专利名称：快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法
技术领域：
本发明属于工业微生物领域。
背景技术：
利迪链霉菌Streptomyces luteogriseus为我实验室从土壤分离筛选得到，并于2006年4月13日，经中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)保藏，(保藏地址北京市海淀区中关村北一条13号，中国科学院微生物研究所)，保藏号为CGMCC1692。利迪链霉菌CGMCCl692所产生的利迪链霉素，具有抗肿瘤，抗HIV蛋白酶以及抗G+细菌活性。2005年Cell杂志报道了利迪链菌素抑制细菌RNA聚合酶的机理，但国内目前没有相关内容的报道。国外的文献资料显示，利迪链菌素的产量较低，影响了进一步的研究及应用。为了提高抗生素的产量，通常采用定向诱变和随机诱变的方法，诱变后筛选的工作量非常大，限制了筛选的工作效率。
发明内容
本发明的目的是提供一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，通过对处于不同培养时间的利迪链霉菌及其突变株的培养，利用傅里叶变换红外光谱(FT-IR)技术并结合红外数据的主成分分析(PCA)不仅可以区分利迪链霉菌及其突变株，而且可以区分不同培养时间的同一菌株；用人工神经网络分析(ANN)构建的数学模型可以判断突变株是否能产生利迪链菌素。由于该方法具有所用的设备比较普及、操作方法简单、不需特殊的试剂等优点，可用于诱变后菌株的快速筛选。
本发明的技术方案概述如下一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖1～5克，可溶性淀粉10～20克，酵母浸粉0.5～1.5克，蛋白胨1～3克，磷酸氢二钾0.2～1.0克，氯化钠0.1～0.5克，硫酸镁0.1～0.5克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，灭菌；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖2～5克，可溶性淀粉10～30克，蛋白胨0.5～1.5克，磷酸氢二钾0.1～1克，氯化钠0.1～0.5克，硫酸镁0.1～0.5克，加水至500ml，分装，每瓶45ml，灭菌；(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，25～30℃，200～250转/分钟，培养36～60小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将所述摇瓶种子液按照体积百分含量为8～12％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，25～30℃，200～250转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始取样，每隔12小时取一次样，至少取5次，4000～6000转/分钟，离心10～20分钟，菌体用质量/体积百分比为0.5％NaCl水溶液洗涤2～4次，经4000～6000转/分钟离心10～20分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取3～5mg干燥后的菌体与150～300mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在7×107Pa～10×107Pa的压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱分析用红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为15～25次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法；(6)再经红外数据的主成分分析(PCA)及人工神经网络分析(ANN)，筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
摇瓶种子培养基的配制优选的是取葡萄糖3克，可溶性淀粉15克，酵母浸粉1克，蛋白胨2克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.2克，硫酸镁0.2克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，灭菌。
摇瓶发酵培养基的配制优选的是取葡萄糖2.5克，可溶性淀粉20克，蛋白胨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.25克，硫酸镁0.25克，加水至500ml，分装，每瓶45ml，灭菌。
摇瓶种子培养温度最好是为28℃，转速为220转/分钟，培养时间最好是48小时。
摇瓶发酵培养最好是将所述摇瓶种子液按照体积百分含量为10％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，培养温度为28℃，转速为220转/分钟。
在菌体的获得步骤中，所述从摇瓶发酵培养液中取样后离心时的转速最好为4800转/分钟，离心时间为15分钟，所述菌体用质量/体积百分比为0.5％的NaCl水溶液洗涤2次，经4800转/分钟，离心时间为15分钟。
KBr晶片的制备最好是取3mg干燥后的菌体与150mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在8×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片。
傅里叶变换红外光谱分析中所述扫描结果最好是20次扫描的平均值。
所述步骤(5)的数据处理采用归一化法时，红外谱图最好是采用400～1800cm-1以及2600～3200cm-12个范围的数据。
红外数据的主成分分析(PCA)等无监督方法能够以海量的代谢物组学数据为基础对生物样本进行分类，反映不同代谢模式的差异；而人工神经网络分析(ANN)等有监督方法能够以一定数量的生物样本做为训练样本建立数学模型，对未知样本进行预测。
本发明的优点是本发明确定了一种适合利迪链霉菌及其突变株快速筛选的方法，包括菌种培养、红外谱图的扫描范围、红外数据的预处理及分析方法。本发明的应用，可以大幅度提高诱变菌株的筛选速度，提高诱变的工作效率。
图1为利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及其利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z不同培养时间菌体红外吸收光谱数据的PCA分析结果。A12小时；B24小时；C36小时；D48小时；E60小时；F72小时。
