专利名称：：一种改善营养性贫血的功能性食品的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种含有改善营养性贫血的功能性食品。技术背景贫血是指全身循环血液中红细胞总量减少至正常值以下。贫血患者红细胞计数的降低与血红蛋白浓度的降低一般是成比例的，但是小细胞低色素型贫血的红细胞计数减少比血红蛋白的减少相对的较少，以致贫血较轻时红细胞计数可以不低于正常。相反，大红细胞型贫血时，血红蛋白浓度相对地偏高，而红细胞计数偏低。在急性大量血管内溶血时，血浆内含有较高浓度的游离血红蛋白，这时血红蛋白测定的结果高于贫血的实际程度。在这种特殊情况下，红细胞压积和红细胞计数更能反映贫血的程度。贫血的发病率极高，包括缺铁性贫血、巨细胞贫血、再生障碍性贫血和溶血性贫血四种。最常见的是缺铁性贫血，以儿童和孕妇发病率为高。我国7岁以下小儿贫血发生率为40%。贫血症状的轻重主要取决于贫血的程度和产生贫血的原因和速度，产生贫血的速度越快症状越严重，而缓慢出现的贫血由于人体的适应和代偿，症状相对要轻得多。贫血可由多种原因引起。红细胞在循环血液中的寿命大约为120天，衰老的红细胞主要在脾脏内被清除。骨髓是成人制造红细胞的工厂。幼稚红细胞在骨髓内发育成长，成熟后不断被输送到血循环里，保持循环血液中红细胞和血红蛋白量的恒定。因而红细胞生成减少或红细胞损失过多则是产生贫血的两大原因。1.红细胞生成减少骨髓造血功能减退，可引起再生障碍性贫血或单纯红细胞性再生障碍性贫血；骨髓被异常组织侵害，引起骨髓病性贫血；造血原料缺乏，如缺铁性贫血，营养性大细胞性贫血。由于正在生长发育期的儿童和妊娠期的妇女，生理上需要较多的铁，而日常食物中又缺乏足够的铁质，所以缺铁性贫血又叫营养性贫血。营养性贫血是指人体缺乏造血所必须的营养物质，如铁、叶酸、维生素B12等，使血红蛋A的形成或红细胞的生成不足，多发于6个月至2岁的婴幼儿。
发明内容本发明的目的是提供一种可以改善营养性贫血的功能性食品。实现上述发明目的的解决方案是使用卟啉铁、当归和熟地黄三种组分，范围如下卟啉铁(以铁计)的剂量范围为lmg/kg200mg/kg，当归(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg~20g/kg、熟地黄(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg20g/kg。上述三种组分的较好用量比率为卟啉铁(以铁计)90mg/kg，当归2.5g/kg(以生药量计)，熟地黄3g/kg(以生药量计)。具体实施例方式下面结合实施例进一步阐释本发明，但并非是对本发明任何形式的限制。下述实施例中均按照常规方法进行中药组合物的配制。实施例试验目的筛选6种成分和6个剂量经口给予受试物后对改善营养性贫血的影响，形成具有改善营养性贫血功能的功能性食品配方。试验方法1.材料与方法1.1受试物!井6井样品，外观呈深色液体状，由上海交大昂立股份有限公司提供。1,2实验动物健康雄性断乳大鼠，由复旦大学实验动物科学部提供，合格证号SCXK沪2002—0002。1.3低铁饲料低铁饲料的配方如下表l所示-表l低铁饲料配方成分%成分%EDTA处理酪蛋白15AIN^M混合维生素1.0大米粉(梗稻)70氯化胆碱0.2玉米油5.0明胶5.0AIN^M混合矿物盐3.5DL-蛋氨酸0.31.4剂量分组配方药序号16分别对应当归、白芍、熟地黄、维生素C、川芎和卟啉铁六种中药组分，设6个实验组及低铁对照组，每组10只大鼠。实验组16按照权重实验设计法进行实验设计，见表2和表3。表2权重配方设计表配方药序号123456选用列ACBFDE列号ABCDEF配伍组l13264配伍组226413配伍组3326451配伍组441326配伍组513264配伍组6645132<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注组分l、2、3、5的用量均以生药量计；4的剂量以维生素C计、6的剂量以铁计。