本发明涉及一种提高植物茎尖包埋脱水法超低温保存效果的方法，确切地说是一种提高早梨茎尖包埋脱水法超低温保存效果的方法。
背景技术：
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我国梨树种植历史悠久，且其具有较强的适应环境能力，目前长江南北均有许多适应当地环境的地方特优品种。早熟梨树品种俗称南方早熟梨，其梨果基本是在6月到8月之间成熟，较北方梨的成熟期显著提早，填补了夏天新鲜水果的供给不足，深受广大百姓欢迎和喜爱。江西省上饶县花厅镇和田墩镇气候宜人，雨量充足，具有得天独厚的条件，两个乡镇出产的早熟梨品质优异、口味独特、爽口多汁、营养全面，2012年被国家农业部正式授予“国家农产品地理标志”称号。上饶早梨不仅供作新鲜水果食用，还可在医药上用作退烧剂，具有生津润肺、清热化痰、解热消暑等功效。上饶早梨主要种植地为上饶县花厅镇和田墩镇。经过三百多年的栽培，两个乡镇已经培育出“六月雪”、“黄皮消”两个特优地方品种。这两个上饶早梨特优地方品种目前基本是以农家种存在的，这些农家种与花厅镇和田墩镇的环境和病虫害协同进化过程中，形成了特异且优良的能适应当地环境的性状，且梨果营养保健成分十分丰富，是江西早熟梨难得的天然基因库。超低温保存是目前植物种质资源有效、安全、稳定、经济、长期保存的方法。包埋脱水法是将样品用海藻酸钙包埋和脱水后，投入液氮中保存的方法。该方法容易掌握，可缓和脱水过程，简化脱水程序，减少环境因子的影响，而且一次能处理较多的材料，在植物种质资源的保存上具有较大的发展前景。但包埋脱水法超低温保存也存在成活率低、保存效果不佳等问题。针对这些问题，本发明开发了一种提高早梨茎尖包埋脱水法超低温保存效果的方法，可为上饶早梨种质资源的长期保存提供技术基础。
技术实现要素：
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本发明的目的是提供一种成活率高、茎尖易再生的提高早梨茎尖包埋脱水法超低温保存效果的方法。实现本发明目的的技术方案是，一种提高早梨茎尖包埋脱水法超低温保存效果的方法，其特征在于有以下步骤：(1)在超净工作台内，切取早梨茎尖并将其接种于液体培养基一：ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+3％(w/v)海藻酸钠+0.3m蔗糖；(2)吸取茎尖转移到液体培养基二：0.4m蔗糖+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+0.1mcacl2，进行常规包埋；(3)将包埋珠转移到液体培养基三：ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+0.5m蔗糖，进行常规预培养；(4)经空气或硅胶常规脱水、液氮常规保存和常规化冻后，将包埋珠转移到固体再生培养基四：ms+1-2mg/l噻苯隆+0.1-0.3mg/lnaa+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，可显著提高茎尖的冻后成活率。
具体实施方式：
结合下述实施例对本发明作进一步说明：
(1)第一次处理
在超净工作台内，切取早梨茎尖并将其接种于液体培养基一：ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+3％(w/v)海藻酸钠+0.3m蔗糖；
(2)第二次处理
吸取茎尖转移到液体培养基二：0.4m蔗糖+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+0.1mcacl2，进行常规包埋；
(3)第三次处理
将包埋珠转移到液体培养基三：ms+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+0.5m蔗糖，进行常规预培养；
(4)第四次处理
经空气或硅胶常规脱水、液氮常规保存和常规化冻后，将包埋珠转移到固体再生培养基四：ms+1-2mg/l噻苯隆+0.1-0.3mg/lnaa+0.3-0.5g/l碳纳米管+0.3-0.5g/l石墨烯量子点+30g/l蔗糖+7.5g/l琼脂，接种后将材料放入培养室进行常规条件培养，可显著提高茎尖的冻后成活率。