专利名称：一种破壁花粉活性物的制备方法
技术领域：
本发明涉及对植物花粉进行加工利用的技术领域，尤其涉及一种破壁花粉活性物的制备方法。
背景技术：
花粉是植物有性繁殖的雄性配子体。当花粉粒被带到植物雌性生殖器官柱头上时，在适宜的温度和湿度下，花粉就会产生萌动，发出花粉管，精细胞就会沿着花粉管到达胚珠与卵细胞结合成为受精卵，进而发育成植物的种子。因此，可以认为花粉细胞内贮存着大量的植物遗传活性物质。长期以来，人们一直认为花粉的破壁程度越高，提取活性物就越彻底。但由于花粉的结构致密，外壁富有弹性而异常坚韧，外壁组成的化学物质相当稳定，耐酸耐碱，用常规的粉碎和提取方法，均很难奏效。因此，人们通过知识和实践的积累，逐渐形成了一套近乎完善的破壁和提取活性物方法。有文献作了归纳计，大致有七类破壁方法1、温差破壁法，是利用热胀冷缩的原理，在深冻后迅速投入热水中，使花粉炸裂；2、水浸减压破壁法，将花粉研成小粒，用水浸泡、冷冻、再经减压处理，然后均质处理，如此反复几次；3、胶体磨破壁法，花粉先经冷冻15小时，然后通过胶体磨破壁；4、气流破壁法，即使用气流粉碎机破壁花粉；5、膨化破壁法，利用谷物膨化机在膨胀力的作用下，使花粉内含物冲破花粉壁进出；6、超声波破壁法，用超声仪处理、振动、使花粉内含物自萌发孔溢出；7、发酵酶解破壁法，该方法包括a酵素液发酵法，培养基制备—酵素液制备—发酵花粉—干燥处理；b直接发酵法，调节花粉含水量—花粉发酵—干燥处理；c蜂粮破壁法，蜂粮—蜜水调和—花粉发酵—干燥；d酶化物理破壁法，利用酶法多次酶化，使花粉胞壁变软变薄，然后干燥，粉碎；e酶制剂酶解破壁法，花粉直接添加酶制剂酶解破壁。
以上这些方法有一个共同缺陷，那就是均没有注意到花粉在萌动期内产生的活性物质的利用。因此破壁率仍然不高，活性物的提取率仍然较低。
发明内容
本发明的目的就是为了克服上述现有技术存在的缺陷而提供一种花粉破壁率及活性物提取率均较高的破壁花粉活性物的制备方法。
本发明的目的可以通过以下技术方案来实现一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下工艺步骤(1)花粉原料，采集饱满的花粉粒，并经严格筛选，确保新鲜；(2)诱导萌动，采用浸泡方法诱导花粉萌动，具体方法为加入清水或蒸溜水、生理盐水或促进花粉快速萌动的营养液进行浸泡诱导，液体加入量是花粉重量的0.01～3倍，浸泡诱导时间4～8小时，诱导温度16～43℃；(3)萌动培养，将上述经诱导的花粉放置于恒温恒湿通风的培养箱中进行萌动培养，培养条件为相对湿度60～98％，温度16～48℃，时间12～24小时，此时花粉外壁的韧性已明显降低，有利于破壁操作；(4)机械破壁，选用通用的工业粉碎机械进行粉碎、碾压或磨碎破壁操作；(5)萃取分离，将上述破壁花粉放入超临界萃取釜中进行萃取分离，工艺参数如下萃取压力5～60MPa，萃取温度32～85℃，流体流量5～80kg/小时，萃取时间0.5～6小时；(6)收集产物，收集上述萃取分离后得到的呈油脂状的活性物，该活性物即为破壁花粉活性物。
在步骤(2)中，所述的营养液选自灵芝实体或菌丝体提取液、茯苓菌丝体提取液、生物素培养液中的一种或几种。
在步骤(4)中，所述的粉碎机械可选自碾压机、滚磨机、剪切机、气流碰撞机、机械撞击机中的一种或几种。
在步骤(5)中，所述的萃取分离还可以加入夹带剂，该夹带剂选自乙醇或水。
所述的活性物占萃取前花粉总重量的25～35％。
本发明在进行花粉萌动实验中发现
1，萌动期花粉外壁的韧性明显降低，而且发现处于休眠状态的花粉，当被诱导而萌动后就会被激发产生极为强烈的生理活性物质。
2，及时采集得到的新鲜花粉，由于新鲜程度高，养分供应充足，花粉粒成型饱满。当采用本萌动方法后，可以用市售最简易的研磨机，即可完成99％的破壁。实验又发现，经破壁的花粉，可以将贮存在花粉囊内呈油脂状的活性物质释出。当采用超临界CO2萃取，可获得高达30％的油状高活性物质。其中EA10活性物质含量的提高尤为明显。
动物和临床实验表明处于萌动期破壁花粉的生理活性极强，对细胞免疫和体液免疫系统有较强的调节作用。适用于癌症化放疗期的升白、抗花粉过敏、改善肾功能、和换季易感冒等症状。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例11.筛选饱满新鲜的玉米花粉100千克；2.加入灵芝菌丝体提取液200千克进行浸泡诱导，浸泡诱导时间6小时，维持温度32℃；3.将上述经诱导的花粉置于恒温恒湿通风培养箱内进行萌动培养，培养温度34℃，湿度90％、萌动培养时间为3小时，经检查花粉萌动率达99％，其外壁已明显软化；4.经市售锤式粉碎机破壁处理，镜检花粉破壁率达99％；5.将上述破壁花粉置于超临界萃取釜中萃取，工艺条件压力45MPa、温度53℃、流体流量60千克/小时、萃取时间2小时；6.将萃取物称重，呈油脂状活性物质重量为30千克。该活性物质外观呈透明油状物，无异味、无沉淀、无嚎味，有花粉特有香气。经检测无溶剂残留。
