专利名称：修复水生态环境的制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种修复水生态环境的制剂及其制备方法。
背景技术：
目前我国的城市景观水和水产养殖业用水，特别是鱼虾养殖业发展面临着水质污染，水生态系统失衡导致虾病蔓延，水体富营养化，情况严重。随着人们物质生活水平的提高和国家发展无公害食品计划，用抗生素药物进行虾病防治已不适应当前对健康食品的要求。
目前淡水和海水养殖大多数采用“封闭半封闭内循环养殖”(静水封闭养殖)的方式，即在养殖季节内不换水，因此造成饵料和养殖生物排泄物的积累，加之夏季炎热使水质恶化，鱼虾发病率高。为了减少病害损失，不得不大量使用抗生素和化学药物，因此又会进一步污染水质，导致鱼虾病害增多，形成恶性循环。传统的养殖方式不仅使鱼虾养殖成本增高，而且严重影响鱼虾的质量，污水的排放同时造成严重的环境污染。国内外都在寻求能改善水环境，预防鱼虾病的有效方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种环保、高密度高活性的修复水生态环境的制剂及其制备方法。
本发明解决该技术问题所采用的技术方案是以枯草芽孢杆菌ACCC10619，Bacillus subtilis(Ehrenberg)Cohn，和发酵乳酸杆菌AS1.1880，Lactobacillus bulgaricus(Luerssen et kuhu)Holland为主，辅以适量细黄链霉菌AS4.891，(Streptomyces microflavus)，并吸附固定化于麦麸上制备成菌制剂。
修复水环境的微生态菌制剂是上述枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌组成的优化复合物，其中各组分的重量百分比为枯草芽孢杆菌60～80％，细黄链霉菌10～20％，发酵乳酸杆菌10～20％。
修复水生态环境的制剂的制备方法包括下述步骤1.保存的各斜面菌种活化，分别摇瓶培养。枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌用可溶性淀粉培养基培养，pH7.0～7.5，115～121℃高压灭菌20-30分钟；发酵乳酸杆菌直接用灭菌鲜牛乳培养；枯草芽孢杆菌，35～40℃培养20～24小时；细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌，28～30℃培养36～50小时。
2.枯草芽孢杆菌，细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌的一级液体扩大培养；接种量10％～20％。
3.枯草芽孢杆菌，细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌的二级液体扩大培养；接种量10％～20％。
4.以麦麸为载体分别固体扩大培养并固定化于麦麸上。
5.将枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌30～50℃热风干燥，然后粉碎。
6.将枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌混合，各菌组分的重量百分比为枯草芽孢杆菌60～80％，细黄链霉菌10～20％，发酵乳酸杆菌10～20％。
本发明的有益效果1)复合菌固定化于麦麸上，使每克复合菌制剂的有效菌菌落数(CFU)可高达1000亿个，几乎达到了最大可能数，至今还未见如此高含菌量菌制剂的报道.麦麸不仅能为所培养菌提供一些营养成分，还由于其网状结构，具有较大的比表面积，所以能在单位体积内附着吸附固定化较多的菌体。
2)游离的NH3和NO2-是毒害鱼虾的主要有害成分，也是造成虾死亡的主要原因.若能降低氨氮(NH4+-N)，游离的NH3也就会减少，NO2--N也会减少，pH值也就趋于稳定.在同样条件同样剂量下，我们研制的产品(XIJ)与美国Brookside公司的Bio-culture Aq(Bio-t)相比，降低NO2--N量的效果相差不多，但是降低NH4+-N的能力却明显优于Bio-t。菌制剂经活化后洒入水体能很快形成微生态优势菌，能明显降低养殖水的COD和亚硝态氮，能稳定氨态氮(NH4+-N)并保持在一定水平上.使pH值稳定在一定范围内。
本发明的积极效果还在于1.本发明的菌制剂经活化，在水中能很快形成微生态优势菌群，发挥其降解有机物、促生、益生的作用；2.能迅速降低COD；3.降低亚硝酸态氮；4.能使氨态氮和pH值保持在一定水平上；5.抑制有害病菌的繁殖，调节水中藻类密度，促进水生生态系统修复和平衡；6.促进虾胃肠道健康，与对照相比，防治成本降低80％，虾产量提高近1倍，并显著改善虾的品质；7.代替或减少使用抗生素和化学药物，使养虾业成为无公害绿色养殖业；8.本发明的微生态菌制剂具有适应性强，对水生态环境修复效果好，活菌数高等特点；9.可以应用于城市景观用水或再生水的净化。
具体实施例方式
