专利名称：黑柄炭角菌仿生态工业化培养菌丝体工艺和培养基配方的制作方法
技术领域：
黑柄炭角菌的菌种和菌种中文名称是中国科学院微生物研究所检测鉴定，鉴定号〔2003〕微检字第003号，并编录到中国出版的《中国大型菌种》。菌株编号22X-2001，菌株由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏三十年，保藏中心登记入册编号CGMCC No.1038。于2003年11月21日开始馆藏。〔馆藏中心地址北京市海淀区中关村北一条13号，电话010 62542758 传真010 62537796〕黑柄炭角菌属于子囊菌亚门、炭角菌目Xylariales，炭角菌科Xylariaceae，炭角菌属Xylaria的黑柄炭角菌〔我国民间称鸡枞蛋、鸡茯苓、乌灵参〕(Xylaria nigripes)。黑柄炭角菌分子痤及菌核两部分。上部子痤单根和分枝，高3-15cm，长棒状或近圆柱状，内部实，近白色，外部暗色，灰褐色至黑褐色，顶端纯圆，长1.5-12cm，粗0.2-0.5cm，粗糙。柄长1.3-6cm，粗0.2-0.3cm，有纵皱，基部延伸呈根状。子囊壳突起，半埋生，呈长方椭圆形，680-780×310-400μm，孔口疣状，暗黑色。子囊呈圆筒状。孢子近椭圆形，不等边或半扁球形，褐色，4-5.2×3.6-3μm，菌株菌丝呈白色毛状、细长。
菌核与假根下端相连，卵圆形，表面粗糙，褐色至黑色，外部有一层黑褐色皮部，内部白色，直径5-7.5cm×3-6cm2黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)的技术背景黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一种生长在地下1M-20M黑翅土白蚁废巢中，天然黑柄炭角菌菌核人工很难采集，而且天然的菌丝体在不同外界条件下，会产生菌丝体的自溶，很难保存和实际应用，我们的办法是通过生物技术复制黑柄炭角菌菌丝体，得到实际应用。
3黑柄炭角菌仿生态工业化培养菌丝体工艺必须得到的相关技术支持内容a黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌种及纯化分离技术。
b黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌种复壮与保藏技术。
c黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)斜面培养技术。
d防止黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)变异退化技术。
4黑柄炭角菌仿生态工业化培养菌丝体工艺技术A固体栽培黑柄炭角菌菌核〔从菌核中分离新鲜的菌丝体〕拿到菌丝体“原种”经过移管纯化技术，获得菌株〔菌株号22X-2001〕放置在保藏室专用冰箱中备用。
B斜面母种在摄氏20度到26度环境下培养3至5天，然后将母种在500毫升三角瓶中培养3至5天，环境温度保持在摄氏20度到26度左右。
C将500毫升中的培养液和菌丝移入5000毫升的三角瓶中继续培养3至5天，环境温度保持在摄氏20度到26度左右。
D将5000毫升三角瓶中培养液和菌丝体移入一级种子培养罐中培养3至5天，温度控制在摄氏29度以下。
E通过传送管将一级种子培养罐中的菌丝体移到工业化培养罐中培养2至3天，温度控制在摄氏29度以下，通过镜检菌丝形态最后决定中止培养的时间。
F经工业化培养罐中培养成熟的菌丝体通过喷雾干燥工艺取得纯化的菌丝体。
G菌丝体通过灭菌处理和包装成为合格的产品。
权利要求
1黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一种可应用于人服用的食品、保健食品、药品生产的珍稀菌种，同时适用于宠物的饲料产品生产，该技术通过采集天然的黑柄炭角菌菌核进行菌种纯化分离、培养，得到纯化的天然菌丝体并采用特别的仿生态液体发酵技术生产黑柄炭角菌菌丝体，干燥处理后的菌丝体是一种特定的生物制品，为土黄色或淡土黄色粉末，气味有一种特别的菌香味。鉴定黑柄炭角菌菌丝体的主要特征是黑柄炭角菌菌丝体经薄层层析能显示三个亮蓝色荧光斑点。
2黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)菌种及纯化分离、提取、复壮技术是生产黑柄炭角菌菌丝体产品一个不可分割的技术，要求保护的相关配方如下菌种复壮采用固体培养技术，配方如下〔黄豆粉10-30克、葡萄糖20-40克、含水量60％、pH6-7、天然黑翅土白蚁活态时菌圃10-30克、甘薯粉200-300克〕500毫升三角瓶中分装450毫升，120度灭菌40分钟，待完全冷却后接入菌种，然后放置在专用恒温箱中〔23度〕培养，60天后可获得〔三角瓶内复壮的菌丝体〕。斜面培养技术，防止黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)变异退化技术。冰箱中保存的菌种，30分钟复苏后，在无菌室中用接种刀切成2毫米方块，接入新鲜的斜面培养基上，〔斜面培养基配方马铃薯200-300克、葡萄糖20-30克、蛋白胨4克、琼脂20克、净水1000毫升、pH5-6〕在25度温度下静止暗培养4-6天，等到菌丝长满斜面后入冰箱保存，温度保持3-6度。
3黑柄炭角菌工业化培养培养基配方及保护范围黄豆粉20g-30g/公斤玉米粉20g-30g/公万葡萄糖10g-15g/公斤蔗糖3g-5g/公斤水1000毫升/公斤pH5-6左右硫酸镁0.2克-1克/公斤磷酸二氢钾0.5-1.5克/公斤氯化钙0.1克-0.5克/公斤硫酸亚铁0.001克-0.008克/公斤
全文摘要
黑柄炭角菌是中国科学院微生物研究所鉴定，并编录到中国出版的《中国大型菌种》。菌株编号22X－2001，菌株由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏三十年，保藏中心登记入册编号CGMCC No.1038。黑柄炭角菌(Xylaria nigripes)是一种可应用于人服用的食品、保健食品、药品生产的珍稀菌种，同时适用于宠物的饲料产品生产，该技术通过采集天然的黑柄炭角菌菌核进行菌种纯化分离、培养，得到纯化的天然菌丝体并采用特别的仿生态液体发酵技术生产黑柄炭角菌菌丝体，干燥处理后的菌丝体是一种特定的生物制品，为土黄色或淡土黄色粉末，气味有一种特别的菌香味。鉴定黑柄炭角菌菌丝体的主要特征是黑柄炭角菌菌丝体经薄层层析能显示三个亮蓝色荧光斑点。
文档编号C12N1/14GK1669388SQ200410030328
公开日2005年9月21日 申请日期2004年3月15日 优先权日2004年3月15日
发明者朱志熊 申请人:朱志熊