南美白对虾孵化专用保护液体制剂的研制的制作方法
【专利摘要】本发明涉及南美白对虾孵化专用保护液体制剂，所述的孵化专用保护液体制剂中包含保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌、胃蛋白酶和类胰蛋白酶。本发明的南美白对虾孵化专用保护液体制剂可以通过简单的制备工艺制得，在南美白对虾孵化过程中添加本发明的孵化专用保护液体制剂不仅能够提高孵化率，还能够提高幼体的存活率。
CCTCC NO: M2013240
20130602
【专利说明】南美白对虾孵化专用保护液体制剂的研制
【技术领域】
[0001] 本发明涉及饲料【技术领域】，具体地说，是南美白对虾孵化专用保护液体制剂。
【背景技术】
[0002] 南美白对虫下（Litopenaeus Vannamei Boone, 1931)，又称白肢虫下、白对虫下、万氏白 虾、凡纳对虾等，其外形形态与中国对虾和墨吉对虾相似，最大体长可达23cm，甲壳较薄，正 常体色为青蓝色，全身不具斑纹；步足呈白垩色，故称白脚虾或白肢虾。该虾原产于中、南美 太平洋沿岸水域，以厄瓜多尔（Ecuador)沿海的分布最为集中。上世纪七十年代初厄瓜多 尔率先试养，一举成功。其后许多养虾国家或地区相继引进，南美白对虾养殖业发展迅速。 南美白虾以其适温、适盐性强、抗病力强、离水耐受性强以及杂食习性、生长迅速等显著优 点，成为当今世界养殖产量最高的三大优良大型虾类养殖种类之一。
[0003] 经过几十年的发展，南美白对虾的养殖已经成为我国水产养殖业的支柱产业之 一，我国对南美白对虾养殖的研究也取得了诸多的进步。现在人们逐渐认识到，南美白对虾 虾苗培育对于发展南美白对虾养殖业越来越重要。在对虾人工育苗生产中，对虾受精卵的 孵化是关系到生产成败的关键步骤。
[0004] 中国专利文献CN101904311A公开了一种对虾类幼体孵化的方法，包括以下步骤： 一、对虾孵化装置的设计，二、孵化水体的准备，三、虾卵受精和孵化，四、幼体收集和洗涤； 实现以上所述的对虾类幼体孵化的方法所采用的孵化装置，包括孵化桶、孵化桶盖、照明装 置、收集洗涤装置，孵化桶和孵化桶盖组成一体，孵化桶盖上设有透光孔和连有微孔塞的充 气管，照明装置放置在透光孔的上方，利用对虾的趋光性选出活力强的虾类幼体并除去活 力弱的虾类幼体以及死卵。中国专利文献CN103931955A公开了一种南美白对虾幼苗饲料， 按以下重量份数的原料组成：虾片55-75份、破壁酵母2-3份、海洋红酵母2-3份、虾青素 0. 1-0. 5份、维生素 D3O. 3-0. 8份、可溶性钙盐2-4份、粘合剂3-5份、崩解剂8-10份及吸湿 剂3-5份。但是关于本发明的南美白对虾孵化专用保护液体制剂目前还未见报道。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种南美白对虾孵化专用保护液体 制剂。
[0006] 为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：一种南美白对虾孵化专用保护液体 制剂，所述的孵化专用保护液体制剂中包含短小芽孢杆菌和蛋白酶。
[0007] 所述的短小芽孢杆菌是保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌。
[0008] 所述的蛋白酶为胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
[0009] 所述的短小芽孢杆菌是保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌，所述的蛋 白酶是胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
[0010] 所述的孵化专用保护液体制剂是通过以下方法制备所得：先通过液体发酵的方法 制备短小芽孢杆菌的浓缩液，然后往所述的浓缩液中加入胃蛋白酶和类胰蛋白酶。 toon] 所述的孵化专用保护液体制剂是通过以下方法制备所得：将短小芽抱杆菌菌株 按斜面、液体种子、液体发酵的顺序培养，斜面和种子培养基为营养琼脂培养基或肉汤培养 基；发酵培养基配方：豆饼粉3 %，淀粉1.5 %，玉米浆1 %，葡萄糖0.5%，（NH4)2SO4O. 1%， NH4Cl 0· 1 %，KH2PO4O. 05 %，NaH2PO4O. 5 %，MgSO4O. 05 %，MnSO4O. 05 %，发酵培养条件为 28-37°C，通风培养36-48h，活菌数> 109cfu/ml ;向短小芽孢杆菌浓缩液中添加胃蛋白酶和 类胰蛋白酶，每IOml短小芽孢杆菌浓缩液中添加胃蛋白酶、类胰蛋白酶各lg。
[0012] 所述的孵化专用保护液体制剂应用于南美白对虾孵化。
[0013] 本发明优点在于：
[0014] 本发明的南美白对虾孵化专用保护液体制剂可以通过简单的制备工艺制得，制备 的孵化专用保护液体制剂不仅可以提高孵化过程的孵化率，还能够提高孵化的幼体的存活 率。
【具体实施方式】
[0015] 下面结合实施例对本发明提供的【具体实施方式】作详细说明。
