一种基于社会应激的AD小鼠抑郁共病模型的构建方法及应用

本发明属于生物医药，具体涉及一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法及应用。

背景技术：

1、全世界大约有4.4％的人群有与抑郁相关的情感障碍，抑郁症常伴有轻度认知障碍，并进一步加重了患者的病情，严重影响了生活质量。其中老年期抑郁障碍是老龄人口中发病率较高的精神疾病，指发病年龄在60岁及以上的老年人出现的抑郁症。认知障碍是老年期抑郁障碍常见的症状，一项前瞻性调查发现抑郁障碍的老年人有70％存在痴呆的风险，多项前瞻性研究发现患有抑郁症老年人比对照组出现认知障碍的风险高2～5倍，以上研究均提示抑郁障碍是老年人出现认知障碍的重要风险因素。

2、虽然抑郁症与阿尔茨海默病(ad)的共病状态在临床得到广泛共识，然而两者的关系依然不清楚，研究发现抑郁症既可能是ad的风险因素，也可能是ad的早期伴发症状。为了更好地通过神经环路和分子机制研究抑郁症与ad共病，迫切需要一种理想稳定的抑郁症与ad共病动物模型。

技术实现思路

1、为了克服上述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法及应用，以利于研究抑郁症与ad共病的神经环路和分子机制。

2、为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

3、本发明的第一个发明点，提供了一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，包括以下步骤：

4、1)将具有攻击力的cd-1小鼠置于标准笼中饲养，将3xtg小鼠转移到标准笼装有cd-1小鼠的一侧；所述标准笼由普通小鼠饲养笼中间插入透明挡板得到；

5、2)撤掉标准笼的透明带孔挡板，让cd-1小鼠对3xtg小鼠进行击打，击打结束后放回透明挡板，将cd-1小鼠与3xtg小鼠用透明挡板隔开，进行24小时的社交挫败威胁；

6、3)重复步骤2)操作8天，同时每天结合不同的行为绝望刺激及慢性轻度不可预知性温和刺激；

7、4)对3xtg小鼠进行抑郁行为检测，具有抑郁行为相关表型的小鼠为得到的ad小鼠抑郁共病模型。

8、优选地，步骤1)中，具有攻击力的cd-1小鼠的选择方式为：在能随意获得食物和水的条件下饲养cd-1小鼠，筛选前在造模环境中适应一周；筛选时，随机选取测试c57小鼠接受cd-1小鼠的击打，能够连续击打c57小鼠的cd-1小鼠为具有攻击力的cd-1小鼠。

9、进一步优选地，每天在三个5min的筛选过程中，连续两次攻击的时间间隔小于60s，cd-1小鼠必须连续攻击测试c57小鼠至少10s。

10、优选地，步骤2)中，cd-1小鼠每天累积击打3xtg雄性小鼠四次，每次连续击打10s计为一次有效击打。

11、优选地，步骤4)中，所述抑郁行为检测包括糖水实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验。

12、进一步优选地，糖水实验中，3xtg小鼠糖水偏好性下降；旷场实验中，3xtg小鼠在中心区域的时间及路程减少；悬尾实验及强迫游泳实验中，3xtg小鼠静止时间延长。

13、优选地，cd-1小鼠为有交配经验的月龄在6～8月龄之间的雄性小鼠。

14、优选地，3xtg小鼠为2～3月龄的雄性小鼠，并携带有人源的三个ad相关基因突变；所述三个ad相关基因为psen1、appswe和taup301l。

15、本发明的第二个发明点，提供了上述一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法获得的动物模型在研究抑郁症与ad关联性中的应用。

