一种与造影剂相关的急性肾损伤动物模型的构建方法与流程

本发明涉及一种动物模型构建方法，特别涉及与造影剂相关的急性肾损伤动物模型的构建方法。本发明属于生物。

背景技术：

1、随着社会的不断进步和发展，造影剂的使用范围和作用领域也越来越广泛，从增强ct到动脉造影，都离不开造影剂的使用。但这也不可避免的带来了造影剂的副作用，即对肾脏的损害。就目前而言，全世界每年有超过7500万人应用造影剂，与造影剂相关的急性肾损伤(ca-aki)的发生例数呈现逐年增长趋势，严重增加院内死亡、透析风险及医疗费用，为社会带来了巨大的经济与社会负担，是住院患者急性肾功能衰竭的第三大原因。

2、ca-aki的发生机制尚未完全明确，考虑跟造影剂的血流动力学效应、活性氧的影响和直接造影剂诱导的肾小管细胞毒性相关，目前对于ca-aki尚无有效的治疗措施，因此，对ca-aki发生机制及预防策略优化的研究显得非常重要，而这需要一个合格的ca-aki建模方法。迄今为止，关于ca-aki的基础研究大部分基于相同的ca-aki动物模型，通过联合脱水、非甾体类药如吲哚美辛，或者注射肾毒性药物(如甘油吲哚美辛、n-硝基-l-精氨酸甲基酯等)、外科肾部分切除方法，建立大鼠的ca-aki模型，这些都与真实临床实践中ca-aki的发生机制相差甚远。

技术实现思路

1、本发明针对现有技术中公认的有关ca-aki的动物模型定量评价标准和造模简单、符合人的ca-aki的动物模型的缺陷与不足，提供一种ca-aki动物模型的构建方法。

2、为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：

3、本发明的一种与造影剂相关的急性肾损伤动物模型的构建方法，包括以下步骤：

4、(1)选取在室温20～25℃，相对湿度50％～65％的情况下饲养的体重为240-260g的8-10周龄雄性spf级sd大鼠9只，以符合国家标准的大鼠维持期饲料喂养3-4天，造模前12h禁食禁水；

5、(2)造模第一日恢复饮食，继续禁水；

6、(3)造模第三日对步骤(2)的大鼠称重，评估大鼠情况，予以呋塞米，半小时后再予以泛影葡胺，继续禁水满72h后恢复饮水，得到所述的造影剂相关的急性肾损伤模型。

7、其中，优选的，步骤(2)中呋塞米的使用方式为腹腔注射。

8、其中，优选的，步骤(2)中呋塞米的剂量为10ml/kg，浓度为20mg:2ml。

9、其中，优选的，步骤(2)中泛影葡胺的使用方式为尾静脉注射。

10、其中，优选的，步骤(2)中泛影葡胺的用量为10ml/kg的76％的泛影葡胺注射液。

11、本发明还提供了一种ca-aki动物模型，所述ca-aki动物模型是采用上述所述方法构建而成的。所述的该大鼠模型用于人类ca-aki机制研究。本发明构建的动物模型不仅从肾损伤标志物(血肌酐)反映ca-aki组发生的变化，同时可以从组织病理等微观层面反映ca-aki组的病理改变。

12、相较于现有技术，本发明的有益效果是：

13、1)肌酐为肌肉在人体内的代谢产物，肌酐生产后主要经肾小球滤过至原尿中，且几乎不受肾小管重吸收的影响，故测定血肌酐浓度可以反映肾小球的滤过功能。本发明通过观察血肌酐这一临床上简单易行的指标评估大鼠模型的肾功能变化，而血肌酐的升高程度则一定程度上反映了肾功能的受损程度。同时取大鼠肾脏做切片行he染色分析，评估造影剂对大鼠肾脏的直接损害。方法简单易行，是文献中常用的评估建模效果的方法。

14、2)本发明所述构建方法中使用临床上使用的高渗造影剂，在相对较短的时间内制作稳定的ca-aki动物模型，有效避免其它混杂因素的干扰，应用前景广阔，可产生良好的社会效益和经济效益及科研价值。

15、3)本发明构建的ca-aki的动物模型，具有造模方法简单、成功率高、可复制性高、易于操作和推广、与人类的造影剂相关急性肾损伤发病机制接近等特点。

16、4)本发明将ca-aki的大鼠模型应用于人类ca-aki大鼠模型的研究，为研究造影剂对肾脏损伤的病理生理机制、分子信号通路方面提供了稳定的模型，具有实用性好、符合性强、简单客观，推广应用前景广阔等优点。

17、5)本发明所述的构建方法中不引入新的影响肾功能观察的干预因素，减少了混杂因素干扰，使实验结果更为可靠，而现有实验方案引入的肾毒性药物预处理、外科肾部分切除术等均对基础肾功能产生较大影响。

技术特征：

1.一种与造影剂相关的急性肾损伤动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中呋塞米的使用方式为腹腔注射。

3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中呋塞米的剂量为10ml/kg，浓度为20mg:2ml。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中泛影葡胺的使用方式为尾静脉注射。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，步骤(2)中泛影葡胺的用量为10ml/kg的76％的泛影葡胺注射液。

技术总结
本发明公开了一种与造影剂相关的急性肾损伤(CA‑AKI)动物模型的构建方法。所述方法包括以下步骤：(1)选取8‑10周龄雄性SPF级SD大鼠9只，以符合国家标准的大鼠维持期饲料喂养3‑4天，造模前12h禁食禁水；(2)造模第一日恢复饮食，继续禁水；(2)造模第三日对步骤(1)的大鼠称重，评估大鼠情况，予以呋塞米，半小时后再予以泛影葡胺，继续禁水满72h后恢复饮水，得到所述的造影剂相关的急性肾损伤模型。本发明所述构建方法中使用临床上使用的高渗造影剂，在相对较短的时间内制作稳定的CA‑AKI动物模型，有效避免其它混杂因素的干扰，应用前景广阔，可产生良好的社会效益和经济效益及科研价值。

技术研发人员：林开阳,郭延松,蒋雅楠,项翼飞,林雪琴,周耕宇
受保护的技术使用者：福建省立医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/12