1.一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,包括ms基本培养基、fpx、cuso4。
2.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,所述fpx的浓度为45-100um。
3.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,所述cuso4的浓度为0.6mg/l。
4.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,所述45-100umfpx的配制方法为:388.84mg溶于5mldmso溶液,搅拌溶解后,用蒸馏水补至10ml,得到100mmfpx母液,取450ul-1ml的100mmfpx母液加到1l培养基中得到45-100um的fpx。
5.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,所述0.6mg/mlcuso4的配制方法为:将50mgcuso4·5h2o溶解到50ml的蒸馏水中,得到1mg/mlcuso4,4℃黑暗保存,取600ul1mg/mlcuso4到1l的培养基中配制成终浓度为0.6mg/l的cuso4。
6.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的培养基,其特征在于,所述培养基的配制方法:4.43gms粉末和30g蔗糖溶于1l去离子水,添加3gphytagel,搅拌均匀,用1mkoh调整ph为5.8;121℃高压灭菌15min;灭菌完成后,取出培养基,待培养基冷却后,添加45-100umfpx,摇匀后,无菌条件下分装培养基至培养皿中,每个培养皿25ml培养基,培养基凝固后,封口膜包裹培养皿,4℃黑暗保存。
7.一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)超净工作台中,用镊子去除二穗短柄草种子上的外稃,置于50ml离心管中,用20ml75%乙醇将种子表面灭菌30s,无菌去离子水冲洗三次,再加入20ml的6.25%次氯酸钠溶液,上下颠倒混匀,消毒15分钟,用无菌去离子水冲洗3-6次,得到灭菌后的种子;
(2)将灭菌后的种子用外科手术刀切割,切除部分胚乳,保留切割后含胚的部分,将切割后的种子置于无菌滤纸上吸去表面水分;
(3)将吸干表面水分的种子放置到培养基上,胚朝上,培养皿置于黑暗条件下培养,培养三天后即出现愈伤组织。
8.如权利要求1所述的一种快速诱导二穗短柄草种子产生愈伤组织的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述培养条件为温度26-30℃,湿度50%-70%。