一种脂肪组织STAU1特异性敲除小鼠模型的建立方法

本发明属于生物，具体涉及一种脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法。

背景技术：

1、肥胖已成为一种全球性慢性代谢性疾病，可导致2型糖尿病、心脑血管疾病、脂肪肝、癌症等并发症，严重危害人类健康。肥胖的本质是机体能量摄入超过了能量消耗，多余的能量以甘油三酯的形式储存于体内。脂肪组织是肥胖的直接效应器官，在动物体内包括白色脂肪组织(whiteadiposetissue，wat)和棕色脂肪组织(brownadiposetissue，bat)两大类。其中，wat的主要功能是储存能量，同时其作为体内最大的内分泌器官，分泌多种具有生物学功能的脂肪因子，对糖脂代谢的调控起关键作用。棕色脂肪组织(bat)是耗能组织，bat主要由棕色脂肪细胞组成。

2、脂肪细胞分化异常是肥胖的病理生理学基础，在此过程中涉及许多转录因子，rna结合蛋白在转录后水平也调控脂肪细胞的分化，其中stau1促进脂肪细胞分化，参与脂肪组织的糖脂代谢调解，stau1敲除后，大量糖脂代谢相关基因表达发生变化，提示stau1能够在转录后水平调节糖脂代谢相关基因的表达。利用全身敲除小鼠无法阐明stau1在代谢中的具体机制，需建立组织特异性基因敲除小鼠。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法，为阐明stau1在脂肪组织介导的代谢异常中的作用及机制提供有力工具。

2、为了达到上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

3、提供一种脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法，该方法包括以下步骤：

4、将基因型为stau1flox/flox与adiponectin-cre的小鼠杂交，得到f1代，从f1代中筛选出基因型为stau1 flox/-，cre+和stau1 flox/-，cre-的小鼠进行交配，得到f2代；从f2代小鼠中筛选出基因型为stau1flox/flox；adipoq-cre的小鼠为脂肪组织stau1特异性敲除小鼠。

5、进一步地，从f2代小鼠中筛选出基因型为stau1flox/flox；adipoq-cre的小鼠的方法为pcr方法，所用引物序列如下：

6、stau1flox/flox上游引物：5’-catttccaaaagacgtcaccctta-3’；

7、stau1flox/flox下游引物：5’-agtagctgacacatgctatgtacg-3’；

8、adipoq-cre上游引物：5’-gaacgcactgatttcgacca-3’；

9、adipoq-cre下游引物：5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’。

10、进一步地，以f2代小鼠的基因组dna为模板进行pcr扩增，满足下述要求的小鼠为脂肪组织stau1特异性敲除小鼠：使用stau1flox/flox上游引物和下游引物扩增得到一条186bp的条带，且使用adipoq-cre上游引物和下游引物扩增得到一条200bp的条带。

11、本发明的有益效果为：

12、本发明基于cre-loxp技术使stau1-flox小鼠和adipoq-cre小鼠杂交，构建了一种脂肪组织特异性敲除stau1基因小鼠模型(stau1-ako)，并对其生理代谢表型进行分析来探究stau1具有促进脂肪细胞糖脂代谢的可能性，为阐明stau1在脂肪组织介导的代谢异常中的作用及机制提供有力工具。

技术特征：

1.一种脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法，其特征在于，从f2代小鼠中筛选出基因型为stau1flox/flox；adipoq-cre的小鼠的方法为pcr方法，所用引物序列如下：

3.根据权利要求2所述的脂肪组织stau1特异性敲除小鼠模型的建立方法，其特征在于，以f2代小鼠的基因组dna为模板进行pcr扩增，满足下述要求的小鼠为脂肪组织stau1特异性敲除小鼠：使用stau1flox/flox上游引物和下游引物扩增得到一条186bp的条带，且使用adipoq-cre上游引物和下游引物扩增得到一条200bp的条带。

技术总结
本发明属于生物技术领域，具体公开了一种脂肪组织STAU1特异性敲除小鼠模型的建立方法，该方法包括以下步骤：将基因型为STAU1<supgt;flox/flox</supgt;与Adiponectin‑Cre的小鼠杂交，得到F1代，从F1代中筛选出基因型为STAU1flox/‑，cre+和STAU1flox/‑，cre‑的小鼠进行交配，得到F2代；从F2代小鼠中筛选出基因型为STAU1<supgt;flox/flox</supgt;；AdipoQ‑Cre的小鼠为脂肪组织STAU1特异性敲除小鼠。本发明构建了一种脂肪组织特异性敲除STAU1基因小鼠模型(STAU1‑AKO)，为阐明STAU1在脂肪组织介导的代谢异常中的作用及机制提供有力工具。

技术研发人员：梁小弟,孟轩羽,关亚群
受保护的技术使用者：新疆医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13