活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及蛹虫草，具体涉及活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法。
【背景技术】
[0002] 天然野生冬虫夏草是在特殊的生态和极端的环境下形成的，它拥有特殊的基因及 表达产物与性状，具有严格的多生性，并且要求特殊的高寒地区生态地理环境，因此，产量 极少。为了缓解供需矛盾，我国将野生冬虫夏草人工栽培列为重点科研项目。但是天然的 冬虫夏草由于特殊的基因及表达产物与性状等复杂原因导致很难大规模工业化生产，我国 科技工作中在长期的研宄摸索中发现蛹虫草是天然冬虫草夏的良好替代品，蛹虫草又名北 冬虫夏草，是一种极为名贵珍稀的真菌类中药，是具有极高的医药、保健和经济价值的中药 材。而且蛹虫草很适宜用工厂化人工培育，能规模化种植。人工培植的蛹虫草子实体具有 催眠镇静、益肝肾、补虚损、防癌、抗癌、止血、化痰、平喘等多种功效。2009年卫生部文件《卫 生部关于批准蛹虫草为新资源食品的公告（2009年第3号）》将其列为新资源食品。
[0003]卫生部新资源食品公告上规定腺苷、虫草多糖含量都有最低限量，然而这只是一 个最低的规定。事实上，蛹虫草子实体还含有两种非常重要的且含量明显高于冬虫夏草的 活性成分：虫草素和虫草酸。特别是虫草素，是虫草的特有成分，它作为一种新型的广谱抗 菌素，以其特有的抗菌、抗病毒特性，引起了越来越广泛的重视。
[0004] 通过种植蛹虫草的方法来获得虫草素是一条行之有效的路径。培养蛹虫草子实体 所使用的菌株为：《卫生部关于批准蛹虫草为新资源食品的公告（2009年第3号）》所规定 的子囊菌亚纲、麦角菌科、虫草属菌种，蛹虫草拟青霉Cordyceps miIitaris。CN103609329A 公开一种提高虫草素含量的蛹虫草子实体培养方法，包括菌丝体培养和子实体培养，所述 菌丝体培养包括以下步骤：在固体培养基中进行菌种的活化、在液体培养基中进行液体菌 种的培养和在发酵罐培养基中进行发酵罐培养，其特征在于，所述固体培养基、所述液体培 养基和所述发酵罐培养基分别含有重量百分比2%~9%的醋酸锌。该方法所得的蛹虫草 子实体含虫草素1. 5~2. lmg/g。
【发明内容】
[0005]为了更加方便和高效地种植蛹虫草，获得活性物含量高的蛹虫草子实体，本发明 提供一种活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法。
[0006]本发明实现上述目的的技术方案如下。
[0007]活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法，采用固体栽培法，其对现有技术的创新 之处在于：在培养基上接种后连续进行菌丝体培养和子实体培养，在子实体培养阶段补充 营养液；
[0008] 所述培养基各组分的重量份为：玉米粉90~120、土豆90~120、可溶性淀粉20~ 50、蔗糖15~25、酵母粉5~15、蛋白胨5~10、琼脂15~20、磷酸氢二钾0? 03~0? 06、 硫酸镁〇. 02~0. 03、维生素B10.0 1~0. 03 ;
[0009]所述营养液各组分的重量份为：葡萄糖15~25、氨基酸3~5、蚕蛹煮出液3~5、 鸡蛋3~5、磷酸氢二钾0. 03~0. 05、硫酸镁0. 03~0. 05、维生素B10.0 1~0. 03,加水至 1000ml，调 pH 至 6 ~7。
[0010] 进一步，所述在子实体培养阶段补充营养液的方法包括：在菌丝体成熟后到采收 第一批子实体前，喷洒营养液1~3次，采收第一批子实体后喷洒营养液1次，至采收第二 批子实体前，喷洒营养液1~3次。
[0011] 更进一步，作为优选的方案，是在菌丝体成熟后到采收第一批子实体前，喷洒营养 液2次，采收第一批子实体后喷洒营养液1次，至采收第二批子实体前，喷洒营养液2次。
[0012] 本发明种植蛹虫草子实体所使用的菌株为：《卫生部关于批准蛹虫草为新资源食 品的公告2009年第3号》所规定的子囊菌亚纲、麦角菌科、虫草属菌种的蛹虫草拟青霉。在 种植蛹虫草全过程中，其他方面如菌种的分离、纯化和培养，接种方法，温湿度控制，光照掌 握，通风等等，均可采用或参照已有技术或常规方法进行。
[0013] 本发明由于接种后就要一直连续地在同一培养基上完成菌丝体培养和子实体培 养的整个过程，因而需要培养基具有足够的营养，而且还要确保这些营养成分在足够长时 间不发生变质，在整个过程中能够均衡提供营养。本发明中的玉米粉由于含有较坚硬的皮， 可以在足够长时间慢慢变化而逐渐释放营养成分；蔗糖被利用需要有一个转化过程，考虑 到菌丝的长势、菌丝生长速度和栽培成本，蔗糖是最好的碳源；考虑到蛹虫草适合的碳源和 氮源很多，所以本发明培养基采用多种碳源和多种氮源，以确保蛹虫草的健康生长，比起使 用单一碳源和单一氮源的培养基，本发明方法培养的菌丝体和子实体品种更好。
