一种龙牙百合快速繁殖方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物药材龙牙百合种子繁育扩种方法，该技术直接应用于生物药材繁育扩种，尤其涉及一种龙牙百合快速繁殖方法。
【背景技术】
[0002]龙牙百合，栽种于江西(万载、永丰中西山)、湖南(隆回、安化)等地，其中江西万载白水乡尤为知名，龙牙百合在万载是久负盛名的物产，种植历史据县志记载可追溯至宋朝，其龙牙百合产品是历朝历代的贡品；龙牙百合是白花百合中的优良品种，也是营养最好的品种。百合(白花百合)鳞茎球形，横径2-2.4厘米，鳞片披针形，白色，曝晒时呈黄白色或稍带粉红色。淀粉含量高，营养丰富，味淡不苦，地上茎高约100厘米，叶散生，倒披针形。花乳白色有香气，能结实产生种子。
[0003]龙牙百合鳞片是最为常用的快速繁殖的组培材料。研究表明，龙牙百合叶片和子房也可以再生形成小苗。以鳞茎为外植体进行再生虽然取材相对较方便，但由于鳞茎带菌严重，常常导致消毒不彻底，培养过程中反复污染现象非常严重，增大工作量，而且以鳞片为外植体再生效率并不十分理想。
【发明内容】
[0004]本发明所要解决的技术问题是提供，提供一种龙牙百合快速繁殖方法。本发明的方法再生效率增高，污染率降低，通过调节培养基条件提高了诱导率，缩短了再生周期，此再生体系适用于多个龙牙百合品种。
[0005]本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤:
[0006]I)取露地种植2?3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片；
[0007]2)将步骤I)中获得的种球鳞片浓度为5%?7%的高锰酸钾溶液中浸泡15?20min后，用清水洗净；
[0008]3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；
[0009]4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；
[0010]5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。
[0011]本发明的有益效果是:本发明的方法利用龙牙百合的幼嫩小花瓣片为外植体，直接再生大量不定芽，继而得到再生苗，与使用鳞片作为外植体进行组织培养相比，本发明的方法再生效率增高，出芽率为100%左右，平均每个外植体诱导再生的芽数量可达20个左右，污染率降低，培养过程中不会出现反复污染的情况，通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期。
[0012]在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
[0013]进一步，所述MS 固体培养基为 MS+BA1.8 ?2.2mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，鹿糖28?32g/L，琼脂4?6g/Lo
[0014]进一步，所述芽伸长培养基为MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28?32g/L，琼脂4?6g/L。
[0015]进一步，所述生根培养基为MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，pH5.8，蔗糖28 ?32g/L，琼脂 4 ?6g/L。
[0016]进一步，步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0017]进一步，步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0018]进一步，步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
【具体实施方式】
[0019]以下结合实施例对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0020]实施例一
[0021]—种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤:
[0022]I)取露地种植2个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片；
[0023]2)将步骤I)中获得的种球鳞片浓度为5%的高锰酸钾溶液中浸泡15min后，用清水洗净；
[0024]3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；
[0025]4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；
[0026]5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。
[0027]所述MS 固体培养基为 MS+BA1.8mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，琼脂 4g/L。
[0028]所述芽伸长培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，琼脂 4g/L。
[0029]所述生根培养基为MS+BA0.3mg/L+NAA0.8mg/L，pH5.8，蔗糖 28g/L，琼脂 4g/L。
[0030]步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0031]步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0032]步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0033]实施例二
[0034]一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤:
[0035]I)取露地种植2.5个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片；
[0036]2)将步骤I)中获得的种球鳞片浓度为6%的高锰酸钾溶液中浸泡18min后，用清水洗净；
[0037]3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；
[0038]4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；
[0039]5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。
[0040]所述MS 固体培养基为 MS+BA2.2mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，琼脂 6g/L。
[0041]所述芽伸长培养基为MS+BA0.7mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，琼脂 6g/L。
[0042]所述生根培养基为MS+BA0.7mg/L+NAAl.2mg/L，pH5.8，蔗糖 32g/L，琼脂 6g/L。
[0043]步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0044]步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0045]步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0046]实施例三
[0047]一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤:
[0048]I)取露地种植3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片；
[0049]2)将步骤I)中获得的种球鳞片浓度为7%的高锰酸钾溶液中浸泡20min后，用清水洗净；
[0050]3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块；
[0051]4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养；
[0052]5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。
[0053]所述MS 固体培养基为 MS+BA2.0mg/L+NAAl.0mg/L，pH5.8，蔗糖 30g/L，琼脂 5g/L。
[0054]所述芽伸长培养基为MS+BA0.5mg/L+NAAl.0mg/L, pH5.8，蔗糖 30g/L，琼脂 5g/L。
[0055]所述生根培养基为MS+BA0.5mg/L+NAAl.0mg/L, pH5.8，蔗糖 30g/L，琼脂 5g/L。
[0056]步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0057]步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0058]步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
[0059]以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，包括如下步骤: 1)取露地种植2?3个月的龙牙百合种球，选取健康完好的种球，剥除外层鳞片； 2)将步骤I)中获得的种球鳞片浓度为5%?7%的高锰酸钾溶液中浸泡15?20min后，用清水洗净； 3)将步骤2)得到的种球鳞片剥取种芽，平放在MS固体培养基上进行不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块； 4)将步骤3)得到的组织块制成纵分组织块，在芽伸长培养基上进行芽伸长培养； 5)待步骤4)得到的不定芽伸长并形成籽球时，进行切分后放入生根培养基中进行诱导生根培养，获得龙牙百合种球。2.如权利要求1所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述MS固体培养基为 MS+BA1.8 ?2.2mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，琼脂 4 ?6g/L。3.如权利要求2所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述芽伸长培养基为 MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，琼脂 4 ?6g/L。4.如权利要求3所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，所述生根培养基为MS+BA0.3 ?0.7mg/L+NAA0.8 ?1.2mg/L，ρΗ5.8，蔗糖 28 ?32g/L，琼脂 4 ?6g/L。5.如权利要求4所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤2)中，所述诱导生长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。6.如权利要求5所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤3)中，所述芽伸长培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。7.如权利要求6所述的一种龙牙百合快速繁殖方法，其特征在于，步骤4)中，所述诱导生根培养的条件为:温度25°C，光照:14光期/7暗期。
【专利摘要】本发明涉及一种龙牙百合快速繁殖方法，包括如下步骤：取龙牙百合种球，不定芽的诱导生长培养，获得带有不定芽丛的组织块，诱导生根培养获得龙牙百合幼苗。本发明的有益效果是：本发明的方法再生效率增高，出芽率为100％左右，污染率降低，培养过程中不会出现反复污染的情况，通过调节培养基条件可提高诱导率并缩短再生周期，有效提高龙牙百合的品质和产量。
【IPC分类】A01H4/00
【公开号】CN105210877
【申请号】CN201510682816
【发明人】韦丽
【申请人】韦丽
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月20日