专利名称：源于商陆科植物的提取物的植物性果品保鲜剂、制备方法及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及到植物性无公害果品保鲜剂技术领域，特别涉及到以植物商陆的抗菌活性化合物商陆皂甙和抗病毒蛋白为主要成分研制成的无公害果品保鲜剂、制备方法及其用途。
背景技术：
从植物中寻找抑菌、杀菌活性物质是开发研制无公害新型农药的热点之一。Wilkings和Boa。rd(1989)报道有1389种植物有可能作为杀菌剂或植物生长调节剂，其中包含了许多不同类型的化合物。已开发的许多值得注意的抗菌药剂均是来自植物的天然次生代谢物质。我国有丰富的中药植物资源，筛选对果品储藏期间的主要病原菌有抑制作用并对果品保鲜有良好效果的中药植物，对于进一步研究植物源的果品保鲜剂，开发和利用宝贵的中药植物资源，有十分重要的意义。
在众多的植物资源中，商陆科(Phytolaccaceae)植物有其独特的开发利用价值。该科为草本或灌木，很少为乔木，全世界共17属，约120种，我国仅有2属4种，分别是商陆(Phytolacca acinosa Roxb)，垂序商陆(P.americana L.)、多雄蕊商陆(P.polyandraBatalin)和日本商陆(P.japonica Mokino)，其中，多雄蕊商陆为我国所特有物种，而最常见的是美洲商陆。
商陆属植物的干燥根被用作传统中药，其性味苦寒、有毒。用于治疗心肿胀满，二便不通和痛肿疮毒等症，在我国已经有2000多年的应用历史。在农业上，商陆肥大丰美的叶子被许多地方用作绿肥，肥力比常规的绿肥包括苜蓿的效果都好，商陆肥大的肉质的根，可以用来保持水土，改良土壤。近年来的系统研究表明，该属植物富含具有多种生理活性的三萜及其配糖体，Strauss A.，S.M.Spengel et al.1995年报道从美洲商陆根中分离出皂甙化合物.牛津植物化学(英文期刊)，38(4)861-865；Nielsen SE，Anthoni U，et al.1995年报道从Phytolacca rivinoides和Phytolacca bogotensis中分离出三萜皂甙，植物化学(英文期刊)，39(3)625-630；Susanne T.et al.1993年报道从Phytolaccadodecandra中分离得到的杀软体动物的皂甙，植物化学(英文期刊)，321167-1171；易杨华，黄翔1990年报道，从商陆中分离与鉴定了三种新皂甙，《药学学报》，25(10)745-749。亦含有抗真菌和抗病毒蛋白的许多研究，如陶应双等1991年报道，从商陆根中抗真菌蛋白的分离和特性研究，《云南植物研究》，13(4)417-424。以及具有增强免疫活性的商陆多糖活性的研究，如王洪斌等1993报道，从商陆多糖II体外对小鼠脾细胞增殖及产生集落刺激因子的影响，《药学学报》，28(7)490-493等。这些研究表明，商陆植物含有多种活性成分，而且作用对象也比较广泛。
商陆的应用前景十分可观，特别是商陆体内所含有的丰富的植物次生代谢物质，可以表现出多种生物活性。但是，长期以来，对商陆的开发利用仅限制在医药上，而且还没有形成明显的产业化优势。从商陆已经有的专利情况来分析，在我国，1985-2003年关于商陆的专利共有33项，其中涉及到活性成分分离的2项，农业的2项，生物工程的2项，其余的27项全部是医药上。农业上的2项分别是“一种对虾病害防治的新药及其制造方法”和“高效多穗玉米增产素及其制备方法”，都是属于复配制剂，在有效成份的确定上有一些困难，虽然主要成份包括有商陆，但不能明确其杀菌或者用于增产的活性成分，而且其质量标准也不太容易确定。因此，以商陆作为主要材料研究其杀菌活性，并在此基础上研制出植物性的无公害果品保鲜剂，可以综合开发利用商陆的植物资源，并为解决果品保鲜过程中采用化学保鲜剂所带来的毒副作用，研制具有独力知识产权的新的农药具有重要意义。
