多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方法
【专利摘要】本发明公开了多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方法，是将剪切过两次或两次以上的甘薯脱毒试管苗母株通过灌入15?20ml液体培养基培养的方法或将剪切后的试管苗母株连同根部一同夹入灌有20ml固体培养基的培养瓶中培养的方法对其进行再利用。本发明的有益效果为：本发明提供的多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方法，省工省时，减少消耗，提高了工作效率和经济效益，实践证明，经处理的母株生长周期为15?20天，扩繁倍数可达6?8倍，污染率可有效控制在3%以内，瓶苗生长势健壮，适用于工厂化繁育甘薯脱毒试管苗。
【专利说明】
[0001] 多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方法
技术领域
[0002] 本发明涉及农业组培快繁技术领域，具体涉及多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再 利用方法。
【背景技术】
[0003] 据统计，我国的甘薯总种植面积保持在620万公顷左右，总产量稳定在1亿吨以上， 分别占全世界的70%和80%。我国己成为世界上最大的甘薯生产国。在全国的农作物生产中， 甘薯仅次于水稻、小麦和玉米，居第4位。我国甘薯分布很广，南起南海诸岛，北至内蒙古，西 北达陕西、陇南和新疆一带，东北经辽宁、吉林己延展到黑龙江南都，西南抵减南和云贵高 原。
[0004] 病毒病是影响农作物产量和品质的主要病害之一，尤其对于以无性繁殖方式进行 繁育的作物，如马铃薯、甘薯、草莓及果树花卉等，经多代无性繁殖会使植物体内病毒大量 积累，造成种性退化、生长抑制、产量下降及品质变劣，而利用茎尖培养辅以化学或高温处 理，可以较好地起到植物脱病毒而获得脱毒苗的效果。随着脱毒技术的推广应用，甘薯的脱 毒组培生产也以前所未有的速度迅猛发展，但在快繁生产中繁殖系数低，甘薯脱毒试管苗 生产成本居高不下，严重制约了脱毒甘薯原原种生产及甘薯脱毒种薯的普及面积。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了多次剪切后的甘薯脱毒苗 母株的再利用方法。
[0006] 为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的 再利用方法，包括以下步骤： 1) 培养基的配置： 普通MS培养基添加30%的蔗糖； 2) 母株处理： 在超净工作台上无菌条件下接种时，剪刀在基础苗瓶内剪切后茬高在l-2cm之间，即 留有1-2个茎节，得到剪切后的试管苗母株，将剪切后的试管苗母株采用处理一或处理二的 方法进行处理，处理一的方法为直接向培养瓶中灌入l〇-15ml液体培养基进行再次培养，处 理二的方法为将剪切后的试管苗母株连同根部一同夹入灌有20ml固体培养基的培养瓶中 培养； 3) 扩繁或移栽： 将经过处理二处理的母株培养20-25天后，进行再次扩繁，繁殖系数可达到6-8倍;或将 经过处理一处理的母株生长15-20天后直接移栽到防虫网室内生产甘薯原原种。
[0007] 本发明的有益效果为：本发明提供的多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方 法，省工省时，减少消耗，提高了工作效率和经济效益，实践证明，经处理二处理过的母株生 长周期为15-20天，扩繁倍数可达6-8倍，污染率可有效控制在3%以内，经处理一处理过的母 株，瓶苗生长势健壮，生长周期短移栽成活率可达90%以上，适用于工厂化繁育甘薯脱毒试 管苗。
【具体实施方式】
[0008] 实施例1: 甘薯脱毒苗母株再利用的生产方法，包括如下步骤： 1) 培养基的配置:普通MS培养基添加30%的蔗糖； 2) 母株处理:在超净工作台上无菌条件下接种时，剪刀在基础苗瓶内剪切后茬高在 l-2cm之间，即留有1-2个茎节，处理一：向培养瓶中灌入10-15ml液体培养基;处理二:将 其连同根部一同夹入灌有20ml固体培养基的培养瓶中培养； 3) 扩繁:将处理二处理过的母株生长20-25天后再次进行扩繁； 4) 移栽:将处理一处理过的母株生长15-20天后直接移栽到防虫网室内生产甘薯原原 种。
[0009] 具体步骤： 将剪切过两次或多次母株瓶苗的茎基部连同根部一同夹入灌有15ml固体培养基的培 养瓶中培养，培养20-25天后进行再次剪切，扩繁倍数可达6-8倍。