图2为同一菌株不同培养时间菌体红外吸收光谱数据的PCA分析结果。A利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692；B利迪链霉菌突变株K；C利迪链霉菌突变株S；D利迪链霉菌突变株Z。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明实施例1一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成
(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖2.5克，可溶性淀粉15克，酵母浸粉1克，蛋白胨2克，磷酸氢二钾0.75克，氯化钠0.25克，硫酸镁0.25克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，121℃灭菌20min；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖2.5克，可溶性淀粉20克，蛋白胨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.25克，硫酸镁0.25克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶45ml，121℃灭菌20min；(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，培养温度为28℃，转速为220转/分钟，培养48小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将摇瓶种子液按照体积百分含量为10％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，培养温度为28℃，转速为220转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始，每隔12小时取一次样，取5次，每次经4800转/分钟，离心15分钟，将菌体用质量/体积百分比(克/100毫升)为0.5％的NaCl水溶液洗涤2次，洗涤后，用同样条件离心，即每次经4800转/分钟，离心15分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取3mg干燥后的菌体与150mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在8×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析用岛津FT-IR 8900型红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为20次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法，根据红外谱图的情况采用400～1800cm-1以及2600～3200cm-12个范围的数据；(6)再经红外数据的主成分分析(PCA)及人工神经网络分析(ANN)，能区分出培养不同时间的利迪链霉菌及其突变株，也可以通过人工神经网络分析将产和不产利迪链菌素的菌株鉴定出来，即筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
利迪链霉菌突变株K为β-酮酰基-ACP合成酶基因插入失活后得到的、利迪链霉菌突变株S为S-腺苷蛋氨酸合成酶基因插入失活后得到的，利迪链霉菌突变株Z为紫外线照射及亚硝酸复合诱变后筛选得到的。
前两个突变株获得方法，专业技术人员可以从文献中查到，具体做法是根据相同功能基因的同源性设计引物，利用PCR(聚合酶链式反应)扩增得到β-酮酰基-ACP合成酶基因和S-腺苷蛋氨酸合成酶基因的片段。将每个基因片段分别连接在大肠杆菌和链霉菌的穿梭质粒pKC1139上，通过原生质体转化转入利迪链霉菌的原生质体中。通过同源单交换的原理，pKC1139的片段插入到利迪链霉菌相应基因的内部，从而导致该基因的失活。由于质粒上携带有安普霉素的抗性基因和温敏特性，只有突变株才能在高于34℃的条件下，在含有安普霉素的培养基上生长。参考文献1.Hopwood，D.A.，Bibb，M.J.，Chater，K.F.，Kieser，T.，Bruton，C.J.，Kieser，H.M.，Lydiate，D.J.，Smith，C.P.，Ward，J.M.and Shrempf，H.1985.Genetic manipulation of StreptomycesA laboratory manual.NorwichJohn InnesFoundation；2.Xiang，L.K.and Moore，B.S.2003.Characterization of benzoyl coenzyme Abiosynthesis genes in the enterocin-producing bacterium“Streptomyces maritimus”.J.bacterial.185，399-404。
利迪链霉菌突变株Z为紫外线照射及亚硝酸复合诱变后筛选得到的，获得的方法是先经紫外线照射(30W紫外灯距离35厘米照射10秒钟)后，经0.001M的亚硝酸处理3分钟，再通过常规方法筛选得到的。
图1的结果表明，利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及其3种不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z在发酵培养12、24、36、48、60和72小时的情况下均能通过本发明实施例1提供的方法得到很好地区分。表明最多需要培养12小时即可进行菌种的筛选，同时证明了该方法的适用性、实用性和可行性，特别是对表型变化不明显的突变株进行筛选时更具优势。
图2的结果表明，培养12、24、36、48、60和72小时的每株菌均能得到很好的区分。进一步证明了本发明的适用性、实用性和可行性。
表1表明用人工构建的神经网络(共4层，神经元数分别为5、10和1，产利迪链菌素的目标值设为1，不产的设为0)经过训练后，可以准确地预测突变株能否产利迪链菌素。按照本发明提供的培养条件，利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692需要培养至少36小时才能检测到利迪链菌素。利用本发明提供的方法，最多需要12小时就可以预测突变株能否产利迪链菌素，可以大大缩短菌种筛选的时间。
表1为人工神经网络用产及不产利迪链菌素的样本训练后预测的结果与实际结果的比较。
表1人工神经网络预测的结果与实际结果的比较