植物性果品保鲜剂的专利虽然已经有，(1)CN86101578，中草药复合半透膜保鲜剂及制造方法；(2)以茶叶的下脚料为原料，如茶末、茶粉、茶灰、茶梗等提取物研制的保鲜剂，CN1056679；(3)日本在我国也公开了含有2″-O-葡糖基异牡荆黄素作为有效成分的植物保鲜剂，CN1116486；(4)以植物大蒜、洋葱、姜、辣椒、萝卜、肉桂等植物汁液保鲜剂制备植物汁液保鲜剂的方法，CN1356052；(5)还有发明公开了一种以白菜、芹菜、胡萝卜、萝卜、玉米、麦麸、千里光、苹果、无花果、千金藤、蜂蜜为原料制备的纯天然植物保鲜剂纯天然植物保鲜剂，CN1372853等。但是这些专利没有涉及到植物商陆，而且除日本人在我国公开的专利明确是以异牡荆黄素作为有效成分外，其余的专利都没有以单一的植物提取物作为保鲜剂，也没有具体明确活性成分。
发明内容
发明目的本发明的目的是为了研究出一种天然的无公害植物性果品保鲜剂，用于柑橘和苹果等水果的储藏保鲜，而这种植物性果品保鲜剂的主要活性成分来自于野生植物商陆。本发明所研制出的植物性果品保鲜剂可以减少在果品储藏保鲜期间化学合成药物的使用量，保鲜效果好，对果品的实用价值无不良影响，对人无毒副作用，具有产品原料来源广泛，制造工艺简单，设备投资低，无二次环境污染等优点。
技术解决方案本发明涉及一种植物性的果品保鲜剂，它以商陆属植物的提取物商陆皂甙类化合物和抗真菌蛋白类化合物为主要组分，同时包括增效剂以及合适的载体所形成的组合物，其中主要组分的有效成分重量比为商陆皂甙类化合物0.2-8.0％，商陆抗病毒蛋白类化合物0.01-2.5％。这两种有效成分的比例差异一般会影响到总的保鲜效果，本领域的技术人员可以根据特殊需要而改变上述浓度，特别是有效成分之间的比例关系，实际操作者在应用的时候，可根据保鲜对象的特点和储藏环境条件，选择适当的稀释比例，以使其具有抗菌保鲜活性但对果品品质和风味没有伤害作用。
本发明中，选用咪唑霉，3(3，5二氯苯基)-1-异丙基氨基甲酰基乙内酰脲作为增效药剂，该药为广谱性接触性杀菌剂，与商陆皂甙类化合物混用有显著增效作用，其有效成分占整个组合物总量的1-15％。还本发明选用2，4-D的钠盐作为果品保鲜剂的增效剂，可以对果品的生理活性进行调节，并对该植物性果品保鲜剂产生明显的增效作用，其有效成分占整个组合物总量的0.01-1.2％，。
本发明组合物可与大量已知载体或(和)助剂混合，主要是一些乳化剂1-20％，分散剂1-10％。这些载体和(或)助剂的非限定性实例包括用于形成乳剂、水乳剂或其他液体制剂、也可以包括喷粉粉剂或固体制剂等。本发明采用的乳化剂不仅可以有效地增加有效成分的溶解度，而且可以对果品表面的蜡质层进行适当的净化，更有利于有效成分在果品表面的附着。这些剂型可根据不同的需要进行加工和配制。溶剂和稀释剂的非限定性实例包括水、脂族和芳族烃以及醇等。表面活性剂(乳化剂)可以根据需要进行选用，非限定性的实例包括不同离子型或非离子型的表面活性剂。本发明可选用的乳化剂为NP-10，其化学特性为烷基酚与环氧乙烷的混合物，主要是用于对有效成分的乳化，并在对果品进行处理时增加药剂的附着性。乳化剂的选择以增加有效成分的乳化和药剂的附着性为原则，下表中的乳化剂也可以适用于本保鲜剂的增效。
本发明中选用的分散剂是一种具有高黏度的(5-10Pa·s)物质，例如废蜜糖、纸浆废液的浓缩物等，通过机械作用，可将原来分散不理想的原药分散成胶体颗粒或者便于在水中很好溶解和分散。本发明使用的这些载体或者助剂的数量和类型都是农药领域里常规使用的。
