一种脑小血管病伴发抑郁的动物模型构建方法

本发明涉及动物模型领域，具体涉及一种脑小血管病伴发抑郁的动物模型构建方法和应用。

背景技术：

1、脑小血管病(cerebral small vessel disease，csvd)指由各种病因引发的脑内小动脉、微动脉、毛细血管、微静脉和小静脉的病理学异常，并伴随一系列临床症状。csvd神经影像学特征包括近期皮质下小梗死、腔隙、白质高信号(white matterhyperintensity，wmh)、血管周围间隙、微出血和脑萎缩等，可引起一系列病理学、神经影像学变化及情感行为的异常，其中最典型的为诱发患者精神情绪的变化，如抑郁症。55％csvd患者合并抑郁、28.3％的患者合并焦虑，同时合并抑郁焦虑者占21.7％，以抑郁情绪为主。研究证实，脑白质完整性的损伤与csvd患者的抑郁症状直接相关，同时csvd与抑郁症存在共同的病理生理基础，且wmh、腔隙性梗死可介导更严重的抑郁症状。导致这一系列病理改变的确切病因尚不明确，免疫炎症反应、神经生化递质及其受体变化、血脑屏障破坏、神经环路损伤、神经元功能改变、基因突变等均可能参与csvd及抑郁症的发生发展。

2、现有技术虽然有构建脑小血管病或抑郁症的动物模型，但是并没有脑小血管病伴发抑郁(cerebral small vessel disease depression，csvdd)的复合动物模型，脑小血管病或抑郁症的动物模型不能全面而整体的模拟csvdd的特点，只是局限于单病模型，极大的限制了csvdd的病理生理研究、发病机制研究、体外药物筛选和药物评价等，且双侧颈总动脉结扎法有损伤视神经风险。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种脑小血管病伴发抑郁的动物模型构建方法和应用。

2、具体地，本发明第一方面提供了一种脑小血管病伴发抑郁(csvdd)的动物模型的构建方法，所述构建方法包括内皮素-1注射和叠加慢性不可预知温和刺激的步骤。

3、在某些实施方式中，所述内皮素-1的注射部位为内囊后肢。

4、在某些实施方式中，所述内皮素-1的用法为；浓度100-300pmol/μl的内皮素-1，用量0.5-3μl，优选为浓度200pmol/μl内皮素-1，用量1μl。

5、在某些实施方式中，所述叠加慢性不可预知刺激的时间为20-35天，优选为28天。

6、在某些实施方式中，所述刺激的刺激条件选自：倾斜鼠笼、禁水、禁食、噪声、潮湿垫料、冰水游泳、灯光昼夜颠倒、合笼饲养、足底电击或其组合。

7、在某些实施方式中，所述刺激的刺激条件选自：45度倾斜鼠笼7h、禁水24h，禁食24h，噪声(>80db)3h，潮湿垫料24h，冰水游泳5min，灯光昼夜颠倒12h，合笼饲养24h(6只一笼)，足底电击1min或其组合。

8、在某些实施方式中，所述叠加慢性不可预知温和刺激为每天随机给予1-2个刺激条件，连续进行28天。

9、在某些实施方式中，所述动物为小鼠、大鼠或兔。

10、在某些实施方式中，所述叠加慢性不可预知温和刺激后进一步包括动物模型指标检测的步骤。

11、在某些实施方式中，所述指标检测包括动物行为学评估csvdd抑郁情况、炎症因子和/或血清素(5-ht)分泌情况。

12、本发明第二方面提供了根据本发明第一方面所述的方法获得的动物模型在csvdd的病理生理研究、发病机制研究、体外药物筛选和/或药物评价中的应用。

13、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

14、本发明利用内皮素-1诱导csvd皮质下微梗死，降低脑血流量，同时叠加慢性不可预知温和刺激加深大鼠的抑郁程度，全面而整体模拟了csvd-d的特点，最大程度上避免了因认知障碍带来的干扰，对于csvd-d的病理生理研究、发病机制研究、体外药物筛选和药物评价等，均具有广泛的意义。

技术特征：

1.一种脑小血管病伴发抑郁(csvdd)的动物模型的构建方法，其特征在于，所述构建方法包括内皮素-1注射和叠加慢性不可预知温和刺激的步骤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内皮素-1的注射部位为内囊后肢。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述内皮素-1的用法为：浓度100-300pmol/μl的内皮素-1，用量0.5-3μl；优选为浓度200pmol/μl内皮素-1，用量1μl。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述叠加慢性不可预知刺激的时间为20-35天，优选为28天。

5.根据权利要求1-4任一项所述的方法，其特征在于，所述刺激的条件选自：倾斜鼠笼、禁水、禁食、噪声、潮湿垫料、冰水游泳、灯光昼夜颠倒、合笼饲养、足底电击或其组合；优选地，所述刺激的条件选自45度倾斜鼠笼7h、禁水24h，禁食24h，噪声3h，潮湿垫料24h，冰水游泳5min，灯光昼夜颠倒12h，合笼饲养24h，足底电击1min或其组合。

6.根据权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述叠加慢性不可预知温和刺激为每天随机给予1-2个刺激条件，连续进行28天。

7.根据权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述动物为小鼠、大鼠或兔。

8.根据权利要求1-7任一项所述的方法，其特征在于，所述叠加慢性不可预知温和刺激后进一步包括动物模型指标检测的步骤。

9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述指标检测包括动物行为学评估csvdd抑郁情况、炎症因子和/或血清素(5-ht)分泌情况。

10.根据权利要求1-9所述的方法获得的动物模型在csvdd的病理生理研究、发病机制研究、体外药物筛选和/或药物评价中的应用。

技术总结
本发明公开了一种脑小血管病伴发抑郁(CSVDD)的动物模型的构建方法，包括内皮素‑1注射和叠加慢性不可预知温和刺激的步骤。利用内皮素‑1诱导CSVD皮质下微梗死，降低脑血流量，同时叠加慢性不可预知温和刺激加深大鼠的抑郁程度，全面而整体模拟了CSVD‑D的特点，最大程度上避免了因认知障碍带来的干扰，对于CSVD‑D的病理生理研究、发病机制研究、体外药物筛选和药物评价等，均具有广泛的意义。

技术研发人员：闫咏梅,杨一帆,戎杰,张敬雯,范仙灵,张子腾,谢欣纯
受保护的技术使用者：陕西中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15