[0010] 将剪切过两次或多次母株瓶苗的茎基部灌入10-15 ml液体培养基，培养15-20天 后直接进行移栽，移栽成活率可达90%以上，与普通瓶苗相当. 优点:在甘薯脱毒苗工厂化生产过程中，初次剪切的瓶苗在培养25-30日后方可进行再 次扩繁，其繁殖系数可以达到6-8倍，经剪切后留下的母株再次培养35-45日后，扩繁系数可 达到2-3倍，再将剪切后的母株进行第二次留茬，扩繁系数仅能达到1-1.5倍，再次剪切后的 母株进行第三次留茬，如不经任何处理，其再次利用率只有10%甚至更低，其他90%以上均要 被淘汰，在实际生产中，基本上是将母株剪切两次后便不能再利用，无形中增加了甘薯脱毒 试管苗生产成本，因此本发明直接将二次剪切后母株连同剩余的固体培养基保留做母株， 并将其连同根部一同夹入灌有20ml固体培养基的培养瓶中培养，并将经多次剪切后的母株 灌入15-20ml液体培养基进行再次培养，实践证明，经处理二处理的瓶苗生长周期短，一般 培养20-25天后便可进行再次扩繁且繁殖系数可以达到6-8倍，污染率有效控制在3%以内； 经处理二处理过的经多次剪切后的母株，培养15-20天后，直接移栽到温室生产原原种，其 移栽成活率可以达到90%。
[0011]目前在甘薯脱毒苗生产过程中，试管苗剪切后的母株不进行再利用直接淘汰，或 利用一次便进行淘汰，本发明根据生产中的实际情况，对多次剪切后的母株进行不同处理， 采用将多次剪切后的试管苗母株通过灌入10-15 ml液体培养基或直接连同根部一起夹入 20ml固体培养基上进行再培养的方法，对甘薯脱毒试管苗剪切后的母株进行不同途径的再 利用，可有效提高甘薯脱毒试管苗繁殖倍数，降低甘薯脱毒苗生产成本。在生产实践中，通 过使用该方法，可以使繁殖倍数由5倍以上提高至6倍以上，同时，切繁3次后，母株不进行再 利用的10瓶可繁殖6250瓶，而将母株进行再利用后，可繁殖11710瓶，如表1所示为利用与不 利用试管苗母株的繁殖倍数比较，可多繁殖5460瓶，效率提高了87.36%。从生产成本考虑， 固体培养基生产成本为0.051元/瓶，每瓶装40ml固体培养基，人工转接费为0.6元/瓶，母株 不进行再利用，10瓶转借接四次可以繁殖6250瓶左右的瓶苗，累计需要固体培养基7810瓶， 人工转接费用为7810X0.6元=4686元，繁殖6250瓶苗平均每瓶的人工及培养基成本为 (0.051 X7810+7810 X 0.6)/6250=0.81元/瓶;母株进行再利用，10瓶转接四次可以繁殖 11710瓶左右的瓶苗，累计需要固体培养基13980瓶，（13980X0.051 + 13980X0.6)/1170= 0.79元/瓶;两者相比生产成本利用母株较不利用母株降低了（0.81-0.79)/0.81=2.5%。
[0012] 表1
[0013] 将剪切过的根茬试管苗直接夹入20ml固体培养基内作为基础苗进行扩繁，可达到 如下效果：提高繁殖倍数1倍多，有效加快了繁殖速度，甘薯脱毒苗繁殖效率提高了 87.36%，缩短了繁育周期，成本有效降低了 2.5%;将在剪切过的根茬试管苗内直接添加10-15ml液体培养基作为下地苗，可达到如下效果，瓶苗生长周期由45天缩短到15-20天，转接 用工费用为0.2元/瓶，较新接种的瓶苗降低0.4元/瓶，移栽成活率有效控制在90%以上。 [0014]最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可 以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的 保护范围之内。
【主权项】
1.多次剪切后的甘薯脱毒苗母株的再利用方法，其特征在于，包括以下步骤： 1) 培养基的配置： 普通MS培养基添加30%的蔗糖； 2) 母株处理： 在超净工作台上无菌条件下接种时，剪刀在基础苗瓶内剪切后茬高在l-2cm之间，即 留有1-2个茎节，得到剪切后的试管苗母株，将剪切后的试管苗母株采用处理一或处理二的 方法进行处理，处理一的方法为直接向培养瓶中灌入l〇-15ml液体培养基进行再次培养，处 理二的方法为将剪切后的试管苗母株连同根部一同夹入灌有20ml固体培养基的培养瓶中 培养； 3) 扩繁或移栽： 将经过处理二处理的母株培养20-25天后，进行再次扩繁，繁殖系数可达到6-8倍;或将 经过处理一处理的母株生长15-20天后直接移栽到防虫网室内生产甘薯原原种。
【文档编号】A01H4/00GK105993934SQ201610267714
【公开日】2016年10月12日
【申请日】2016年4月27日
【发明人】刘江娜, 张爱萍, 李东方, 赵亮, 张西英
【申请人】新疆生产建设兵团第六师农业科学研究所