在开发本果品保鲜剂的过程中，由于组合物包含没有经过完全纯化的工艺，因此本发明的活性组合物中还可以含有至少一种其它活性成分。这类活性成分可以是具有杀菌、抗病毒(杀虫杀螨或其它活性)的已知化合物(例如其它多糖类化合物)。可以理解的是上述至少一种其它活性成分与本发明活性化合物可产生或没有协同效应。
这里就发明的内容举一个优选方案进行说明，各有效成分质量比例的优选方案如表1所示表1本发明植物性果品保鲜剂的有效成分和质量比例的优选方案
表2本发明中所涉及的乳化剂
以商陆皂甙类化合物的组合物作为果品保鲜剂的制备方法，将商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡提取，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c；按质量比取商陆皂甙类化合物b，样品c，增效剂以及合适的载体充分混合、搅拌后，并用蒸馏水添加到一定含量，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
本植物性果品保鲜剂是用于柑橘、苹果和梨等果品的保鲜和对果品储藏期间所滋生的霉菌、细菌和病毒的控制。
本发明的优点1本发明的有效成分对柑橘绿霉病菌和核盘菌、灰霉菌等引起的病害有很好的控制效果，可以有效避免果品储藏期间由于真菌病害而导致的腐烂变质等。采用生长速率法对研制出的新保鲜剂进行生物活性评价，测定研制出的药剂对柑橘绿霉病菌的抑制效果，其EC50为20.3251mg/L，而对照咪唑霉的EC50为0.7798mg/L。
2本发明对果品处理后，可以有效减缓果品水分的丧失，延缓果品内的生理代谢过程，达到防病保鲜的综合作用。采用研制的制剂对蜜桔进行室内保鲜效果测定，结果表明，用研制的保鲜剂处理过的密桔，好果率比对照组明显增加，枯水率比对照组明显降低。从好果率来看，处理7d后，处理组的好果率为100％，而对照组为92.43％；储藏60d，对照组好果率为53.34％，处理组为80.10％，比对照组提高27.76％；从枯水率来看，处理后7d，对照组为4.54％，而处理组为2.05％，处理后60d，对照组为19.67％，而处理组为5.95％，处理组比对照组降低13.72％。
3本发明研制的果品保鲜剂毒性很低，食用安全。将研制出的保鲜剂与生产上推广应用杀菌及保鲜剂咪唑霉的毒性进行比较，两者对大鼠的LD50(mg/kg)分别是2600和1600，说明研制的保鲜剂比常规的药剂安全。本发明的主要有效成分来自天然植物，是绿色农药的范围，增效剂的用量很少而且本身的毒性很低，乳化剂本身没有生物活性。因此，该药剂是无公害的植物性果品保鲜剂，可以满足人们对绿色食品安全性的要求。
4本发明采用的乳化剂不仅可以有效地增加有效成分的溶解度，而且可以对果品表面的蜡质层进行适当的净化，具有除静电作用，更有利于有效成分在果品表面的附着。
5本发明中采用的原料来源广泛，产品制造工艺简单，设备投资较低，一般农药生产企业即可生产。在现在的市场和生产条件下，生产1kg的植物性保鲜剂，其原料和加工费用为6.92元，如果进行产业化生产，每kg再加上固定资产的投资成本和生产消耗成本以及企业利润大约为4.2元，因此作为商品的植物性保鲜剂，其出厂价格大约为10.18元人民币。与同类产品比较，多菌灵的kg价格大约为11.6元，而咪唑霉的kg价格大约为18.01元，因此，以商陆为原料生产的产品，其市场销售价格将不会高于目前市场上同类或相近产品的价格。
6、本发明是以商陆皂甙类化合物和商陆抗真菌蛋白类化合物为活性化合物，明确了目标对象，便于进行质量控制和效果评价，也为今后进一步筛选与新的抗菌和具有保鲜活性的化合物也提供了思路。
