银杏观赏品种定芽增殖方法
【专利摘要】本发明公开了一种银杏良种定芽增殖的方法。本发明采用组织培养的方法对银杏优良品种进行定芽增殖，以提高银杏良种繁殖速率，满足生产需求。本方法利用银杏腋芽处容易萌发新芽的特点，以带腋芽的幼嫩茎段作为外植体，通过组织培养的方法，促进腋芽萌发，从而达到银杏良种定芽增殖的目的，而且既保持了母本的优良性状，又提供大量具有一定长度和粗度及木质化程度的有效嫩稍，为微体扦插提供材料。本方法对银杏定芽进行增殖，操作简单、可行。
【专利说明】银杏观赏品种定芽增殖方法
【技术领域】
[0001]本发明属于树木生长发育及繁殖的【技术领域】，特别是一种关于银杏观赏品种定芽增殖方法。
【背景技术】
[0002]银杏(Ginkgo biloba L.)是第四纪冰川的孑遗植物，是叶果材兼优的珍稀树种。中国作为世界上银杏第一大国，拥有世界银杏种质资源的90%以上，在我国可考证的栽培历史达千年之久，具有较高的经济、生态和文化价值。观赏银杏品种因具有优良的遗传性状而更具发展潜力。目前，银杏苗木培育方式主要有播种、扦插、嫁接、组培等方式，而这些方式在实际生产中主要存在以下突出问题:(I)播种育苗时，子代不能稳定的遗传母本的优良性状；扦插繁殖和嫁接繁殖是较稳定快速的繁殖方法，但扦插或嫁接后往往会出现位置效应。(3)组织培养的繁殖方法具有遗传稳定性高、繁殖速度快的特点，但银杏作为古老的孑遗植物，遗传特性较原始，组培分化非常困难，生长速度慢，繁殖系数低。
[0003]本方法利用银杏腋芽处容易萌发新芽的特点，以带腋芽的幼嫩茎段作为外植体，通过组织培养的方法，促进腋芽萌发，从而达到银杏良种定芽增殖的目的，而且既保持了母本的优良性状，又提供大量具有一定长度和粗度及木质化程度的有效嫩稍，为微体扦插提供材料。目前还未见银杏良种定芽增殖方法的报道，本发明是在这样的技术背景下提出的。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是，针对银杏常规育苗繁殖系数低，遗传稳定性差，分化困难的现象。为了解决上述问题，本发明采用了以下技术方案:
[0005](I)选择生长势良好，性状明显的银杏观赏品种作为定芽增殖的对象。
[0006](2)茎段选取时间:银杏苗木抽生新枝后，长约1cm时，即可进行，但最佳时间为4月上中旬。
[0007](3)茎段的处理:用肥皂水擦洗茎段，在无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，带吐温20的0.1 %氯化汞消毒8-10min，无菌水冲洗3_5次，然后用无菌的滤纸吸去茎段表面的水分，剪成l_2cm长,留1-2个腋芽或顶芽。
[0008](4)初代培养:将处理好的茎段接种在MS+0.1mgL-1 NAA+1.0mgL^1 ΒΑ+0.2 %AC+25gr1蔗糖+Tgr1琼脂的培养基上。
[0009](5)继代培养:将初代培养诱导产生的茎段接种在MS+0.1mgI/1 NAA+1.SmgL^1ΒΑ+0.2% AC+25gL.1蔗糖+781^琼脂的培养基上，进行增殖培养。
[0010](6)培养条件:将接种好的茎段置于培养温度25±2°C，光照强度20001x，光照时间12h.Cf1的培养室培养，培养周期40-50d。
[0011]本发明的有益效果是:
[0012](I)选择生长势良好，性状明显的银杏良种作为定芽增殖的对象，确保银杏良种优良性状的稳定性。
[0013](2)茎段选取时间:春季银杏苗木抽生新枝后即可进行，但最佳时间为4月上中旬，这段时间的嫩茎生长旺盛，且不易存在内生菌影响培养。
[0014](3)茎段的处理:茎段经冲洗、消毒后，剪成l-2cm长，留1-2个腋芽或顶芽，茎段冲洗消毒彻底能降低培养的污染率。
