制作海水鱼类的雄性不育个体的方法、防止海水鱼类繁殖的方法和不育的海水鱼类雄性个体与流程

本说明书公开了制作雄性不育个体的方法、防止繁殖的方法和不育的海水鱼类雄性个体。

背景技术：

1、鱼类达到一定年龄、身体尺寸时则达到性成熟，进行繁殖行为并产生子代。由此制作种苗、进行养殖生产。如果使养殖鱼的性成熟和繁殖顺其自然，则出售受精卵、种苗和成鱼并经过一定时间的饲养之后，其他人也能够自行生产，逃回自然界时，可能与自然界中的个体进行繁殖行为而再生产。

2、另外，正在研究通过基因突变来控制作为特定外来品种的蓝腮太阳鱼(bluegill)的性成熟和繁殖、从而防止在环境中自行生产、再生产(非专利文献1)。

3、在维持成为卵、精子之类配子的基础的原始生殖细胞、卵原细胞、精原细胞的存在的状态下通过基因突变来抑制雌雄一方的性成熟、繁殖是可能的，但是难以同时抑制雌雄两方。例如，敲除了fshr(follicle stimulating hormone receptor，卵泡刺激素受体)基因的鳉鱼(fshr ko鳉鱼)时，可观察到雌性个体不育。但是，fshr ko鳉鱼的雄性个体或性别转换雄性个体则能够正常形成精子并繁殖(非专利文献2)。另外，对于斑马鱼，也报道了与fshr ko鳉鱼同样的现象(非专利文献3)。

4、现有技术文献

5、非专利文献

6、非专利文献1：https://www.erca.go.jp/suishinhi/seika/pdf/seika_1_h29/4-1408_2.pdf

7、非专利文献2：murozumi et al.endocrinology,august 2014,155(8):3136-3145

8、非专利文献3：endocrinology,october 2015,156(10):3747-3762

技术实现思路

1、发明要解决的问题

2、本发明的一个课题是制作海水鱼类的雄性不育个体。另外，一个课题是提供使用上述雄性不育个体的、繁殖防止方法。

3、用于解决问题的方案

4、本发明包括以下实施方式。

5、项1.

6、一种制作雄性不育个体的方法，其包括下述步骤：在海水鱼类的雄性个体中，抑制选自fshr(follicle stimulating hormone receptor，卵泡刺激素受体)和其配体中的至少一者的功能表达。

7、项2.

8、根据项1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过导入选自fshr和其配体中的至少1个基因的功能缺损突变来进行。

9、项3.

10、根据项2所述的方法，其中，功能缺损突变的导入通过选自规律成簇的间隔短回文重复/crispr相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromicrepeats/crispr associated protein 9、crispr/cas9)系统、锌指核酸酶(zinc fingernuclease、zfn)系统和转录激活样效应因子核酸酶(tal effector nuclease、talen)系统中的至少一种基因组编辑系统来进行。

11、项4.

12、根据项1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过抑制选自fshr的基因和其配体中的至少一者的表达来进行。

13、项5.

14、根据项4所述的方法，其中，基因表达的抑制通过选自由以选自fshr和其配体中的至少1种mrna为标靶的、选自由sirna、shrna和mirna组成的组中的至少一种rna分子或能够表达该rna分子的载体组成的组中的至少一种来进行。

15、项6.

16、根据项1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过抑制选自fshr和其配体中的至少1种蛋白质的功能来进行。

17、项7.

18、根据项6所述的方法，其中，蛋白质的功能的抑制通过选自由下述抗体所组成的组中的至少一种来进行，所述抗体与选自fshr和其配体中的至少一者特异性结合且通过该结合来抑制结合对象的功能表达。

19、项8.

20、一种海水鱼类雄性个体，其通过抑制选自由fshr(follicle stimulatinghormone receptor，促卵泡激素受体)和其配体中的至少1者的功能表达而不育。

21、项9.

22、上述海水鱼类的繁殖防止方法，其包括下述步骤：将通过抑制选自fshr(folliclestimulating hormone receptor，促卵泡激素受体)和其配体中的至少1者的功能表达而不育的海水鱼类雄性个体投入到上述海水鱼类的雌性个体所存在的环境、或能够与上述海水鱼类交配的海洋鱼类的雌性个体所存在的环境，并且，上述雌性个体未不育。

23、项10.

24、根据项9所述的繁殖防止方法，其中，还一起投入通过抑制选自fshr(folliclestimulating hormone receptor)和其配体中的至少1者的功能表达而不育的上述海水鱼类的雌性个体。

25、发明的效果

26、根据本发明，可以提供海水鱼类的雄性不育个体。另外，可以提供使用该雄性不育个体的繁殖防止方法。对于雄性不育个体而言，可以期待防止养殖鱼被盗、售出个体使用权所有者利用养殖鱼进行再生产。

技术特征：

1.一种制作雄性不育个体的方法，其包括下述步骤：在海水鱼类的雄性个体中，抑制选自fshr(follicle stimulating hormone receptor，卵泡刺激素受体)和其配体中的至少一者的功能表达。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过导入选自fshr和其配体中的至少1个基因的功能缺损突变来进行。

3.根据权利要求2所述的方法，其中，功能缺损突变的导入通过选自规律成簇的间隔短回文重复/crispr相关蛋白9(clustered regularly interspaced short palindromicrepeats/crispr associated protein 9、crispr/cas9)系统、锌指核酸酶(zinc fingernuclease、zfn)系统和转录激活样效应因子核酸酶(tal effector nuclease、talen)系统中的至少一种基因组编辑系统来进行。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过抑制选自fshr的基因和其配体中的至少一者的表达来进行。

5.根据权利要求4所述的方法，其中，基因表达的抑制通过选自由以选自fshr和其配体中的至少1种mrna为标靶的、选自由sirna、shrna和mirna组成的组中的至少一种rna分子或能够表达该rna分子的载体组成的组中的至少一种来进行。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，功能表达的抑制通过抑制选自fshr和其配体中的至少1种蛋白质的功能来进行。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，蛋白质的功能的抑制通过选自由下述抗体所组成的组中的至少一种来进行，所述抗体与选自fshr和其配体中的至少一者特异性结合且通过该结合来抑制结合对象的功能表达。

8.一种海水鱼类雄性个体，其通过抑制选自由fshr(follicle stimulating hormonereceptor，促卵泡激素受体)和其配体中的至少1者的功能表达而不育。

9.上述海水鱼类的繁殖防止方法，其包括下述步骤：将通过抑制选自fshr(folliclestimulating hormone receptor，促卵泡激素受体)和其配体中的至少1者的功能表达而不育的海水鱼类雄性个体投入到所述海水鱼类的雌性个体所存在的环境、或能够与所述海水鱼类交配的海洋鱼类的雌性个体所存在的环境，并且，所述雌性个体未不育。

10.根据权利要求9所述的繁殖防止方法，其中，还一起投入通过抑制选自fshr(follicle stimulating hormone receptor，促卵泡激素受体)和其配体中的至少1者的功能表达而不育的所述海水鱼类的雌性个体。

技术总结
本发明的一个课题在于，制作海水鱼类的雄性不育个体。另外，一个课题在于，提供使用上述雄性不育个体的繁殖防止方法。利用制作雄性不育个体的方法解决了课题，所述制作雄性不育个体的方法包括下述步骤：在海水鱼类的雄性个体中，抑制选自FSHR(Follicle Stimulating Hormone Receptor，卵泡刺激素受体)和其配体中的至少一者的功能表达。

技术研发人员：岸本谦太
受保护的技术使用者：瑞吉诺水产研究所有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/26