一种荨麻疹动物模型的构建方法

本发明涉及生物，更具体涉及一种荨麻疹动物模型的构建方法。

背景技术：

1、荨麻疹俗称风疹块，是由于皮肤、黏膜小血管扩张及渗透性增加而出现的一种局限性水肿反应，通常在2～24小时内消退，但会反复发生新的皮疹，病程迁延数日至数月。荨麻疹发病机制颇为复杂，作为研究荨麻疹的基础，荨麻疹动物模型的建立对揭示该病发病机制及开发新药等都有极大的促进作用。

2、荨麻疹动物模型主要通过被动皮肤过敏(pca)以及主动全身过敏(asa)两种方法构建。pca模型主要使用蓝斑直径大小作为反应强度的指标，继而判定皮肤过敏反应的程度，因此，其只能模仿荨麻疹一过性的皮肤风团发作反应，模型动物无明显血清学免疫反应，模型维持时间短暂，和真实荨麻疹疾病状态存在较大差异，难以进行长期的干预观察和机制研究；asa模型主要通过致敏剂致敏模型动物，使模型动物产生显著血清免疫反应，进而呈现致敏状态，该模型无法较好地复制人类荨麻疹风团发作过程，不具有荨麻疹疾病的特异性症状，与临床荨麻疹患者的真实状况存在有较大的差距。

3、目前荨麻疹尚未有一种符合临床发病状态的模型，现有动物模型主要模拟单个发病环节，不能模拟荨麻疹发病全过程，造模方法大多根据少数已知病因进行造模，因此，动物造模后的症状与临床症状的吻合度和专一性不够。

技术实现思路

1、为了解决上述技术问题，本发明提供了一种荨麻疹动物模型的构建方法，它包括如下步骤：

2、取动物，在颈背部皮下注射致敏液，隔日一次，共两次，末次注射后第3天，在脊柱两侧皮内对称点注射抗血清，次日抗原攻击即得；

3、所述抗血清是注射了致敏液的动物的血清；

4、所述致敏液是含卵白蛋白的生理盐水与氢氧化铝佐剂的混合溶液。

5、进一步地，所述颈背部皮下注射致敏液0.5～1.5ml。

6、更进一步地，所述颈背部皮下注射致敏液1ml。

7、进一步地，所述生理盐水每0.5ml含卵白蛋白1mg；所述生理盐水与氢氧化铝佐剂的体积比为1：1。

8、进一步地，所述对称点每侧各1点，每点距离脊柱1～2cm，每点注射抗血清0.05～0.15ml。

9、更进一步地，所述每点距离脊柱1.5cm，每点注射抗血清0.1ml。

10、进一步地，所述抗血清是动物经颈背部皮下注射致敏液，隔日注射1次，共注射3次，于末次注射10d后，取腹主动脉血液分离得到的血清。

11、进一步地，所述抗原攻击是按动物体重以200g/ml的剂量于尾静脉注射与致敏剂量相同的卵白蛋白加0.75％伊文思蓝溶液。

12、进一步地，所述动物为啮齿类动物。

13、进一步地，所述啮齿类动物为小鼠或大鼠。

14、进一步地，所述大鼠为1.5月龄的sprague-dawley大鼠。

15、本发明荨麻疹动物模型构建方法，通过颈背部皮下注射卵蛋白和背部注射抗卵蛋白血清，使得到的荨麻疹动物模型既能模拟荨麻疹一过性的皮肤风团发作反应，又具有显著的血清学免疫反应，符合临床实际，为揭示荨麻疹发病机制及开发新药等都有极大的促进作用。同时，本发明方法避免了目前该类模型通常要使用百白破疫苗，节约了成本，缩短了造模时间，且造模效果佳，具备实际推广应用价值。

16、显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。

17、以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。

技术特征：

1.一种荨麻疹动物模型的构建方法，其特征在于：它包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述颈背部皮下注射致敏液0.5～1.5ml。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于：所述颈背部皮下注射致敏液1ml。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述生理盐水每0.5ml含卵白蛋白1mg；所述生理盐水与氢氧化铝佐剂的体积比为1：1。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述对称点每侧各1点，每点距离脊柱1～2cm，每点注射抗血清0.05～0.15ml。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于：所述每点距离脊柱1.5cm，每点注射抗血清0.1ml。

7.根据权利要求1、5或6所述的构建方法，其特征在于：所述抗血清是动物经颈背部皮下注射致敏液，隔日注射1次，共注射3次，于末次注射10d后，取腹主动脉血液分离得到的血清。

8.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述抗原攻击是按动物体重以200g/ml的剂量于尾静脉注射与致敏剂量相同的卵白蛋白加0.75％伊文思蓝溶液。

9.根据权利要求1或8所述的构建方法，其特征在于：所述动物为啮齿类动物；所述啮齿类动物为小鼠或大鼠。

10.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于：所述大鼠为1.5月龄的sprague-dawley大鼠。

技术总结
本发明涉及一种荨麻疹动物模型的构建方法，它包括如下步骤：取动物，在颈背部皮下注射致敏液，隔日一次，共两次，末次注射后第3天，在脊柱两侧皮内对称点注射抗血清，次日抗原攻击即得。通过本发明方法得到的荨麻疹动物模型既能模拟荨麻疹一过性的皮肤风团发作反应，又具有显著的血清学免疫反应，符合临床实际，为揭示荨麻疹发病机制及开发新药等都有极大的促进作用。同时，本发明方法避免了目前该类模型通常要使用百白破疫苗，节约了成本，缩短了造模时间，且造模效果佳，具备实际推广应用价值。

技术研发人员：石云舟,秦海燕,李瑛,秦迪,肖显俊,曹炜
受保护的技术使用者：成都中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/11