[0014] 考虑到菌丝体成熟后，培养基中的营养成分已经有所消耗，如果不补充营养的话， 对后期子实体的生长不利。子实体需要比菌丝体需要更多的营养，而且要快速补充。所以 本发明的营养液采用了可被直接利用的葡萄糖、氨基酸、蚕蛹煮出液和鸡蛋。
[0015] 种植实验证明，使用本发明的培养基和营养液，按照本发明的方法，菌丝体和子实 体生长良好，产量高，子实体胞外多糖、腺苷、虫草素和虫草酸的含量均有所提高，多糖和腺 苷含量大大高于卫生部标准，虫草素和虫草酸也比已有技术高。
【具体实施方式】
[0016] 培养基各组分的重量份为：玉米粉100、土豆100、可溶性淀粉30、蔗糖20、酵母粉 10、蛋白胨8、琼脂20、磷酸氢二钾0. 05、硫酸镁0. 03、维生素B10.0 2 ;灭菌、冷却待用。
[0017] 营养液各组分的重量份为：葡萄糖20、氨基酸4、蚕蛹煮出液4、鸡蛋4、磷酸氢二钾 0. 04、硫酸镁0. 05、维生素B10.0 2,加水至1000ml，调pH至6. 5~7 ;灭菌、冷却待用。
[0018] 在培养基上接种后进行菌丝体培养，在菌丝体成熟后，由白色逐渐转为桔黄色，即 进入子实体培养。在进入子实体培养三天之内喷洒营养液1次，以后在第15~20天再喷 洒营养液1次，当子实体高度达到6~IOcm子实体顶端膨大即可采收烘干。子实体培养时 间30天左右。
[0019] 采收后，立即对在培养基喷洒营养液1次，继续培养，在第20天左右又长出第二批 子座后再喷洒营养液1次，在采收第二批子实体前10~15天再喷洒营养液1次，之后等待 采收第二批子实体。
[0020] 在菌种的分离、纯化和培养，接种方法，温湿度控制，光照掌握，通风等等，均采用 或参照已有技术或常规方法进行。
[0021] 采收的子实体经检测，结果如下表1。
[0022] 表 1
[0024] 采收的子实体经检测结果含虫草素2. 6mg/g，比已有技术CN103609329A的最高 2. lmg/g 还高。
【主权项】
1. 活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法，采用固体栽培法，其特征在于：在培养基 上接种后连续进行菌丝体培养和子实体培养，在子实体培养阶段补充营养液； 所述培养基各组分的重量份为：玉米粉90~120、土豆90~120、可溶性淀粉20~50、 蔗糖15~25、酵母粉5~15、蛋白胨5~10、琼脂15~20、磷酸氢二钾0. 03~0. 06、硫酸 镁 0? 02 ~0? 03、维生素B1O. 01 ~0? 03 ; 所述营养液各组分的重量份为：葡萄糖15~25、氨基酸3~5、蚕蛹煮出液3~5、鸡 蛋3~5、磷酸氢二钾0. 03~0. 05、硫酸镁0. 03~0. 05、维生素B1O. 01~0. 03,加水至 1000ml，调pH至 6 ~7。2. 根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在菌丝体成熟后到采收第一批子实体前， 喷洒营养液1~3次，采收第一批子实体后喷洒营养液1次，至采收第二批子实体前，喷洒 营养液1~3次。3. 根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：在菌丝体成熟后到采收第一批子实 体前，喷洒营养液2次，采收第一批子实体后喷洒营养液1次，至采收第二批子实体前，喷洒 营养液2次。
【专利摘要】活性物含量高的蛹虫草子实体种植方法，采用固体栽培法，在培养基上接种后连续进行菌丝体培养和子实体培养，在子实体培养阶段补充营养液；培养基组分为：玉米粉、土豆、可溶性淀粉、蔗糖、酵母粉、蛋白胨、琼脂、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B1；营养液组分为：葡萄糖、氨基酸、蚕蛹煮出液、鸡蛋、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B1。使用上述培养基和营养液，子实体生长良好，产量高，子实体胞外多糖、腺苷、虫草素和虫草酸的含量均有所提高，多糖和腺苷含量大大高于标准，虫草素和虫草酸也比已有技术高，而且方法简单，操作方便。
【IPC分类】C05G3/00, A01G1/04
【公开号】CN104885787
【申请号】CN201510337712
【发明人】蔡卫东, 覃振华
【申请人】桂林丰润莱生物科技有限公司
【公开日】2015年9月9日
【申请日】2015年6月17日