一种防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法，能从这些被遗弃的废物中提取出防治烟草病毒病的活性成分，不但能够解决大量的核桃青皮堆积问题，实现“变废为宝”，而且也能有效防治烟草病毒病，从而一举两得，与现有技术相比，本发明针对烟草病毒病的防治而设计，采用提取物兑水后喷洒在烟草植物叶面上，能够有效的防治烟草病毒病，其制作方法简单，成本低廉，具有推广应用的价值。
【专利说明】
一种防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及一种植物成分提取方法，尤其涉及一种防治烟草病毒病的核桃青皮提 取物制备方法。
【背景技术】
[0002] 核桃为胡桃科核桃属落叶乔木，核桃青皮，又名青龙衣，为未成熟的核桃最外层的 一层青皮切制而成，核桃青皮为核桃未成熟时外部的一层厚厚的绿色果皮，其味苦、涩、微 寒、有毒。《本草纲目》记载着核桃青皮具有止痛作用;《山东中草药手册》中有"解毒消肿"的 说法;在《陕西中草药》中亦有"治牛皮癣、鱼鳞癣、荷叶癣及秃疮等症"的记载。现代医学研 究表明，核桃青皮提取物对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌有抑制作用，对朱砂叶螨、板栗 叶螨有较强杀螨活性，对小麦赤霉病菌等有抑制作用。除了上述作用之外，核桃青皮还具有 抗菌和抗病毒活性。而商洛作为全国知名的核桃之乡，每年都有大量的核桃青皮被倒入田 野、河流或者田地，这在一定程度上不仅污染了河流也带来了较大的环境问题。如果能从这 些被遗弃的废物中提取出防治烟草病毒病的活性成分，不但能够解决大量的核桃青皮堆积 问题，实现"变废为宝"，而且也能有效防治烟草病毒病，从而一举两得。另外，已有研究中， 具有多种方法能够制备核桃青皮的提取物，然而，不同提取工艺制备的核桃青皮提取物的 作用不尽相同。现有技术中，对于核桃青皮提取物防治烟草病毒的技术，并未出现相关报 道。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种防治烟草病毒病的核桃青皮 提取物制备方法。
[0004] 本发明通过以下技术方案来实现上述目的：
[0005] 本发明包括以下步骤：
[0006] (1)取7~9月份的青皮核桃并将其青皮剥离，将核桃青皮置于烘箱内烘干并粉碎， 过80~100目筛，称取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，过滤，滤液浓 缩回收其中的乙醚，浓缩后的膏体即为核桃青皮提取物I;
[0007] (2)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入95 %乙醇，而后放入离心罐中浸取3次， 每次静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物II;
[0008] (3)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入丙酮，而后放入离心罐中浸取3次，每次 静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物III;
[0009] (4)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入离心罐中浸取3次， 每次静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物IV;
[0010] (5)将步骤（1)、步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中所得浸膏混合至搅拌机中搅拌至充 分混合，然后用等质量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等体积的石油醚萃取而获得萃 取物为核桃青皮提取物V。
[0011]具体地，所述步骤（1)中的核桃青皮粉末与石油醚的比例为1:2.5;所述步骤(2) (3)(4)中的核桃青皮粉末与相应溶剂的比例为1:5。
[0012]本发明的有益效果在于：
[0013] 本发明是一种防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法，与现有技术相比，本 发明针对烟草病毒病的防治而设计，采用提取物兑水后喷洒在烟草植物叶面上，能够有效 的防治烟草病毒病，其制作方法简单，成本低廉，具有推广应用的价值。
【具体实施方式】
[0014] 下面对本发明作进一步说明：
[0015] 本发明包括以下步骤：
[0016] (6)取7~9月份的青皮核桃并将其青皮剥离，将核桃青皮置于烘箱内烘干并粉碎， 过80~100目筛，称取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，过滤，滤液浓 缩回收其中的乙醚，浓缩后的膏体即为核桃青皮提取物I;
[0017] (7)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入95 %乙醇，而后放入离心罐中浸取3次， 每次静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物II;