图1是植物性果品保鲜剂制备的工艺流程图。
具体实施例方式
本发明的一个实施例中提供了含有具有杀菌活性的商陆皂甙类化合物的组合物。另外还提供了以商陆皂甙类化合物的组合物作为果品保鲜剂的制备方法。
本发明的另一个实施例中，还提供了选择那种合适的商陆品种以及部位来作为本产品的主要原料来源。
在本发明的另一个实施例中，还提供了含有最高含量的具有杀菌活性和保鲜作用的有效成分的提取方法和含量检测。当然，与本发明相关领域的普通技术人员公知这些提取方法也可适用于其它种类的植物以及特殊需要。
本发明还有实施例涉及到如何使用本发明的组合物在对柑橘等果品进行储藏保鲜时的使用剂量。
本发明例举了植物性杀螨剂的有效成分和质量比例的说明本制剂具有良好的理化特性，并且在室温下储存12个月后是稳定的。
实施例1 商陆品种和应用部位的选择在本发明中，能够发挥杀菌保鲜作用的有效成分主要是商陆植物中所含有的皂甙类化合物，不同种类的植物由于其所含有的皂甙类化合物的多少，将直接影响到提取率的高低，对研制药品的经济效益将产生影响。商陆科(Phytolaccaceae)植物为草本或灌木，很少为乔木，全世界共17属，约120种，我国仅有2属4种，分别是商陆(Phytolacca acinosaRoxb)，垂序商陆(P.americana L.)、多雄蕊商陆(P.polyandra Batalin)和日本商陆(P.japonica Mokino)，其中，多雄蕊商陆为我国所特有物种，而最常见的是美洲商陆。本发明确定出垂序商陆(P.americana L.)是提取皂甙类化合物的理想植物，因为该植物的根系比较发达，生长迅速，适应性广，而且在同属的其它几种植物中，其提取率比较高，其商陆总皂甙的提取率为1.12％，而植物商陆的提取率为0.83％，多雄蕊商陆为0.77％，日本商陆为0.91％。此外，对于垂序商陆植株的不同部位来说，根的有效成分含量比较高，就本发明的目的来说，我们采用根来提取有效成分，是基于该植物的生长特点，以及在根中有效成分的含量相对比较稳定等。当然，该植物的其它部位也可以提取出有效成分。此外，产地及贮存期不同，商陆皂甙类化合物的含量亦不同。应以新鲜的根或者储存不超过2周的根作为生产这一药品的基本材料。
实施例2商陆皂甙类化合物的提取方法及含量检测商陆皂甙类化合物的提取方法很多，本发明涉及到商陆皂甙类化合物的提取方法为用乙醇为溶剂抽提新鲜的商陆根的粉碎物，浓缩后将提取物溶于水中，过滤除去不溶物后于水溶液中加石油醚进行两相萃取，亲酯性杂质转溶于亲酯性的石油醚中，而皂甙则仍留在水相中。萃取除去酯溶性杂质后的水相，再用亲水性强的丁醇进一步萃取，则皂甙转溶于丁醇中，而一些亲水性强的杂质仍留在水相。减压浓缩丁醇溶液，即获得乳白色(略显黄色)的商陆总皂甙粗品，其鉴定方法采用表面活性、溶血作用等皂甙的物理特性来确定总皂甙的存在。
当然还有许多有关商陆皂甙类化合物的提取方法，从活性的效果来看，这些提取方法所得到的产物也应该是有效的。
提取物中活性成分的鉴定对于研制植物农药进行登记注册所必不可少的。商陆皂甙类化合物和商陆抗真菌蛋白类化合物的总体含量是作为评价活性成分的依据，当然，增效剂的剂量也要进行监控，而对于商陆皂甙类化合物和商陆抗真菌蛋白含量的测定可以根据有关的文献报道进行，也可以根据有关管理部门的要求进行评价。
实施例3商陆抗真菌蛋白类化合物的提取方法将商陆根切碎，加入10倍量0.5mol/l的氯化钠溶液，用高速组织捣碎器匀浆，4℃放置过夜。匀浆液经纱布过滤去渣，滤液于1000rpm冷冻离心20min，上清液置3.5kD透析袋中于低温下对蒸馏水透析36h。离心去沉淀，上清波调pH5.5，上样于经20mmol/l柠檬酸缓冲液(pH 5.0)平衡的CM-Sephadex C50柱作层析。弃去流出液，用50mmol/l磷酸缓冲液(PB，pH7.0)和PB中加0.5mol/l氯化钠的二种溶液进行二步洗脱，即得到商陆抗真菌蛋白组合物的组分。
