一种复合培养基及其在彩叶大戟的快速繁殖中的应用的制作方法

本发明属于组织培养，具体涉及一种复合培养基及其在彩叶大戟的快速繁殖中的应用。

背景技术：

1、彩叶大戟，又名费氏大戟或费朗科西大戟，属于大戟科大戟属的多肉植物。彩叶大戟的植株呈低矮丛生状，具有肥大的肉质根茎，茎皮破裂后会流出白色乳汁状浆液。其叶片形态多样，包括圆形、长条形、菱形等，叶缘有皱褶或蕾丝边，叶色丰富，有红、粉、白、浅绿、墨绿乃至接近黑色等多种颜色。人工变种中，彩叶麒麟锦在叶面上有黄色斑纹。彩叶大戟喜欢温暖干燥和阳光充足的环境，耐干旱，怕荫蔽和水涝。在种植时需要充足的光照，否则植株容易徒长，影响观赏性和植株的健康。此外，彩叶大戟的花序直立，为杯状聚伞花序，具较大苞片，小花黄绿色或绿色。

2、在药用价值方面，其来源于植株根部，在春季未发芽前，或秋季茎叶枯萎时采挖，除去残茎及须根，洗净晒干即得。其味苦、辛，性寒，有小毒；入肺、脾、肾经；有泻水沈、利二便之功效。

3、目前彩叶大戟多采用种子播种、扦插繁殖。采用种子繁殖时，其繁殖周期长，后代性状分离大，不能保持母本优良性状；采用扦插繁育时，切口分泌乳汁，成活率较低，严重影响具有优良性状植株的繁育系数，且其扦插后期生长势较弱。即大戟栽培繁育技术的不成熟成为大戟广泛应用的障碍，在一定程度上限制了大戟的栽植范围的扩大。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种复合培养基及其在彩叶大戟的快速繁殖中的应用。

2、一种复合培养基，包括启动培养基、继代培养基和生根培养基，所述启动培养基以ms培养基为基本培养基，并且含有6-卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述继代培养基以ms培养基为基本培养基，并且含有6-卞基嘌呤、甲硫达嗪、噻苯隆、蔗糖和琼脂；所述生根培养基以1/2ms培养基为基本培养基，并且含有吲哚丁酸和烯效唑，或胺鲜酯和异戊烯腺嘌呤。

3、所述启动培养基中6-卞基嘌呤的浓度为0.5-1.5mg/l；萘乙酸的浓度为0.2-0.7mg/l；蔗糖的浓度为20-40g/l；琼脂的浓度为6-8g/l。

4、所述继代培养基中6-卞基嘌呤的浓度为0.5-1.5mg/l；甲硫达嗪的浓度为0.1-0.3mg/l；噻苯隆的浓度为0.02-0.1mg/l；；蔗糖的浓度为20-40g/l；琼脂的浓度为6-8g/l。

5、所述生根培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5-1.5mg/l；烯效唑的浓度为0.5-1.5mg/l。

6、所述生根培养基中胺鲜酯的浓度为1.5-4.5mg/l；异戊烯腺嘌呤的浓度为0.05-0.5mg/l。

7、一种彩叶大戟的快速繁殖方法，按照如下步骤进行：

8、(1)准备外植体：取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖，依次冲洗、消毒、剪断，即得到外植体；

9、(2)启动培养：将所述外植体接入所述的启动培养基中进行培养20-22d，待侧芽萌发后长至2-3cm时转接进行继代培养；

10、(3)继代培养：将萌发后的侧芽切下转入所述的继代培养基进行培养25-30d，得到单株体；

11、(4)生根培养：将所述单株体转入所述的生根培养基进行培养，得到生根苗；

12、(5)移栽培养：将所述生根苗移至温室，进行驯化3-4d，再炼苗2-3d后移栽。

13、步骤(1)中，取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖并剪去叶片，放入容器中加洗衣粉并以水冲洗30-35min，然后在无菌条件下以75％酒精消毒20-40s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡2-4min，最后用无菌水冲洗3-5次，并剪成0.5-1.0cm的带腋芽茎尖和茎段，以无菌滤纸吸干表面的水分，即得到外植体。

14、步骤(5)所述移栽包括如下步骤：将移栽基质依次进行暴晒、混合、搅拌和消毒，得到消毒基质；对所述生根苗的根部进行消毒，然后蘸取生根液，并移栽至消毒基质中；移栽初期控制温度为18-28℃、相对湿度为70-80％、折光率为50-60％；每隔一周施加一次10-20ppm氨基酸水溶肥ggr溶液，管理生长30-40d即可。