[0016] 本发明的南美白对虾孵化专用保护液体制剂是通过短小芽孢杆菌和蛋白酶组合 使用来实现的，本发明实施例优选的短小芽孢杆菌是保藏编号为CCTCC M 2013240的短小 芽孢杆菌；蛋白酶优选的是胃蛋白酶和类胰蛋白酶。保藏编号为CCTCC M 2013240的短小 芽孢杆菌的分类命名：短小芽孢杆菌（Bacillus pumilus)，保藏单位：中国典型培养物中 心，地址：中国湖北省武汉市武汉大学，保藏日期：2013年06月02日，保藏编号为CCTCC N0:M2013240。
[0017] 实施例1
[0018] 将短小芽抱杆菌菌株按斜面、液体种子、液体发酵的顺序培养，斜面和种子培养基 为常规的营养琼脂培养基或肉汤培养基；发酵培养基配方（W/V):豆饼粉3%，淀粉1. 5%， 玉米浆 1%，葡萄糖 0.5%，（NH4) 2S040. 1 %，NH4Cl 0· 1 %，KH2PO4O. 05 %，NaH2PO4O. 5 %， MgSO4O. 05%，MnSO4O. 05 %，发酵培养条件为28-37 °C，通风培养36-48h，活菌数彡IO9Cfu/ ml 〇
[0019] 向短小芽孢杆菌浓缩液中添加胃蛋白酶和类胰蛋白酶，每IOml短小芽孢杆菌浓 缩液中添加胃蛋白酶、类胰蛋白酶各lg。从而制得本发明的南美白对虾孵化专用保护液体 制剂。
[0020] 实施例2
[0021] 常规方法进行南美白对虾亲虾的培育，行单侧眼柄切除手术，待雌虾发育 成熟后，精心挑选肢全体健的雄虾与雌虾进行交配。具体方法是将成熟雌虾转移到 0. 60mX0. 60mX0. 60m的水族箱中，每只箱中放两只雌虾和两只雄虾，一旦发现雌虾发生交 配，将其移入单独的产卵箱。没有发生交配的雌虾放回原来的水族箱。待产卵结束后，将雌 虾移出产卵箱，以免造成卵的损失。产卵箱分为对照组和实验组，对照组的产卵箱为常规的 产卵箱，实验组的产卵箱添加了实施例1的南美白对虾孵化专用保护液体制剂，添加量为 孵化专用保护液体制剂：水体的体积比为1:100。受精卵和无节幼体的计数采用50ml烧杯， 每次计3杯，取平均数，再根据总水体换算出实际产卵量或无节幼体的数量。
[0022] 将对照组和实验组的无节幼体分别在水族箱中培育，密度为100个/L。在幼体培 育过程中，用测定产卵量的方法来测定幼体各个阶段的成活率。从无节幼体到蚤状幼体投 喂单胞藻，从蚤状幼体开始投喂卤虫无节幼体。对照组和实验组的幼体培育条件相同。
[0023] 具体实验结果如表1所示：
[0024] 表1孵化实验结果
[0025]
【权利要求】
1. 一种南美白对虾孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的孵化专用保护液体制 剂中包含短小芽孢杆菌和蛋白酶。
2. 根据权利要求1所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的短小芽孢杆菌 是保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌。
3. 根据权利要求1所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的蛋白酶为胃蛋 白酶和类胰蛋白酶。
4. 根据权利要求1所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的短小芽孢杆菌 是保藏编号为CCTCC M 2013240的短小芽孢杆菌，所述的蛋白酶是胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
5. 根据权利要求4所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的孵化专用保护 液体制剂是通过以下方法制备所得：先通过液体发酵的方法制备短小芽孢杆菌的浓缩液， 然后往所述的浓缩液中加入胃蛋白酶和类胰蛋白酶。
6. 根据权利要求1所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的孵化专用保护 液体制剂是通过以下方法制备所得：将短小芽抱杆菌菌株按斜面、液体种子、液体发酵的 顺序培养，斜面和种子培养基为营养琼脂培养基或肉汤培养基；发酵培养基配方：豆饼粉 3 %，淀粉 1. 5 %，玉米浆 1 %，葡萄糖 0? 5 %，（NH4) 2S040. 1 %，NH4C1 0? 1 %，KH2P040 . 05 %， NaH2P040. 5%，MgS040 . 05%，MnS040. 05%，发酵培养条件为 28-37°C，通风培养 36-48h，活菌 数> 109cfu/ml ;向短小芽孢杆菌浓缩液中添加胃蛋白酶和类胰蛋白酶，每10ml短小芽孢 杆菌浓缩液中添加胃蛋白酶、类胰蛋白酶各lg。
7. 根据权利要求1-6任一所述的孵化专用保护液体制剂，其特征在于，所述的孵化专 用保护液体制剂应用于南美白对虾孵化。
【文档编号】A23K1/16GK104431524SQ201410751340
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年12月10日 优先权日:2014年12月10日
【发明者】宋增福, 许维素 申请人:苏州埃瑞特生物技术有限公司