专利名称：一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒的制作方法
技术领域：
本发明一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒涉及一种可同时快速检测一种或多种微生物的器件，可应用于生物学、医学及相关领域。
传统的微生物检测需要对细菌或病毒涂片、培养，经数小时或数天后记数检测，而应用单克隆抗体结合各种形式的放射免疫分析(RIA)、酶免疫分析(EIA)、荧光分析(FIA)、化学分析免疫发光(CIA)、生物发光免疫分析(BIA)等，足以检出临床标本中痕量的微生物抗原，如此便可免去细菌或病毒培养过程，直接完成微生物感染的快速诊断。
由于以胶体金检测微生物的试剂盒与传统的细菌或病毒涂片、培养检测相比，以及与放免、酶免、荧光分析、化学免疫发光等检测方法相比具有操作简便(一步检测即能完成)、和快速(只需数分钟)等优点。所以在微生物检测方面有巨大的发展潜力。
现有的微生物检测以传统的细菌或病毒涂片、培养等检测方法为主，其不足之处在于，第一操作烦琐复杂，如涂片法多需进行染色，培养法需要配置培养基且不同的细菌需要不同的培养基，然后按其所需的不同培养条件进行培养。这些方法需要数小时或数天来完成，耗时较长。第二，由于不同的细菌涂片或培养需要经不同的染料的着色，或者用不同的培养基及不同的环境要求进行培养，所以不可能一次操作同时检测多种微生物。第三，传统的方法在操作时要求较严格，以避免染菌干扰检测结果。第四，对于某些深部真菌感染的诊断，因为从血液或体液中培养的阳性率很低，故以传统方法检测较为困难。
放免分析(RIA)、酶免分析(EIA)、荧光分析(FIA)、化学分析免疫发光(CIA)等检测微生物相比传统检测方法要简单快速，但也需几小时，操作复杂，并对操作员要求较高。而且相关检测微生物的试剂盒也只能对微生物进行单项检测。
本发明的目的是提供一种一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒，它能快速地并且能一次对一种或一种以上微生物进行检测。
本发明的目的可通过下列技术方案实现一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒包括底板、胶体金垫、样品吸收垫、吸水垫和反应膜，其中，所述胶体金垫包被有标记了胶体金的用于捕获一种及一种以上待检微生物的抗原(或抗体)；所述反应膜为硝酸纤维素膜，其上固定有一条或一条以上检测带(T带)，和对照带(C带)，每条所述检测带上包埋有能捕获一种待检微生物的抗原(或抗体)，对照带上包埋有抗此抗原(或抗体)的另一种抗体(或二抗)。本发明一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒，是通过检测标本中微生物的抗原或抗体来检出微生物的，能快速检测，并且能一步检测一种或一种以上微生物。
在上述技术方案基础上，可被检测的微生物可以是大肠杆菌、肺炎链球菌、幽门螺杆菌、结核分支杆菌、念珠菌一种或一种以上的细菌，也可以是肺炎支原体、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒一种或一种以上病毒，或同时包括细菌和病毒。
本发明的优越性在于这种一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒与传统的检测相比，具有快速的优点，只需数分钟就能完成检测；与传统的检测相比，以及与放免、酶免、荧光分析、化学免疫发光等检测方法相比具有操作简便的优点，一步检测即能完成；由于具有操作简便的优点，因此对操作人员要求较低；由于省却了重复的操作与材料，所以其生产成本要低于各单项检测板相加之和的成本。
附图1，一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒的结构示意图。
附图2，一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒的外观示意图。
附图3，双阳性检测结果示意图。
在硝酸纤维素膜12的T带区域分别包埋有能捕获二种待检微生物的抗原(或抗体)(T带)16、17，C带区域包埋了抗此抗原(或抗体)的抗体(或二抗)18。
待检微生物为大肠杆菌、肺炎链球菌、幽门螺杆菌、结核分支杆菌、念珠菌、肺炎支原体、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒等微生物中的两项。
胶体金垫14上包被有标记了胶体金的用于捕获二种待检微生物的另一种抗原(或抗体)。
参看图2，标号21为下端吸水纸，反应时插入样品中，注意勿使液面超过max线22的箭头。23，24为检测带所在位置，25为对照带所在位置。
反应后1至2分钟即可观察到T区和C区相应位置出现紫红色条带，如果C区出现条带，则T区出现条带即表示所在位置代表的指标为阳性，未出现条带的位置即表示阴性。如果C区未出现条带，则表示该试剂盒失效。
参看图3，C区出现条带，T区出现两条条带，表明所测两项指标均为阳性。
权利要求
1，一种一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒，它包括底板、胶体金垫、样品吸收垫、吸水垫和反应膜，其特征在于所述胶体金垫包被有标记了胶体金的用于捕获一种及一种以上待检微生物的抗原(或抗体)；所述反应膜为硝酸纤维素膜，其上固定有一条或一条以上检测带(T带)，和对照带(C带)，每条所述检测带上包埋有能捕获一种待检微生物的抗原(或抗体)，对照带上包埋有抗此抗原(或抗体)的另一种抗体(或二抗)。
2，根据权利要求1所述的一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒，其特征在于，可被检测的微生物可以是大肠杆菌、肺炎链球菌、幽门螺杆菌、结核分支杆菌、念珠菌一种或一种以上的细菌，也可以是肺炎支原体、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒一种或一种以上病毒，或同时包括细菌和病毒。
全文摘要
本发明一步多检的胶体金检测微生物的试剂盒涉及一种可同时快速检测一种或多种微生物的器件，可应用于生物学、医学及相关领域。它包括底板、胶体金垫、样品吸收垫、吸水垫和反应膜，其中，所述胶体金垫包被有标记了胶体金的用于捕获一种及一种以上待检微生物的抗原(或抗体)；所述反应膜为硝酸纤维素膜，其上固定有一条或一条以上检测带(T带)，和对照带(C带)，每条所述检测带上包埋有能捕获一种待检微生物的抗原(或抗体)，对照带上包埋有抗此抗原(或抗体)的另一种抗体(或二抗)。本发明具有快速、简便、成本低、对操作人员要求较低的优点。
文档编号C12Q1/04GK1390949SQ02112230
公开日2003年1月15日 申请日期2002年6月25日 优先权日2002年6月25日
发明者张涛, 李宾, 彭永济, 龚丹, 周军, 任一萍 申请人:上海晶泰生物技术有限公司