实施例2一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖3克，可溶性淀粉15克，酵母浸粉0.5克，蛋白胨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.2克，硫酸镁0.2克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，120℃灭菌30min；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖2克，可溶性淀粉30克，蛋白胨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.25克，硫酸镁0.25克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶45ml，12℃灭菌30min；(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，培养温度为25℃，转速为200转/分钟，培养60小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将摇瓶种子液按照体积百分含量为8％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，培养温度为28℃，转速为200转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始，每隔12小时取一次样，取6次，每次经4000转/分钟，离心20分钟，将菌体用质量/体积百分比(克/100毫升)为0.5％的NaCl水溶液洗涤4次，洗涤后，用同样条件离心，即每次经4000转/分钟，离心20分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取4mg干燥后的菌体与200mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在7×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析用岛津FT-IR 8900型红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为15次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法，根据红外谱图的情况采用400～1800cm-1以及2600～3200cm-12个范围的数据；(6)再经红外数据的主成分分析(PCA)及人工神经网络分析(ANN)，能区分出培养不同时间的利迪链霉菌及其突变株，也可以通过人工神经网络分析将产和不产利迪链菌素的菌株鉴定出来，即筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
实施例3一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖1克，可溶性淀粉20克，酵母浸粉1.5克，蛋白胨3克，磷酸氢二钾0.2克，氯化钠0.1克，硫酸镁0.5克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，120℃灭菌30min；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖5克，可溶性淀粉10克，蛋白胨0.5克，磷酸氢二钾0.1克，氯化钠0.1克，硫酸镁0.5克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶45ml，12℃灭菌30min；
(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，培养温度为30℃，转速为250转/分钟，培养36小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将摇瓶种子液按照体积百分含量为12％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，培养温度为25℃，转速为250转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始，每隔12小时取一次样，取7次，每次经6000转/分钟，离心10分钟，将菌体用质量/体积百分比(克/100毫升)为0.5％的NaCl水溶液洗涤3次，洗涤后，用同样条件离心，即每次经6000转/分钟，离心10分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取5mg干燥后的菌体与300mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在10×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析用岛津FT-IR 8900型红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为25次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法，根据红外谱图的情况采用400～1800cm-1以及2600～3200 cm-12个范围的数据；(6)再经红外数据的主成分分析(PCA)及人工神经网络分析(ANN)，能区分出培养不同时间的利迪链霉菌及其突变株，也可以通过人工神经网络分析将产和不产利迪链菌素的菌株鉴定出来，即筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
实施例4一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖5克，可溶性淀粉10克，酵母浸粉1.5克，蛋白胨3克，磷酸氢二钾1克，氯化钠0.5克，硫酸镁0.1克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，120℃灭菌30min；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖5克，可溶性淀粉10克，蛋白胨1.5克，磷酸氢二钾1克，氯化钠0.5克，硫酸镁0.1克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶45ml，12℃灭菌30min；(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，培养温度为28℃，转速为220转/分钟，培养48小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将摇瓶种子液按照体积百分含量为11％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，培养温度为27℃，转速为220转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始，每隔12小时取一次样，取10次，每次经4800转/分钟，离心15分钟，将菌体用质量/体积百分比(克/100毫升)为0.5％的NaCl水溶液洗涤3次，洗涤后，用同样条件离心，即每次经4800转/分钟，离心15分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取5mg干燥后的菌体与300mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在10×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析用岛津FT-IR 