15、所述移栽基质包括如下重量份的原料：泥炭7份、珍珠岩2份和河沙1份。

16、所述移栽基质消毒采用稀释800倍的百菌清溶液；生根苗的根部消毒采用百菌清溶液。

17、本发明的有益效果：采用本发明的复合培养基，可以快速繁殖彩叶大戟。培养基组分中甲硫达嗪和噻苯隆组合使用，提高了在继代培养阶段的繁殖系数，且协同增效，吲哚丁酸和烯效唑，或胺鲜酯和异戊烯腺嘌呤组合使用，增加了了在生根阶段根的条数以及平均根长。

技术特征：

1.一种复合培养基，包括启动培养基、继代培养基和生根培养基，其特征在于，所述启动培养基以ms培养基为基本培养基，并且含有6-卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述继代培养基以ms培养基为基本培养基，并且含有6-卞基嘌呤、甲硫达嗪、噻苯隆、蔗糖和琼脂；所述生根培养基以1/2ms培养基为基本培养基，并且含有吲哚丁酸和烯效唑，或胺鲜酯和异戊烯腺嘌呤。

2.根据权利要求1所述复合培养基，其特征在于，所述启动培养基中6-卞基嘌呤的浓度为0.5-1.5mg/l；萘乙酸的浓度为0.2-0.7mg/l；蔗糖的浓度为20-40g/l；琼脂的浓度为6-8g/l。

3.根据权利要求1所述复合培养基，其特征在于，所述继代培养基中6-卞基嘌呤的浓度为0.5-1.5mg/l；甲硫达嗪的浓度为0.1-0.3mg/l；噻苯隆的浓度为0.02-0.1mg/l；蔗糖的浓度为20-40g/l；琼脂的浓度为6-8g/l。

4.根据权利要求1所述复合培养基，其特征在于，所述生根培养基中吲哚丁酸的浓度为0.5-1.5mg/l；烯效唑的浓度为0.5-1.5mg/l。

5.根据权利要求1所述复合培养基，其特征在于，所述生根培养基中胺鲜酯的浓度为1.5-4.5mg/l；异戊烯腺嘌呤的浓度为0.05-0.5mg/l。

6.一种彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，按照如下步骤进行：

7.根据权利要求6所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(1)中，取彩叶大戟幼嫩茎段、茎尖并剪去叶片，放入容器中加洗衣粉并以水冲洗30-35min，然后在无菌条件下以75％酒精消毒20-40s，再用0.1％的氯化汞溶液浸泡2-4min，最后用无菌水冲洗3-5次，并剪成0.5-1.0cm的带腋芽茎尖和茎段，以无菌滤纸吸干表面的水分，即得到外植体。

8.根据权利要求6所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，步骤(5)所述移栽包括如下步骤：将移栽基质依次进行暴晒、混合、搅拌和消毒，得到消毒基质；对所述生根苗的根部进行消毒，然后蘸取生根液，并移栽至消毒基质中；移栽初期控制温度为18-28℃、相对湿度为70-80％、折光率为50-60％；每隔一周施加一次10-20ppm氨基酸水溶肥ggr溶液，管理生长30-40d即可。

9.根据权利要求8所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽基质包括如下重量份的原料：泥炭7份、珍珠岩2份和河沙1份。

10.根据权利要求8所述彩叶大戟的快速繁殖方法，其特征在于，所述移栽基质消毒采用稀释800倍的百菌清溶液；生根苗的根部消毒采用百菌清溶液。

技术总结
本发明公开了一种复合培养基及其在彩叶大戟的快速繁殖中的应用。所述启动培养基以MS培养基为基本培养基，并且含有6‑卞基嘌呤、萘乙酸、蔗糖和琼脂；所述继代培养基以MS培养基为基本培养基，并且含有6‑卞基嘌呤、甲硫达嗪、噻苯隆、蔗糖和琼脂；所述生根培养基以1/2MS培养基为基本培养基，并且含有吲哚丁酸和烯效唑，或胺鲜酯和异戊烯腺嘌呤。采用本发明的复合培养基，可以快速繁殖彩叶大戟。培养基组分中甲硫达嗪和噻苯隆组合使用，提高了在继代培养阶段的繁殖系数，且协同增效，吲哚丁酸和烯效唑，或胺鲜酯和异戊烯腺嘌呤组合使用，增加了了在生根阶段根的条数以及平均根长。

技术研发人员：张成华,于海燕,刘蓉,任玉敏,李威
受保护的技术使用者：北京艾比蒂生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2025/3/20