[0018] (8)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入丙酮，而后放入离心罐中浸取3次，每次 静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物III;
[0019] (9)取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入离心罐中浸取3次， 每次静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物IV;
[0020] (10)将步骤(1)、步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中所得浸膏混合至搅拌机中搅拌至充 分混合，然后用等质量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等体积的石油醚萃取而获得萃 取物为核桃青皮提取物V。
[0021] 具体地，所述步骤（1)中的核桃青皮粉末与石油醚的比例为1:2.5;所述步骤(2) (3)(4)中的核桃青皮粉末与相应溶剂的比例为1:5。
[0022] 分别将核桃青皮提取物I、II、III、IV、V用5% DMS0溶液配制成1，5，10，15，20mg/mL 的溶液备用；
[0023] 各取感染普通烟草花叶病毒病、烟草黄瓜花叶病毒病以及烟草马铃薯Y病毒病的 烟草植株若干，接种前取发病的鲜叶片5g研磨、过滤、定容至100mL备用；
[0024] 在步骤（1)中制备的样品提取液中加入步骤(2)中病毒提取液lmL，混匀，备用，同 时以5 %MDS0中加入步骤(2)中病毒提取液lmL为对照，以市售抗病毒农药为阳性对照；
[0025]抗病毒活性的测定:选择健康、生长旺盛的6-8叶期心叶烟，左半叶接种步骤(3)中 样品与病毒溶液，右半叶接种对照溶液，每处理接种8-10个叶片，重复3次，3天后分别统计 枯斑数目，抑制率计算公式为：
[0026] 抑制率（％ )=(对照平均每叶枯斑数-处理每叶枯斑数)/对照平均每叶枯斑数X 100%
[0027] 不同提取物抗病毒试验结果如下：
[0028] 表1不同溶剂的核桃青皮提取物对烟草花叶病毒的抑制率
[0030]表2不同溶剂的核桃青皮提取物对烟草黄瓜花叶病毒的抑制率
[0033]表3不同溶剂的核桃青皮提取物对烟草烟草马铃薯Y病毒的抑制率
[0035]有上述表中实验结果可知，提取物IV对三种病毒的作用效果最明显，提取物I作用 最弱;对烟草花叶病毒作用最强，烟草马铃薯Y病毒作用最弱。总体来说，制备的核桃青皮不 同溶剂提取物对烟草花叶病毒、烟草黄瓜花叶病毒以及烟草马铃薯Y病毒均有不同程度的 抑制作用。
[0036]以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征及本发明的优点。本行业的技术 人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本 发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变 化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其 等效物界定。
【主权项】
1. 一种防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1) 取7~9月份的青皮核桃并将其青皮剥离，将核桃青皮置于烘箱内烘干并粉碎，过80 ~100目筛，称取一定量的核桃青皮粉末以石油醚在50°C下回流提取2h，过滤，滤液浓缩回 收其中的乙醚，浓缩后的膏体即为核桃青皮提取物I; (2) 取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入95%乙醇，而后放入离心罐中浸取3次，每次 静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物II; (3) 取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入丙酮，而后放入离心罐中浸取3次，每次静置 24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物III; (4) 取步骤（1)中核桃青皮滤渣若干，加入乙酸乙酯，而后放入离心罐中浸取3次，每次 静置24h小时，再离心15min，而后浓缩至膏体备用，即为核桃青皮提取物IV; (5) 将步骤（1)、步骤(2)、步骤(3)、步骤(4)中所得浸膏混合至搅拌机中搅拌至充分混 合，然后用等质量的丙酮水溶解至100mg/mL，然后再用等体积的石油醚萃取而获得萃取物 为核桃青皮提取物V。2. 根据权利要求1所述的防治烟草病毒病的核桃青皮提取物制备方法，其特征在于:所 述步骤（1)中的核桃青皮粉末与石油醚的比例为1:2.5;所述步骤(2)(3)(4)中的核桃青皮 粉末与相应溶剂的比例为1:5。
【文档编号】A01P1/00GK105851064SQ201610211028
【公开日】2016年8月17日
【申请日】2016年4月6日
【发明人】穆耀辉, 何念武, 陈明山, 黄金辉, 赵艳艳, 李堆淑, 王学军
【申请人】陕西省烟草公司商洛市公司, 商洛学院