本发明属于木芙蓉组织培养,具体涉及一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法。
背景技术:
1、在城市经济的快速发展后,人们开始回归城市地方属性的根本,园林绿化工作越来越强调地域特色,要让人们记得住乡愁。
2、木芙蓉为成都市市花,她既是独具特色的城市生态名片,也是城市地域人文特征的浓缩和象征。
3、木芙蓉原产于中国,其花姿优美,具有较高的观赏特性;花、叶及根均可入药,具有凉血、解毒、消肿等功效;其还具有净化空气、吸附重金属等生态效益。芙蓉花具有显著的生态价值、经济价值和社会价值,在我国园林观赏植物中具有非常重要的地位,得到广大人民群众的喜爱。
4、木芙蓉‘锦绣紫’花大色艳、花期长、抗性强,具有较强的园林观赏性。但该品种因不结实无法通过种子繁殖;而对于生产上较常用的扦插繁殖,其生根也较困难,因此无法进行高效的批量化生产,不能达到推广应用的目的。
技术实现思路
1、本发明的目的是针对现有的问题,提供了一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法。
2、本发明是通过以下技术方案实现的:
3、一种木芙蓉组‘锦绣紫’培育苗方法,包括如下步骤:
4、s1、外植体灭菌:
5、s101、采集当年发出的带腋芽的嫩枝条,用稀释后的洗涤剂水清洗枝条,然后用流水冲洗10~15min;
6、s102、去掉茎段叶片,将枝条剪切成带1~2个腋芽或者顶芽、长约1.5~2.5cm的小段,在超净台上先用75%酒精浸泡60s,无菌水冲洗2次,接着用5%次氯酸钠消毒10~13min,无菌水冲洗4次,每次水洗时间至少5min以上;
7、s2、初代培养:
8、s201、在滤纸上用无菌刀片切掉损伤的茎段,接种带芽茎段到芽诱导培养基中,为了防止交叉污染,每个试管中接种1个外植体,组培苗以光照强度2000~2500lux,光照时长16h/d,温度24~26℃为培养条件;
9、s202、在芽诱导培养基上培养生长30d以后,获得无菌芽苗,获得1.5cm以上的芽;
10、s3、扩繁、生根:
11、s301、配制培养基
12、以配制2l培养基为例,首先将wpm加入到1.8l左右的水中,需要完全溶解,然后加入蔗糖、琼脂并添加水到2l,加入激素,最后调整ph值至5.8;
13、s302、操作流程
14、1)一株苗去掉叶片,然后每株分段,一般一片叶分一段,如果节间短,可以2-3个叶片一段;
15、2)有两个节间的茎段需要平躺在培养基中;
16、3)10天左右开始萌发侧芽,大约50~60d后苗会伸长到瓶盖,再次切割转入到新培养基中;
17、s4、移栽:
18、用小杯子或小棚保湿,2周以内完全遮盖,保持85%左右湿度,2周后根据苗子状态慢慢揭开,起始揭开小口,一两个小时观察苗蔫不蔫,不蔫再一天天慢慢开口,1个月后基本完全开盖。
19、进一步地,步骤s101中所述的嫩枝条为当年新发出的锦绣紫嫩枝条。
20、进一步地,步骤s102中所述的5%的次氯酸钠为:95ml无菌水+5ml次氯酸钠。
21、进一步地,步骤s201中所述的芽诱导培养基为:1/2ms+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+0.1mg/l iba+1ml/l ppm。
22、进一步地,步骤s202中注意污染情况,如果有黄色和白色细菌,要丢弃。
23、进一步地,步骤s301中所述的wpm培养基为l449西美杰。
24、进一步地,步骤s301中所述的激素为0.1mg/l iba。
25、进一步地,步骤s301中2)中如果没有蓝盖瓶,先溶解培养基、agar、糖并加入激素,分装到组培瓶后再高压灭菌。灭菌后分装时在超净台中操作,防止污染。
26、进一步地,步骤s302的操作3)中所述的萌发侧芽的过程同时生根,如需要生根苗移栽,不再扩繁,直接移栽即可。
27、进一步地,步骤s4中移栽所使用的移栽基质:泥炭土:珍珠岩:蛭石=3:1:1。
28、本申请的‘锦绣紫’(品种权号:20190385)
29、花重瓣,半球形,直径9-12cm,花冠紫红色,不变色;花瓣紧凑,由5-7个花芯组成;花期6-10月,不结实。
30、经多次试验,发现‘锦绣紫’自带内生菌较多,按以往经验,可选择性施加ppm降低引进污染率。
31、本发明相比现有技术具有以下优点:
32、本发明通过上述方法建立的木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法能够高效地获得木芙蓉‘锦绣紫’外植体再生苗,可为木芙蓉‘锦绣紫’高效繁殖提供技术参考,适合在生物技术领域推广应用。
1.一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s101中所述的嫩枝条为当年新发出的锦绣紫嫩枝条。
3.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s102中所述的5%的次氯酸钠为:95ml无菌水+5ml次氯酸钠。
4.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s201中所述的芽诱导培养基为:1/2ms+30g/l蔗糖+6g/l琼脂+0.1mg/l iba+1ml/l ppm。
5.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s202中注意污染情况,如果有黄色和白色细菌,要丢弃。
6.根据权利要求1所述一种木芙蓉组培育苗方法,其特征在于,步骤s301中所述的激素为0.1mg/l iba。
7.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s302的操作3)中所述的萌发侧芽的过程同时生根,如需要生根苗移栽,不再扩繁,直接移栽即可。
8.根据权利要求1所述一种木芙蓉‘锦绣紫’组培育苗方法,其特征在于,步骤s4中移栽所使用的移栽基质:泥炭土:珍珠岩:蛭石=3:1:1。