实施例4植物性果品保鲜剂的实施配方在以下范围内的各成分的组合物都可以组配出植物性果品保鲜剂，可以理解为在这一范围内进行搭配组合所产生的组合物都是植物性果品保鲜剂的实施例子。但随着有效成分的改变，保鲜效果会产生一些变化。非限定性范围如表3所示。
表3植物性果品保鲜剂有效成分和质量比例的非限定性范围
在以上组合物的有效范围内，其它化学的杀菌剂也可以达到增效作用，这里不作限定，但是凡是采用化学杀菌剂或保鲜药剂与商陆皂甙类化合物和商陆蛋白类化合物进行组配所形成的新的组合物，都应该视为以上非限定性范围。同样乳化剂和分散剂，如果用同类性质的产品作为替代物组合出新的果品保鲜剂，也视为属于以上非限定性范围。
植物性果品保鲜剂的研制工艺流程参见图1，在以下实施配方中具体加以说明。
优选实施配方1商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡24小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c。按质量比取样品b 1.4g，样品c 0.03g，50％咪唑霉7.2g，NP-10 2.2g，2，4-D 0.2g，充分混合后，加入到10g 10％的废蜜糖液水中充分搅拌，并用蒸馏水添加到100g，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
除上述优选实施配方之外，下面列举了另外4种配方，这些配方与优选配方一样，具有与发明目的很好的吻合性。
实施配方2商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡24小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c。按质量比取样品b 1.6g，样品c 0.03g，50％咪唑霉6.5g，NP-10 6g，2，4-D0.06g，充分混合后，加入到20g 10％的废蜜糖液水中充分搅拌，并用蒸馏水添加到100g，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
实施配方3商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡24小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c。按质量比取样品b 1.0g，样品c 0.04g，50％咪唑霉7.5g，NP-10 7g，2，4-D 0.04g，充分混合后，加入到20g 10％的废蜜糖液水中充分搅拌，并用蒸馏水添加到100g，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
实施配方4商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡24小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c。按质量比取样品b 2.0g，样品c 0.02g，50％咪唑霉4.0g，农乳2201 10g，2，4-D 0.05g，充分混合后，加入到20g 10％的纸浆废液水中充分搅拌，并用蒸馏水添加到100g，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
