一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法

本发明涉及一种通过抑藻细菌抑藻的方法，属于微生物。

背景技术：

1、藻华(harmful algal blooms，habs)指的是，在淡水或海洋生态系统中，微藻、原生动物或大型藻类的迅速增殖、聚集的生态现象，在淡水中称为水华，在海洋中称为赤潮(除了红色，也有可能是褐色或绿色，取决于引起海水变色的微藻种类)。habs破坏水生生态系统、压缩水资源、危害人类健康、破坏水中设施以及影响娱乐业和旅游业，近年来随着全球变暖和水体富营养化，habs爆发频率更高、规模更大、危害更加严重。

2、群体感应(quorum sensing，qs)是细菌典型的信号转导系统之一，允许个体共享有关细胞密度的信息并调控相应基因的表达。铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)作为自然存在的主要抑藻细菌之一，不仅具有可观的抑藻效率，还可能在抑藻菌群中基于qs发挥着未知的协同作用。尽管早期研究确定了p.aeruginosa的一些抑藻物质，但综合各项研究对分泌物的理化性质分析，可以推测p.aeruginosa能够分泌一些未知抑藻物质。另外，p.aeruginosa可以与藻细胞接触从而引起直接抑藻作用，p.aeruginosa还具有降解微囊藻毒素(microcystin，mc)的能力。因此，p.aeruginosa在控制藻华的生物菌剂方面具有很强的应用潜力，对生物法控制habs具有重要意义。

技术实现思路

1、本发明为解决化学防治藻华过程中破坏养殖水体生态系统的问题，进而提出一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法。

2、本发明为解决上述问题采取的技术方案是：本发明的步骤包括：

3、步骤1、培养菌株；

4、步骤2、将步骤1中培养的菌株接种到藻种中。

5、进一步的，步骤1中培养菌株的步骤为：

6、步骤101、冷冻保藏菌株；

7、步骤102、对步骤101中保藏的菌株进行解冻，解冻后在超净台接种至已灭菌冷却的lb培养基中；

8、步骤103、将lb培养基置于恒温摇床进行培养；

9、步骤104、重复步骤101至步骤103将菌液转接至新鲜的lb培养基中，再培养12小时，使菌株充分活化。

10、进一步的，步骤101中保藏菌株的温度为-20℃。

11、进一步的，步骤102中解冻后在超净台按1％的接种量接种至已灭菌冷却的lb培养基中。

12、进一步的，步骤103中恒温摇床的温度为35℃，转速为150rpm，培养时间为12小时。

13、进一步的，所述lb培养基由胰蛋白胨10g/l、酵母提取物5g/l和氯化钠10g/l组成；再用5mol/l naoh调ph至7.2。

14、本发明的有益效果是：

15、1、本发明中铜绿假单胞菌4天内对鱼腥藻的叶绿素a去除率高达85.72％，一般抑藻菌的抑藻周期为4天或7天，相比之下铜绿假单胞菌具有优越性，有望用于控制鱼腥藻水华，但需考虑浊度升高对水生生态系统的影响；

16、2、绿藻对铜绿假单胞菌具有更高的防护作用，因此铜绿假单胞菌具有一定的抑藻专一性和可观的抑藻效率；群体感应能够调控p.aeruginosa抑藻作用，2天内δpqsa、δpqsl、δlasirhli和铜绿假单胞菌对鱼腥藻的叶绿素a去除率分别为43.84％、32.53％、32.48％和13.71％；各群体感应突变菌株的抑藻效应差异不体现在细胞状态和eps多糖、蛋白组成上。

技术特征：

1.一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：所述一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法是通过如下步骤实现的：

2.根据权利要求1所述的一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：步骤1中培养菌株的步骤为：

3.根据权利要求2所述的一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：步骤101中保藏菌株的温度为-20℃。

4.根据权利要求2所述的一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：步骤102中解冻后在超净台按1％的接种量接种至已灭菌冷却的lb培养基中。

5.根据权利要求2所述的一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：步骤103中恒温摇床的温度为35℃，转速为150rpm，培养时间为12小时。

6.根据权利要求2所述的一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，其特征在于：所述lb培养基由胰蛋白胨10g/l、酵母提取物5g/l和氯化钠10g/l组成；再用5mol/lnaoh调ph至7.2。

技术总结
一种基于群体感应效应通过抑藻细菌抑藻的方法，它涉及一种通过抑藻细菌抑藻的方法。本发明为了解决化学防治藻华过程中破坏养殖水体生态系统的问题。本发明的步骤包括步骤1、培养菌株；步骤2、将步骤1中培养的菌株接种到藻种中。本发明属于微生物技术领域。

技术研发人员：任祎,邢德峰,黄明池,吕晓薇,汪家竹,周翰洋
受保护的技术使用者：哈尔滨工业大学水资源国家工程研究中心有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16