免疫细胞冻存液的制作方法

文档序号:36172505发布日期:2023-11-24 14:27阅读:75来源:国知局

本发明属于细胞冷冻,具体涉及一种免疫细胞冻存液。


背景技术:

1、免疫细胞是人体免疫系统重要的组成部分,它好比是保卫身体健康的卫士,其免疫防御功能可以抵挡细菌和病毒的入侵,免疫监视功能可以及时清除病变、癌变细胞,免疫稳定功能可以清除衰老、损伤细胞。

2、免疫细胞疗法,是采集人体自身的免疫细胞,经过体外培养,使其数量成千倍增多,靶向性杀伤功能增强,然后再回输到人体来杀灭血液及组织中的病原体、癌细胞、突变的细胞,打破免疫耐受,激活和增强机体的免疫能力,兼顾治疗和保健的双重功效。通常可以将健康时的免疫细胞在严格操作流程下长期存储,在需要使用时可以将预先存储的免疫细胞取出,通过激活和扩增,再对人体进行干预,对受损细胞进行修复与调控,激活休眠细胞功能、增加正常细胞的数量、提高细胞的活性、改善细胞的质量,从本源上调整免疫系统的平衡,缓释病状、调理亚健康、降低患病几率、治疗感染性疾病。

3、将免疫细胞在-70℃~-80℃冻存,细胞活性会随着冷冻时间的延长迅速下降,在-196℃时细胞生物学过程几乎停止,因此要长期保存免疫细胞,液氮温度是最佳的储存温度。但是,通常情况下液体冻结时会造成细胞损伤,冷冻使细胞膜内溶质脱水浓缩,从而造成细胞膜的分解和变性,另外,不当的降温和复苏,导致细胞内形成冰晶和重结晶。

4、目前使用的细胞冻存液虽然可以在免疫细胞冻存时降低细胞损伤,但冻存后的免疫细胞复苏后细胞数量以及细胞活力依然无法满足临床应用的标准,免疫细胞的体外冻存液有待改进。


技术实现思路

1、为了实现上述目的,本发明提供了一种免疫细胞冻存液,可降低免疫细胞的冷冻损伤,保证其复苏后细胞数量以及细胞活力,适应于免疫细胞的长期冻存。

2、本发明通过以下技术方案实现:

3、本发明所述的免疫细胞冻存液,包括2-4v%二甲基亚砜、2-10v%人血清白蛋白、15-80v%血浆、0.1-0.2g/ml肝素、0.8-3g/ml右旋糖酐以及余量培养基。

4、优选的,所述的免疫细胞冻存液包括:3v%二甲基亚砜、7v%人血清白蛋白、70v%血浆、0.15g/ml肝素、2.2g/ml右旋糖酐以及20 v%培养基。

5、优选的,所述培养基为rpmi-1640培养基或淋巴细胞培养基。

6、优选的,所述淋巴细胞培养基为gt-t551培养基或gt-t561培养基。

7、优选的,所述血浆为自体血浆。

8、优选的,所述免疫细胞冻存液每1ml冻存106-108个免疫细胞。

9、优选的,冻存温度为-70℃- -90℃。

10、优选的,所述免疫细胞为外周血单个核细胞,优选为t细胞、自然杀伤细胞或nkt细胞中的任意一种。

11、与现有技术相比,本发明具备以下有益效果:

12、本发明通过试验发现,肝素和右旋糖酐用于免疫细胞冷冻保存,可显著缓解细胞的冷冻损伤,细胞复苏后依然保持良好的细胞活力,并且细胞回收率高,可用于免疫细胞的长期冷冻保存。



技术特征:

1.一种免疫细胞冻存液,其特征在于:包括2-4v%二甲基亚砜、2-10v%人血清白蛋白、15-80v%血浆、0.1-0.2g/ml肝素、0.8-3g/ml右旋糖酐以及余量培养基。

2.根据权利要求1所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:包括3v%二甲基亚砜、7v%人血清白蛋白、70v%血浆、0.15g/ml肝素、2.2g/ml右旋糖酐以及20 v%培养基。

3.根据权利要求2所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:所述培养基为rpmi-1640培养基或淋巴细胞培养基。

4.根据权利要求3所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:所述淋巴细胞培养基为gt-t551培养基或gt-t561培养基。

5.根据权利要求2所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:所述血浆为自体血浆。

6.根据权利要求1-5任一项所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:所述免疫细胞冻存液每1ml冻存106-108个免疫细胞。

7.根据权利要求6所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:冻存温度为-70℃- -90℃。

8.根据权利要求6所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:免疫细胞为外周血单个核细胞。

9.根据权利要求8所述的免疫细胞冻存液,其特征在于:免疫细胞为t细胞、自然杀伤细胞或nkt细胞中的任意一种。


技术总结
本发明属于细胞冷冻技术领域,具体涉及一种免疫细胞冻存液。本发明所述的免疫细胞冻存液,包括2‑4v%二甲基亚砜、2‑10v%人血清白蛋白、15‑80v%血浆、0.1‑0.2g/mL肝素、0.8‑3g/mL右旋糖酐以及余量培养基。本发明通过试验发现,肝素和右旋糖酐用于免疫细胞冷冻保存,可显著缓解细胞的冷冻损伤,细胞复苏后依然保持良好的细胞活力,并且细胞回收率高,可用于免疫细胞的长期冷冻保存。

技术研发人员:郑琦,陈平,王晓芳,韦瑶
受保护的技术使用者:山东诺亚创生生物科技有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/16
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