实施配方5商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡24小时，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c。按质量比取样品b 2.5g，样品c 0.03g，50％咪唑霉2.0g，NP-10 11g，2，4-D 0.05g，充分混合后，加入到20g 10％的废蜜糖液水中充分搅拌，并用蒸馏水添加到100g，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
实施例5、植物性果品保鲜剂的活性评价方法及其室内毒力室内活性测定采用生长速率法对研制出的新保鲜剂进行生物活性评价，结果如表4所示表4不同药剂对柑橘绿霉病菌的室内毒力测定药剂毒力回归方程(Y＝)R x2LC50±SE50(mg/L) LC99±SE99(mg/L)植物性果品保鲜剂1.9693+1.3132x 0.9279 3.9774*20.3251±1.2073120.0512±31.598145％咪唑霉 2.6635+2.6194x 0.9794 3.8161*0.7798±0.031626.0272±1.3441本实验用作对照的咪唑霉是氨基甲酰咪唑类杀菌剂中活性最强的品种，内吸性强，有良好的传导性能，对子囊菌引起的多种病害有特效，也可用于水果采收后的防腐保鲜。植物性果品保鲜剂作为植物性制剂，对环境无污染，对人畜无毒害，其LC50虽较45％咪唑霉的高，但仍能有效抑制柑橘绿霉菌的生长，在防霉保鲜过程中发挥重要作用。
保鲜效果采用研制的制剂对蜜桔进行室内保鲜效果测定，方法和主要效果如下根据实验需要，按贮藏果要求，在北碚团结村柑橘园采果选果。将供试药剂稀释100倍，配制成药液用来浸果，对照组用清水处理。浸药液和清水后，将果晾干，放入大磁盘中，用保鲜膜覆盖大磁盘。处理和对照各3次重复，每处理果重10kg，储藏温度25℃。分别于7、14、30和60d检查好果率、枯水率和腐果率，结果如表5所示。
表5植物性果品保鲜剂对密桔的保鲜效果储藏天好果率(％) 枯水率(％)腐果率(％)数对照组 处理组 对照组 处理组对照组 处理组(d)7 92.43 100.00 4.542.05 7.57 01484.65 94.10 6.282.88 15.35 5.93066.45 88.43 9.733.12 33.55 11.576053.34 80.10 19.67 5.95 46.66 19.90从表5看出，用植物性果品保鲜剂处理过的密桔，好果率比对照组明显增加，枯水率比对照组明显降低。从好果率来看，处理7d后，处理组的好果率为100％，而对照组为92.43％；储藏60d，对照组好果率为53.34％，处理组为80.10％，比对照组提高27.76％；从枯水率来看，处理后7d，对照组为4.54％，而处理组为2.05％，处理后60d，对照组为19.67％，而处理组为5.95％，处理组比对照组降低13.72％。因此，可以看出，采用植物性果品保鲜剂处理密桔，不仅可以提高好果率，而且可以显著降低枯水率，这对于密桔的保鲜处理有重要意义。
实施例6本保鲜剂的常规使用方法主要应用于柑橘、苹果和梨的保鲜储藏，特别适用于蜜桔、橙柑在常规条件下储藏保鲜。对蜜橘处理时药剂浓度为原药稀释400倍，橙柑、苹果和梨应使用原药稀释250倍处理。处理时，果实按常规方法采摘，之后以浸果方式进行药液处理，并以药液均匀浸透果面为度，适当凉干后，即可储存。保鲜处理时应在低温条件下效果更好。