实施例21.筛选饱满新鲜的向日葵花粉100千克；
2.加入茯苓菌丝体提取液300千克进行浸泡诱导，浸泡诱导时间4小时，维持温度43℃；3.将上述经诱导的花粉置于恒温恒湿通风培养箱内进行萌动培养，培养温度48℃、湿度98％、萌动培养时间为24小时，经检查花粉萌动率达99％，其外壁已明显软化；4.经市售锤式粉碎机破壁处理，镜检花粉破壁率达99％；5.将上述破壁花粉置于超临界萃取釜中萃取，工艺条件压力60MPa、温度85℃、流体流量80千克/小时、萃取时间6小时；6.将萃取物称重，呈油脂状活性物质重量为35千克。该活性物质外观呈透明油状物，无异味、无沉淀、无嚎味，有花粉特有香气。经检测无溶剂残留。
实施例31.筛选饱满新鲜的油菜花粉100千克；2.加入灵芝菌丝体提取液、茯苓菌丝体提取液、生物素培养液共100千克进行浸泡诱导，浸泡诱导时间8小时，维持温度16℃；3.将上述经诱导的花粉置于恒温恒湿通风培养箱内进行萌动培养，温度16℃、湿度60％、萌动培养时间为12小时，经检查花粉萌动率达99％，其外壁已明显软化；4.经市售锤式粉碎机破壁处理，镜检花粉破壁率达99％；5.将上述破壁花粉置超临界萃取釜中萃取，工艺条件压力5MPa、温度32℃、流体流量5千克/小时、萃取时间0.5小时；6.将萃取物称重，呈油脂状活性物质重量为30千克，该活性物质外观呈透明油状物，无异味、无沉淀、无嚎味，有花粉特有香气，经检测无溶剂残留。
实施例41.筛选饱满新鲜的玉米花粉100千克；2.加入蒸馏水或生理盐水1千克进行浸泡诱导，浸泡诱导时间8小时，维持诱导温度43℃；其余工艺步骤及参数与实施例1相同，得到油脂状活性物质重量为25千克，该活性物质外观呈透明油状物，无异味、无沉淀、无嚎味，有花粉特有香气，经检测无溶剂残留。
权利要求
1.一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，该方法包括以下工艺步骤(1)花粉原料，采集饱满的花粉粒，并经严格筛选，确保新鲜；(2)诱导萌动，采用浸泡方法诱导花粉萌动，具体方法为加入清水或蒸溜水、生理盐水或促进花粉快速萌动的营养液进行浸泡诱导，液体加入量是花粉重量的0.01～3倍，浸泡诱导时间4～8小时，诱导温度16～43℃；(3)萌动培养，将上述经诱导的花粉放置于恒温恒湿通风的培养箱中进行萌动培养，培养条件为相对湿度60～98％，温度16～48℃，时间12～24小时，此时花粉外壁的韧性已明显降低，有利于破壁操作；(4)机械破壁，选用通用的工业粉碎机械进行粉碎、碾压或磨碎破壁操作；(5)萃取分离，将上述破壁花粉放入超临界萃取釜中进行萃取分离，工艺参数如下萃取压力5～60MPa，萃取温度32～85℃，流体流量5～80kg/小时，萃取时间0.5～6小时；(6)收集产物，收集上述萃取分离后得到的呈油脂状的活性物，该活性物即为破壁花粉活性物。
2.根据权利要求1所述的一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述的营养液选自灵芝实体或菌丝体提取液、茯苓菌丝体提取液、生物素培养液中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，在步骤(4)中，所述的粉碎机械可选自碾压机、滚磨机、剪切机、气流碰撞机、机械撞击机中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，在步骤(5)中，所述的萃取分离还可以加入夹带剂，该夹带剂选自乙醇或水。
5.根据权利要求1所述的一种破壁花粉活性物的制备方法，其特征在于，所述的活性物占萃取前花粉总重量的25～35％。
全文摘要
本发明涉及一种破壁花粉活性物的制备方法，该方法包括花粉原料、诱导萌动、萌动培养、机械破壁、萃取分离、收集产物等工艺步骤；与现有技术相比，本发明充分利用了花粉萌动期的一些特点，采用诱导、培养、破壁、萃取等工艺，从而大大提高了花粉的破壁率及活性物的提取率。
文档编号C12N15/10GK1778897SQ200410084600
公开日2006年5月31日 申请日期2004年11月26日 优先权日2004年11月26日
发明者黄亮 申请人:黄亮