16、优选地，所述动物模型为通过神经环路和分子机制研究抑郁症与ad的关联性的模型。

17、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

18、本发明提供的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，1、在动物模型选择方面：选择体格较大，攻击性强的cd-1小鼠作为攻击小鼠，选择3xtg小鼠为被击打的模型小鼠，3xtg小鼠为长期经过大量实验验证的经典ad转基因小鼠，同时携带有人源的三个ad相关基因突变：psen1、appswe和taup301l，具有ad疾病中淀粉样沉积和神经纤维缠结两种病理改变，发病时间晚，符合晚发性ad特点，且出现认知行为改变，无明显出生缺陷。2、在刺激方式方面：采用社交失败结合行为绝望刺激及慢性轻度不可预知性温和刺激作为双重刺激，对早期尚未出现病理及行为学改变的3xtg小鼠进行多种社会心理刺激，能够有效减少外伤刺激，可以较好地模拟社会因素相关的抑郁症的发生。3、在构建方法方面：操作简单，无需经过任何药物诱导，耗时短，通过进行短期行为刺激即可引发抑郁表型。经过刺激干预后，经评价可高效稳定构建ad早期/潜伏期状态下的抑郁模型。检测方法便捷，且能从行为学，组织形态，生理功能等多方面，全面且精确地对模型是否成功做出评价。综上所述，采用该方法得到的ad与抑郁症共病动物模型是一种较为合适的研究抑郁症与ad关联性的小鼠模型，造模成功率高，可稳定得到≥75％的出现抑郁行为的3xtg小鼠，死亡率低，且对小鼠同时存在多种社会心理应激刺激，可较好地模拟社会因素相关的抑郁症的发生，适合研究抑郁ad小鼠认知状态变化及相关病理改变，是研究抑郁症与ad共病的神经环路和分子机制的较为理想稳定的动物模型。

19、进一步地，选择的cd-1小鼠为有交配经验雄性小鼠，能够频繁表现出明显的攻击行为，更利于模型的建立。

技术特征：

1.一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，步骤1)中，具有攻击力的cd-1小鼠的选择方式为：在能随意获得食物和水的条件下饲养cd-1小鼠，筛选前在造模环境中适应一周；筛选时，随机选取测试c57小鼠接受cd-1小鼠的击打，能够连续击打c57小鼠的cd-1小鼠为具有攻击力的cd-1小鼠。

3.根据权利要求2所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，每天在三个5min的筛选过程中，连续两次攻击的时间间隔小于60s，cd-1小鼠必须连续攻击测试c57小鼠至少10s。

4.根据权利要求1所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，步骤2)中，cd-1小鼠每天累积击打3xtg雄性小鼠四次，每次连续击打10s计为一次有效击打。

5.根据权利要求1所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，步骤4)中，所述抑郁行为检测包括糖水实验、旷场实验、悬尾实验和强迫游泳实验。

6.根据权利要求5所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，糖水实验中，3xtg小鼠糖水偏好性下降；旷场实验中，3xtg小鼠在中心区域的时间及路程减少；悬尾实验及强迫游泳实验中，3xtg小鼠静止时间延长。

7.根据权利要求1所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，cd-1小鼠为有交配经验的月龄在6～8月龄之间的雄性小鼠。

8.根据权利要求1所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法，其特征在于，3xtg小鼠为2～3月龄的雄性小鼠，并携带有人源的三个ad相关基因突变；所述三个ad相关基因为psen1、appswe和taup301l。

9.权利要求1～8任意一项所述的一种基于社会应激的ad小鼠抑郁共病模型的构建方法获得的动物模型在研究抑郁症与ad关联性中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述动物模型为通过神经环路和分子机制研究抑郁症与ad的关联性的模型。

技术总结
本发明公开了一种基于社会应激的AD小鼠抑郁共病模型的构建方法及应用，属于生物医药技术领域。将具有攻击力的CD‑1小鼠置于标准笼中饲养，将3xTg小鼠转移到标准笼装有CD‑1小鼠一侧；撤掉标准笼挡板，让CD‑1小鼠对3xTg小鼠进行击打，之后放回挡板，将CD‑1小鼠与3xTg小鼠用挡板隔开，进行24小时的社交挫败威胁，同时结合绝望刺激及慢性轻度不可预知性温和刺激，重复击打及刺激操作8天，3xTg小鼠出现抑郁行为相关表型，得到AD小鼠的抑郁共病模型。该方法操作简单，不需要药物诱导，造模成功率较高，死亡率较低，且对小鼠同时存在多种社会心理应激刺激，可较好模拟社会因素相关的抑郁症的发生，能得到适合研究抑郁症与AD关联性的小鼠模型。

技术研发人员：项捷,武胜昔,唐静荣
受保护的技术使用者：中国人民解放军空军军医大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15