[0015](4)初代培养:将处理好的茎段接种在MS+0.1mgr1NAA+1.0mgL^BA+0.2 %AC+25gr1蔗糖+Tgr1琼脂培养基上，NAA和BA的用量和配比能有效的促进芽的萌发，AC起到壮苗的作用。
[0016](5)继代培养:接种在该培养基上，有助于茎段增殖。
[0017](6)培养:将接种好的茎段置于培养温度25±2°C，光照强度20001x，光照时间12h.d-1的培养室培养，培养周期40-50d，此培养条件适合银杏生长，且由于银杏生长缓慢，所以培养周期应稍长。
[0018]利用上述方法对银杏良种进行定芽增殖，增殖率高，速度快，操作简便，成本低廉，提闻了良种的繁殖率和广量。
【具体实施方式】
[0019]实施例1
[0020]应用本方法在山东省泰安市山东农业大学南校区组织培养实验室中进行，利用银杏腋芽处容易萌发新芽的特点，以带腋芽的幼嫩茎段作为外植体，通过组织培养的方法，促进腋芽萌发，从而达到银杏良种定芽增殖的目的。银杏良种定芽增殖方法实施步骤如下:
[0021]1.定芽增殖良种的选择
[0022]选择生长势良好，性状明显的银杏良种作为定芽增殖的对象。
[0023]2.茎段选取时间
[0024]4月上中旬，选取银杏抽生新枝，长约10cm。
[0025]3.茎段的处理
[0026]茎段经冲洗、消毒后，剪成l-2cm长，留1_2个腋芽或顶芽。
[0027]4.培养的选择
[0028]将处理好的茎段接种在MS+0.1mgL^NAA+1.0mgL^BA+0.2 % AC+25gr1 蔗糖 +TgL4琼脂培养基上。
[0029]5.继代培养
[0030]将初代培养诱导产生的茎段接种在MS+0.1rngL-1 NAA+1.5mgL_1 BA+0.2 %AC+25gL-1蔗糖+7SL-1琼脂的培养基上，进行增殖培养。
[0031 ] 6.培养
[0032]将接种好的茎段置于培养温度25±2°C，光照强度20001x，光照时间12h ^cT1的培养室培养，培养周期40-50d。
[0033]本发明不局限于以上实施方式，只要是在银杏组织培养中上采取了定芽增殖的方法，无论是否针对良种进行，都将落入本发明的保护范围内。
【权利要求】
1.一种银杏良种定芽增殖的方法，该方法包括以下步骤: (1)选择生长势良好，性状明显的银杏观赏品种作为定芽增殖的对象； (2)茎段选取时间:银杏苗木抽生新枝后，长约1cm时，即可进行，但最佳时间为4月上中旬； (3)茎段的处理:用肥皂水擦洗茎段，在无菌操作台下依次用70%酒精消毒30s，带吐温20的0.1 %氯化萊消毒8-10min,无菌水冲洗3-5次,然后用无菌的滤纸吸去莖段表面的水分，剪成l_2cm长,留1-2个腋芽或顶芽； (4)初代培养:将处理好的茎段接种在MS+0.1mg^1NAA+1.0mgL^BA+0.2% AC+25gL.1蔗糖+Tgr1琼脂的培养基上； (5)继代培养:将初代培养诱导产生的茎段接种在MS+0.1mgL^NAA+1.SmgL^BA+0.2%AC+25gL-1蔗糖+7SL-1琼脂的培养基上，进行增殖培养； (6)培养条件:将接种好的茎段置于培养温度25±2°C，光照强度20001x，光照时间12h.Cf1的培养室培养，培养周期40-50d。
2.根据权利要求1所述的一种银杏良种定芽增殖方法，其特征在于，步骤(4)(5)所描述的培养基的选择。
3.根据权利要求1所述的一种银杏良种定芽增殖方法，其特征在于，步骤(6)所描述的培养周期的选择。
【文档编号】A01H4/00GK104285801SQ201410550664
【公开日】2015年1月21日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日
【发明者】邢世岩, 王萱, 李继红, 吴岐奎, 刘晓静, 孙立民 申请人:山东农业大学