香茅草组培苗生产方法与流程

本发明涉及植物组培，尤其涉及香茅草组培苗生产方法。

背景技术：

1、香茅草(cymbopogoncitratus)属禾本科，多年生草本植物，原产于亚热带地区。其茎叶中含柠檬醛，具有柠檬香味，可提取香茅油。香茅油有消毒、杀菌、平喘、止咳，治疗神经痛、肌肉痛等医疗功效，广泛应用于日用化学和医药工业。此外，香茅草近年来被开发为茶饮和调味料，能提高消化机能，健胃消脂，同时，香茅草具有观赏价值，可用来绿化、香化家居，而且其栽培容易，管理粗放，保水性能好，是一种具有发展前景的水土保持优良草种，值得大力宣传推广；

2、香茅草一般采用分株繁殖，但这种方式繁殖效率很低，无法满足生产与市场的需要，而且，长期的无性繁殖容易积累和传播病毒。利用组织培养及其配套育苗技术，通过外植体消毒、初代诱导、继代培养、生根培养和炼苗移栽等技术环节，以香茅草良种或无性系为材料，进行组培苗工厂化生产可以稳定并提高香茅草的生产效率和质量，对香茅草的规模化生产具有重要意义。

3、为此，提出香茅草组培苗生产方法。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的香茅草组培苗生产方法。

2、为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

3、香茅草组培苗生产方法，包括育苗地选择及处理、种子选择及处理、外植体选择及处理、初代诱导、继代培养、生根培养基及炼苗移栽工序；修剪健壮的香茅草作为外植体，对外植体进行灭菌消毒处理后接种于初代诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中经过15～20天继代培养，形成丛生芽，将高≥3cm单芽剪掉上部叶片后转入生根培养基中诱导生根，最后进行炼苗移栽获得香茅草成活苗；主要操作步骤如下：

4、s1：育苗地选择及处理：选择温度在15至20℃之间、多湿、土地深厚、肥沃，排水良好的沙土地作为育苗地，床土配制：每亩施入有机基肥，然后深翻，并晒干后打碎耙平，整理出田垄，播种前将沙土地进行深翻，每亩施入氮、磷、钾并重的混合肥，然后耙平作畦，再将每畦地壤浇透水；

5、s2：种子选择及处理：播种前将种核轻轻敲开，取出种仁，用凉水在15℃下浸泡2天,捞出沥干，时间为根据地区不同选择在10月上旬或者下旬，在田垄上挖宽2～3cm、深1～2cm的播种沟，并在沟内撒一层由有机基肥和细土组成的混合物，种仁均匀地撒在床土上，覆盖一层泥土在种仁上面，所覆盖的泥土的厚度是种仁直径的2-3倍，利用喷雾器对床土喷水保湿，每天一次，保持土壤墒情；种仁的发芽温度适宜在15-30℃，如果达不到，可以在床土表面覆盖一层保鲜膜；幼苗出土后要及时中耕、松土、除草，待幼苗长出3-4片真叶时要进行一次间苗；

6、s3：外植体选择及处理：于晴天选择健壮的香茅草，剪去下部残留根系及上部叶片，保留茎及部分叶鞘，剥掉外面1～3层叶鞘后作为外植体材料；用清水冲洗掉外植体表面泥土后放入去磷洗涤剂溶液中浸泡2min，同时用软毛刷刷洗外植体，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上，将外植体放入体积浓度75％的酒精溶液中浸泡10s后，用无菌水冲洗35次，再将其放入体积浓度0.1％hgcl2溶液中浸泡8min～12min，用无菌水冲洗3次～5次；

7、s4：初代诱导：用手术刀将步骤s3得到的外植体剥掉12层叶鞘后垂直插入初代诱导培养基中，立稳；

8、s5：继代培养：待接入初代诱导培养基中的茎段生长至5cm以上时，剪切掉上部叶片，保持初始芽芽体高度为2.5～3.5cm，将修剪后的初始芽转入继代培养基中，经过15～20天培养，增殖形成丛芽，增殖系数3.0～5.0；

9、s6：生根培养：将步骤s4得到的高≥3cm单芽剪掉上部叶片，保持单芽芽体高度1.5～2.5cm，将修剪后的单芽转入生根培养基中，7～10天后，即可长根；

10、s7：炼苗移栽：待步骤s6生根培养后的单芽根系长度达到1.0cm以上时移到室外育苗网室进行炼苗，37d后打开培养瓶盖，将生根培养基及组培苗倒出，轻轻挤压生根培养基，取出已经锻炼的生根苗，放入清水中震荡洗除残留药液。

11、优选地，所述s1中混合肥中氮、磷、钾的重量比为0.8：1：0.5-0.8。

12、优选地，所述的苗木管理方法为：每日喷淋1次～2次水；移栽后一周内，透光度保持在30％，一周后逐渐增加光照，移栽一个月透光度增至60～80％；待组培苗恢复生长后，用质量浓度0.2％复合肥水溶液或者质量浓度0.1％尿素和质量浓度0.2％磷肥的混合水溶液喷施叶面，施肥后立即用清水冲洗叶面，每月施肥1次，且施肥宜在傍晚进行，不应在午间高温时施肥；其中所述的复合肥的n:p:k＝15:15:15。

