一种云木香组织培养的快速繁殖方法
【专利摘要】本发明研究了一种云木香组织培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、生根诱导等步骤，本发明方法建立了云木香组培微繁体系，操作简单易控，生产成本低，不受时间和空间的限制，产量大，污染小，便于大规模推广种植。
【专利说明】一种云木香组织培养的快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及云木香组织培养的快繁方法，属于植物栽培【技术领域】。
【背景技术】
[0002]云木香，Saussurea costus,菊科,又名广木香、木香、蜜香、青木香、五木香、南木香，多年生草本植物，生长于较高的山地。原产印度，分布于中国陕西、甘肃、湖北、湖南、广东、广西、四川、云南、西藏等地有引种栽培，以云南西北部种植较多，产量较大。栽培于海拔2500-4000m的高山地区，在凉爽的平原和丘陵地区也可生长。喜冷凉湿润，耐寒、耐旱，怕高温和强光，幼苗期怕直射光。产区在海拔800-2500m山区的阴坡地，选朝北或东北坡向，坡向30°?35° ,以土层深厚、疏松肥沃、富含腐殖质、排水良，pH6.5-7.0的砂质壤土和壤土栽培为宜，低洼易涝地长期积水会引起烂根。幼苗期生长缓慢，可与玉米等作物套、间作，又可遮阳。用种子繁殖。可做药用，具有抑菌护肝，行气止痛，理气疏肝，健脾消滞，抗菌消炎，降压等作用，主要采用弓I种野外栽培。
【发明内容】
[0003]本发明所要解决的技术问题是提供一种云木香组织培养的快繁方法，本发明方法建立了云木香组培微繁体系，操作简单易控，生产成本低，不受时间和空间的限制，产量大，污染小，便于大规模推广种植。
[0004]本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的:
取云木香幼嫩的叶片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水冲洗15min,超净工作台上2%溴水处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒处理过的云木香叶片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸银2mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中愈伤组织的诱导，ρΗ5.9，光照强度5001χ,光期6h/d，温度25 °C，诱导出来的愈伤组织放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫苏糖醇100_150mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中进行愈伤组织的分化，PH5.9，光照 35001x，温度 25°C，分化后的芽苗接入 1/2MS+PP3331-1.5mg/L+0.6%琼脂+18g/L蔗糖中进行生根诱导，pH5.9，光照160001x，光期18h/d，温度25°C，45天后统计生根率。
[0005]采用本发明制备的云木香生根率高，能耗少，品质高。
[0006]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0007]实施例1
取云木香幼嫩的叶片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水冲洗15min,超净工作台上2%溴水处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒处理过的云木香叶片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸银2mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中愈伤组织的诱导，ρΗ5.9，光照强度5001χ,光期6h/d，温度25 °C，诱导出来的愈伤组织放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫苏糖醇100mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中进行愈伤组织的分化，pH5.9，光照35001x，温度25°C，分化后的芽苗接入l/2MS+PP3331mg/L+0.6%琼脂+18g/L蔗糖中进行生根诱导，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，温度25°C，45天后统计生根率，生根率92%。
[0008]实施例2
取云木香幼嫩的叶片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水冲洗15min,超净工作台上2%溴水处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒处理过的云木香叶片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸银2mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中愈伤组织的诱导，ρΗ5.9，光照强度5001χ,光期6h/d，温度25 °C，诱导出来的愈伤组织放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫苏糖醇150mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中进行愈伤组织的分化，pH5.9，光照35001x，温度25°C，分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331.5mg/L+0.6%琼脂+18g/L蔗糖中进行生根诱导，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，温度25°C，45天后统计生根率，生根率93%。
[0009]实施例3
取云木香幼嫩的叶片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min,流水冲洗15min,超净工作台上2%溴水处理lOmin，无菌水冲洗5次，消毒处理过的云木香叶片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸银2mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中愈伤组织的诱导，ρΗ5.9，光照强度5001χ,光期6h/d，温度25 °C，诱导出来的愈伤组织放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫苏糖醇100mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中进行愈伤组织的分化，pH5.9，光照35001x，温度25°C，分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331.5mg/L+0.6%琼脂+18g/L蔗糖中进行生根诱导，PH5.9，光照160001x，光期18h/d，温度25°C，45天后统计生根率，生根率95%。
【权利要求】
1.一种云木香组织培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、生根诱导，其主要步骤如下: (1)取幼嫩的叶片进行消毒处理； (2)取步骤(I)消毒处理过的云木香叶片，接入KM-8P+N0A0.2mg/L+KT3mg/L+硝酸银2mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中愈伤组织的诱导，pH5.9，光照强度5001x，光期6h/d，温度25 0C ； (3 )取步骤(2 )诱导出来的愈伤组织放入KM-8P+IAA0.lmg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L+ 二硫苏糖醇100-150mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖中进行愈伤组织的分化，pH5.9，光照35001x，温度 25 0C ； (4)取步骤(3)分化后的芽苗接入1/2MS+PP3331-1.5mg/L+0.6%琼脂+18g/L蔗糖中进行生根诱导，ρΗ5.9，光照160001χ，光期18h/d，温度25。。。
2.按照权利要求1所述的一种云木香组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(I)中所述云木香无菌叶片的获得为，取云木香幼嫩的叶片，在20mg/L抗菌素中浸泡15min，流水冲洗15min，超净工作台上2%溴水处理lOmin，无菌水冲洗5次。
3.按照权利要求1所述的一种云木香组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(3)中诱导愈伤组织的分化中加入了二硫苏糖醇可以促进细胞的分裂和分化。
4.按照权利要求1所述的一种云木香组织培养的快速繁殖方法，其特征在于:步骤(4)生根诱导加入了少量的PP333，对生根具有显著的促进作用。
【文档编号】A01H4/00GK104285795SQ201410540446
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月14日 优先权日:2014年10月14日
【发明者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司