实施例7本植物性果品保鲜剂的毒性评价将植物性果品保鲜剂(实施配方的优选方案)与生产上推广应用的杀菌和保鲜剂咪唑霉的毒性进行比较。选用160-200g大鼠，雌雄各半，分别进行预试(一次性灌服给药，体积均为2ml/100g体重)，测其全死剂量和全不死剂量。以全死剂量作为本次给药的初始剂量，按0.9的等比依次递减进行给药，连续观察7天，记录动物死亡数。结果如表6和表7。
表6植物性果品保鲜剂对大鼠LD50测定给药剂量(mg/kg)动物数(只) 死亡数(只)3285 20 202957 20 142661 20 112395 20 82156 20 2用SPSS软件统计，植物性果品保鲜剂一次灌服给予大鼠的LD50为2627.79mg/kg，其95％的可信区间为2417.04-2827.33mg/kg。
表7咪唑霉对大鼠LD50测定给药剂量(mg/kg) 动物数(只) 死亡数(只)2000 20 201800 20 161620 20 101458 20 51312.2 20 2用SPSS软件统计，咪唑霉一次灌服给予大鼠的LD50为1609.74mg/kg，其95％的可信区间为1514.34-1710.61mg/kg。
从以上结果可以看出，植物性果品保鲜剂与传统的化学药物保鲜剂的毒性低，因此更加安全。
权利要求
1.源于商陆科植物的提取物的植物性果品保鲜剂，其特征是以商陆属植物的提取物商陆皂甙类化合物和抗真菌蛋白类化合物为主要组分，同时包括增效剂以及合适的载体所形成的组合物，其中主要组分的有效成分占组合物总量的重量比为商陆皂甙类化合物0.2~8.0％，商陆抗病毒蛋白类化合物0.01~2.5％，。
2.根据权利要求1的植物性果品保鲜剂，其特征是增效剂选用含有杀菌活性的化合物咪唑霉、3(3，5二氯苯基)-1-异丙基氨基甲酰基乙内酰脲1-15％和/或2，4-D钠盐0.01-1.2％，。
3.根据权利要求1所述的植物性果品保鲜剂，其特征是所述的载体包括乳化剂1-20％，分散剂1-10％。
4.根据权利要求3所述的植物性果品保鲜剂，其特征是乳化剂是一种非离子和阴离子乳化剂的组合物，可选用乳化剂NP-10、农乳2201等。
5.根据权利要求3的植物性果品保鲜剂，其特征是分散剂选择废蜜糖液或纸浆废液。
6.权利要求1所述的植物性果品保鲜剂的制备方法，是将商陆新鲜的根经清洗后，切碎用乙醇侵泡提取，过滤，用旋转蒸发仪浓缩后检测得样品a，加入醋酸水解后，用氢氧化钠中和后离心，得商陆皂甙类化合物b，同时按蛋白质的提取方法提取并分离出商陆抗真菌蛋白，即样品c；按质量比取商陆皂甙类化合物b，样品c，增效剂以及合适的载体充分混合、搅拌后，并用蒸馏水添加到一定含量，包装后即得植物性果品保鲜剂的水乳剂。
7.将权利要求1的植物性果品保鲜剂用于柑橘、苹果和梨等果品的保鲜和对果品储藏期间所滋生的霉菌、细菌和病毒的控制。
全文摘要
一种源于商陆科植物的提取物的植物性果品保鲜剂、制备方法及用途，涉及植物源农药和果品保鲜剂技术领域，特别涉及到以植物商陆的抗菌活性化合物商陆皂甙和商陆抗真菌蛋白等为主要成分研制成的无公害果品保鲜剂及其研制方法。其特征是以商陆的提取物为主要成分，同时包括咪唑霉、2，4－D钠盐，乳化剂NP－10和蜜糖废液等经过一定的加工工艺研制而成。该植物保鲜剂可以应用到柑橘、苹果和梨的储藏保鲜，对于控制因柑橘绿霉病菌等引起的果品腐烂变质有特效，具有防病效果好，保鲜时间长，高效、低毒、无公害，不影响果品品质等特点。本发明中采用的原料来源广泛，产品制造工艺简单，设备投资较低，一般农药生产企业即可生产，产品的推广和普及将为果品的储藏保鲜提供新的无公害的绿色药品。
文档编号A23L3/3463GK1582683SQ200410022698
公开日2005年2月23日 申请日期2004年6月2日 优先权日2004年6月2日
发明者陈仕江, 丁伟, 金仕勇, 张勇强, 钟国跃, 马开森 申请人:重庆市中药研究院