，光照时间18h/d，温度25°C，以每丛6株为单位，洗净培养基，在0.5%的高锰酸钾溶液中浸蘸20s，移栽到盛有用0.5%的高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中，基质为田园土:蛭石=2:1，温度25°C，空气相对湿度82%，每天喷水3次。幼苗茎段的诱导中附加了赤霉素，可以促进茎段的诱导，一个月后统计成活率，成活率93%。
【权利要求】
1.一种越南槐组织培养的快速繁殖方法，包括越南槐无菌芽的获得、芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导，炼苗移栽，其主要步骤如下: (1)取越南槐带芽茎段，对其进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的越南槐带芽茎段接入HE+6-BA5mg/L+2，4-D0.02mg/L培养基中进行腋芽的诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照22001x，光照时间13h/d，温度25 °C ； (3)取步骤(2)诱导出来的腋芽放入培养基HE+6-BA1.5mg/L+2ip0.5mg/L进行继代培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，ρΗ5.8，光照30001χ，光照时间15h/d，温度25°C ； (4)取步骤(3)增殖后的芽苗接入培养基1/4MS+IBA0.7mg/L+GA3lmg/L中进行生根诱导，附加蔗糖20g/L，琼脂5.8g/L，Ph6.0，光照120001x，光照时间18h/d，温度25°C ； (5)取取步骤(4)生根后的试管苗进行炼苗移栽。
2.按照权利要求1所述的一种越南槐组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(O中所述越南槐无菌带芽茎段的获得为，取越南槐带芽茎段，毛刷去除表面污物，流水冲洗3h，超净工作台上70%的酒精处理22s，无菌水冲洗3次，0.2%的次氯酸钠处理13min，无菌水冲洗4次。
3.按照权利要求1所述的一种越南槐组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)中越南槐炼苗移栽的方法为以每丛6株为单位，洗净培养基，在0.5%的高锰酸钾溶液中浸蘸20s，移栽到盛有用0.5%的高锰酸钾溶液消毒的营养土的营养钵中，基质为田园土:蛭石=2:1，温度25 °C，空气相对湿度82%，每天喷水3次。
4.幼苗茎段的诱导中附加了赤霉素，可以促进茎段的诱导。
【文档编号】A01H4/00GK104221871SQ201410540435
【公开日】2014年12月24日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司