13、优选地，所述的育苗基质为椰糠；所述的育苗容器规格为直径5cm，高10cm的无纺布杯；移栽前，用体积浓度0.5％高锰酸钾或800倍甲基托布津溶液对育苗基质淋透消毒，1d后再用清水淋洒洗去药液。

14、优选地，所述的初代诱导中所述的继代培养、所述的生根培养的培育控制条件均为：温度为25±3℃，光照强度2000lx～8000lx，光照时间12h/d～16h/d。

15、优选地，所述s5：继代培养：在超净台上，将增殖芽分株为单芽或小丛，对单芽或小丛继续进行继代培养。

16、优选地，所述s7炼苗移栽：用木棍或其它工具在装有育苗基质的育苗容器中心钻孔，将生根苗放入孔中，捏紧育苗容器，淋透水，之后进行苗木管理。

17、优选地，所述的外植体材料保留茎的长度为2.5cm-3cm。

18、本发明的有益效果：

19、1、本发明通过对香茅草进行外植体消毒，初代诱导，继代培养，生根培养等各项因素及培养方式的筛选，并采用适宜的炼苗、育苗措施，建立了香茅草组培快繁技术体系，使种苗性状稳定，为香茅草组培工厂化育苗提供了技术支撑，对于推动香茅草产业的发展具有重要意义；

20、2、本发明出苗率高，利用氮磷钾复合肥做基肥，并调节氮磷钾复合肥中氮磷钾三者的重量比，均衡了秧苗生长发育所需要的营养成分，促进了秧苗生长，使秧苗长势良好，为香茅草增产打下基础。

技术特征：

1.香茅草组培苗生产方法，其特征在于：包括育苗地选择及处理、种子选择及处理、外植体选择及处理、初代诱导、继代培养、生根培养基及炼苗移栽工序；修剪健壮的香茅草作为外植体，对外植体进行灭菌消毒处理后接种于初代诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中经过15～20天继代培养，形成丛生芽，将高≥3cm单芽剪掉上部叶片后转入生根培养基中诱导生根，最后进行炼苗移栽获得香茅草成活苗；主要操作步骤如下：

2.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述s1中混合肥中氮、磷、钾的重量比为0.8：1：0.5-0.8。

3.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述的苗木管理方法为：每日喷淋1次～2次水；移栽后一周内，透光度保持在30％，一周后逐渐增加光照，移栽一个月透光度增至60～80％；待组培苗恢复生长后，用质量浓度0.2％复合肥水溶液或者质量浓度0.1％尿素和质量浓度0.2％磷肥的混合水溶液喷施叶面，施肥后立即用清水冲洗叶面，每月施肥1次，且施肥宜在傍晚进行，不应在午间高温时施肥；其中所述的复合肥的n:p:k＝15:15:15。

4.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述的育苗基质为椰糠；所述的育苗容器规格为直径5cm，高10cm的无纺布杯；移栽前，用体积浓度0.5％高锰酸钾或800倍甲基托布津溶液对育苗基质淋透消毒，1d后再用清水淋洒洗去药液。

5.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述的初代诱导中所述的继代培养、所述的生根培养的培育控制条件均为：温度为25±3℃，光照强度2000lx～8000lx，光照时间12h/d～16h/d。

6.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述s5：继代培养：在超净台上，将增殖芽分株为单芽或小丛，对单芽或小丛继续进行继代培养。

7.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述s7炼苗移栽：用木棍或其它工具在装有育苗基质的育苗容器中心钻孔，将生根苗放入孔中，捏紧育苗容器，淋透水，之后进行苗木管理。

8.根据权利要求1所述的香茅草组培苗生产方法，其特征在于：所述的外植体材料保留茎的长度为2.5cm-3cm。

技术总结
本发明涉及植物组培技术领域，具体为包括育苗地选择及处理、种子选择及处理、外植体选择及处理、初代诱导、继代培养、生根培养基及炼苗移栽工序；修剪健壮的香茅草作为外植体，对外植体进行灭菌消毒处理后接种于初代诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中经过15～20天继代培养，形成丛生芽，将高≥3cm单芽剪掉上部叶片后转入生根培养基中诱导生根。本发明通过对香茅草进行外植体消毒，初代诱导，继代培养，生根培养等各项因素及培养方式的筛选，并采用适宜的炼苗、育苗措施，建立了香茅草组培快繁技术体系，使种苗性状稳定，为香茅草组培工厂化育苗提供技术支撑，对于推动香茅草产业的发展具有重要意义。

技术研发人员：范志阳,黄晓丹,朱幼箕,黄少坚
受保护的技术使用者：福建省春天生态科技股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14