8900型红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为25次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法，根据红外谱图的情况采用400～1800cm-1以及2600～3200cm-12个范围的数据；(6)再经红外数据的主成分分析(PCA)及人工神经网络分析(ANN)，能区分出培养不同时间的利迪链霉菌及其突变株，也可以通过人工神经网络分析将产和不产利迪链菌素的菌株鉴定出来，即筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
权利要求
1.一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征由如下步骤组成(1)培养基的配制①摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖1～5克，可溶性淀粉10～20克，酵母浸粉0.5～1.5克，蛋白胨1～3克，磷酸氢二钾0.2～1.0克，氯化钠0.1～0.5克，硫酸镁0.1～0.5克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，灭菌；②摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖2～5克，可溶性淀粉10～30克，蛋白胨0.5～1.5克，磷酸氢二钾0.1～1克，氯化钠0.1～0.5克，硫酸镁0.1～0.5克，加水至500ml，分装，每瓶45ml，灭菌；(2)种子培养及发酵①摇瓶种子培养将利迪链霉菌(Streptomyces luteogriseus)CGMCC1692及不产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株K、利迪链霉菌突变株S和利迪链霉菌突变株Z分别接入摇瓶种子培养基中，25～30℃，200～250转/分钟，培养36～60小时，制得摇瓶种子液；②摇瓶发酵培养将所述摇瓶种子液按照体积百分含量为8～12％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，25～30℃，200～250转/分钟培养；(3)样品的制备①菌体的获得从摇瓶发酵培养12小时开始取样，每隔12小时取一次样，至少取5次，4000～6000转/分钟，离心10～20分钟，菌体用质量/体积百分比为0.5％NaCl水溶液洗涤2～4次，经4000～6000转/分钟离心10～20分钟，洗涤后的菌体真空冷冻干燥后备用；②KBr晶片的制备取3～5mg干燥后的菌体与150～300mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在7×107Pa～10×107Pa的压力下将样品粉末压成KBr锭片；(4)傅里叶变换红外光谱分析用红外分光光度计测定红外光谱，分辨率为4cm-1，扫描范围4000～400cm-1，扫描结果为15～25次扫描的平均值；(5)数据处理采用归一化法；(6)再经红外数据的主成分分析及人工神经网络分析，筛选出能产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株。
2.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述摇瓶种子培养基的配制取葡萄糖3克，可溶性淀粉15克，酵母浸粉1克，蛋白胨2克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.2克，硫酸镁0.2克，加水至500ml，混匀，分装至锥形瓶中，每瓶50ml，灭菌。
3.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述摇瓶发酵培养基的配制取葡萄糖2.5克，可溶性淀粉20克，蛋白胨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化钠0.25克，硫酸镁0.25克，加水至500ml，分装，每瓶45ml，灭菌。
4.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述摇瓶种子培养温度为28℃，转速为220转/分钟，培养时间为48小时。
5.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述摇瓶发酵培养将所述摇瓶种子液按照体积百分含量为10％的接种量接入摇瓶发酵培养基中，28℃，220转/分钟培养。
6.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述菌体的获得步骤中，所述从摇瓶发酵培养液中取样后离心时的转速为4800转/分钟，离心时间为15分钟，所述菌体用NaCl水溶液洗涤的次数为2次，经4800转/分钟，离心时间为15分钟。
7.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述KBr晶片的制备取3mg干燥后的菌体与150mg的干燥KBr置于玛瑙研钵中充分研磨后，装入模具中在8×107Pa压力下将样品粉末压成KBr锭片。
8.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述傅里叶变换红外光谱分析中所述扫描结果为20次扫描的平均值。
9.根据权利要求1所述的一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，其特征是所述步骤(5)的数据处理采用归一化法时，红外谱图采用400～1800cm-1以及2600～3200cm-12个范围的数据。
全文摘要
本发明公开了一种快速筛选产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株的方法，由如下步骤组成(1)培养基的配制；(2)种子培养及发酵；(3)样品的制备；(4)傅里叶变换红外光谱分析；(5)数据处理；(6)再经红外数据的主成分分析及人工神经网络分析，能快速筛选出产利迪链菌素的利迪链霉菌突变株，本发明确定了一种适合利迪链霉菌及其突变株快速筛选的方法，可以大幅度提高诱变菌株的筛选速度，提高诱变的工作效率。
文档编号C12R1/465GK1928070SQ200610015569
公开日2007年3月14日 申请日期2006年9月1日 优先权日2006年9月1日
发明者元英进, 于凤鸣, 吴晓健 申请人:天津大学