实施例1按下列步骤进行1)将4℃保存的各斜面菌种活化，分别摇瓶培养。枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌用可溶性淀粉培养基培养，具体配方如下可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl 0.5g，K2HPO40.5g，MgSO4.7H2O 0.5g，FeSO40.01g，蒸馏水1000ml，pH7.2，121℃高压灭菌20分钟。发酵乳酸杆菌直接用灭菌鲜牛乳培养。枯草芽孢杆菌，37℃培养24小时；细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌，30℃培养48小时。
2)一级液体扩大培养(枯草芽孢杆菌，细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌分别单独扩大培养，培养基和培养条件同上)；接种量10％。
3)二级液体分别扩大培养；接种量10％。
4)以麦麸为载体分别固体扩大培养并固定化于麦麸上。
5)将上述三类菌35℃热风干燥，然后粉碎，按各菌组分的重量百分比混合枯草芽孢杆菌600克，细黄链霉菌100克，发酵乳酸杆菌100克混合，即可得到本发明的制剂。
实施例2微生态菌制剂的性能测定选定5个没有进水闸门的土池养虾池进行实验。1～4号池为实验池，5号池为对照池。每个池塘面积近2000m2，平均水深1.8m，分别配置相同型号增氧机一台。实验期间不补充淡水，虾池水温平均17～18℃，盐度2.0％～2.1％。加入复合菌制剂的量第一次加入剂量18000g/hm2，即1mg.L-1，以后每周补加一次，剂量为4500g/hm2.菌制剂在使用前先在于20倍水中浸泡、搅拌1～1.5h，活化菌体后，再均匀地泼洒于池塘中。对照池不加复合菌制剂。实验期3个月。
测定结果CODCr相对于对照池去除率达84.7％，(重铬酸钾法)。
氨氮实验池先增加后减少，三天后稳定在4mg.L-1以下(纳氏试剂法)。对照池，氨氮是逐渐升高的趋势，一周后氨氮达6～8mg.L-1亚硝酸态氮对照池亚硝酸态氮快速升高并维持在高水平，第10天时达10mg.L-1，实验池开始也略有升高，但一直维持在很低水平，第10天时仅在2mg.L-1以下，相对对照池亚硝酸态氮的去除率达80％以上。
成本核算对照池获虾产量为5400kg.hm2，投放治虾病、防病药物费用达2500～3000元。而实验池的虾产量平均10500kg.hm2，单位产量增加近1倍。实验池由于仅投放了菌制剂，每池约合500元，没有再加任何药物，所以成本大大降低，约是对照池的1/5～1/6。
权利要求
1.一种修复水生态环境的微生物制剂，其特征在于该菌制剂主要是由枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌组成的优化复合物，其中各菌组分的重量百分比为枯草芽孢杆菌60～80％，细黄链霉菌10～20％，发酵乳酸杆菌10～20％。
2.如权利要求1所述的修复水生态环境的制剂的制备方法，其特征在于它包括下述步骤1)将保存的各斜面菌种活化，分别摇瓶培养；枯草芽孢杆菌和细黄链霉菌用可溶性淀粉培养基培养，pH7.0～7.5，115～121℃高压灭菌20～30分钟；发酵乳酸杆菌直接用灭菌鲜牛乳培养；枯草芽孢杆菌，35～40℃培养20～24小时；细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌，28～30℃培养36～50小时；2)枯草芽孢杆菌，细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌的一级液体扩大培养(20L罐)；接种量10％～20％；3)枯草芽孢杆菌，细黄链霉菌和发酵乳酸杆菌的二级液体扩大培养(200L罐)；接种量10％～20％；4)以麦麸为载体分别进行固体扩大培养并固定化于麦麸上；5)将枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌30～50℃热风干燥，然后粉碎；6)将枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌混合，各菌组分的重量百分比为枯草芽孢杆菌60～80％，细黄链霉菌10～20％，发酵乳酸杆菌10～20％。
全文摘要
本发明涉及一种修复水生态环境的制剂及其制备方法。修复水环境的微生态菌制剂是枯草芽孢杆菌、细黄链霉菌、发酵乳酸杆菌组成的优化复合物，其中各组分的重量百分比为枯草芽孢杆菌60～80％，细黄链霉菌10～20％，发酵乳酸杆菌10～20％。本发明的积极效果在于菌制剂经温水活化，在水中能很快形成微生态优势菌群，发挥其降解有机物、促生、益生的作用；具有适应性强，对水生态环境修复效果好，活菌数高等特点。
文档编号C12R1/125GK1831112SQ20061001336
公开日2006年9月13日 申请日期2006年3月24日 优先权日2006年3月24日
发明者张清敏, 王兰, 侯树宇, 朱琳, 钟欢 申请人:南开大学