1.5实验步骤1.5.1建立缺铁性贫血大鼠模型选用健康雄性断乳大鼠在实验环境下适应35日后词予低铁词料及双蒸水，采用不锈钢笼及食罐，实验过程中避免铁污染。自第3周开始每周选取部分大鼠采尾血测Hb，直至多数动物Hb低于100g/L以下时，测定全部大鼠的体重及Hb。1.5.2恢复试验选取HtKlOOg/L的大鼠作为实验动物,根据贫血大鼠Hb水平和体重将其随机分为6个实验组和低铁对照组，各组均继续饲予低铁饲料。实验组大鼠每日灌胃给予受试物溶液，对照组大鼠灌胃给予等量双蒸水，连续30天，测定体重及各项血液学指标。1.6观察指标观察指标为体重、血红蛋白、红细胞内游离原卟啉。1.7数据处理和结果判定采用方差分析进行统计。受试物组与低铁对照组比较，若血红蛋白浓度的差异有显著性(P<0.05)，且前后平均升高幅度达到10g/L以上，受试物组红细胞内游离原卟啉与低铁对照组比较差异有显著性，可判定该受试物改善营养性贫血功能动物实验结果阳性。用DAS软件对16实验组进行各成分之间交互作用的分析。2.实验结果2.1受试物对缺铁性贫血模型大鼠血红蛋白、红细胞内游离原卟啉浓度的影响经喂饲低铁饲料至恢复实验前，各组大鼠血红蛋白浓度均低于100g/L，缺铁性贫血模型成立。而恢复实验未1~6卖验组的大鼠与低铁对照组的大鼠相比，血红蛋白浓度显著升高(P<0.05)，且各受试物组大鼠实验前后血红蛋白平均升高幅度均达到10g/L以上；同时红细胞内游离原卟啉显著低于低铁对照组大鼠(P<0.05)，见表4。表4各结L大鼠血红蛋白、红细胞内游离原卟啉浓度(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>*与低铁对照续L比较，p<0.05用DAS软件对16组权重配方设计实验数据进行分析处理，结果见表5、表6。7表5DAS软件对血红蛋白含量分析的结果药物相互作用动力学分析结果(权重配方法)^DAS2.0.1,分折曰期:2006-9-21各组不同组分剂量与联用药效(E)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>交互项的重要程度排序d6>d6dlM6d5:'d6d3>d6d2>d6d4注d6供参比用.表中推荐剂童为与d6交互组分的剂量表6DAS软件对红细胞内游离原卟啉浓度分析的结果药物相互作用动力学分析结果(权重配方法)游离原卟啉~^DAS2.0.1,分析日期2006-9-21各组不同组分剂量与联用药效(E)组别组分l组分2组分3组分4组分5组分6￡100.31.245.21恥0.002155220.50.9311.30.5750.0026178311.50.656.50600.00207941.502.422.61.25450.0025189520.6067.80.75300.002336462.51.21.833.90.25150.0026385D一msx2.51.5367.81.2590D_min00011.3015D—Emax2.51.21.833.9000020.25150.0059172标化剂豕(di)与联用药效(E)的关系组别组分l(dl)组分2(d2)组分3(d3)组分4(cW)组分5(d5)组分6(d6)100.40.81.1431.61.7140.002155220.41.220.2860.81.4290.002617830.820.41.42901.1430.00207941.201.60.57120.8570.002518951.60.801.7141.20.5710.0023364621.61.20.8570.40.2860.0026385各组分重要程度与推荐剂量组分bP推荐剂量剂量注释组分l(dl)1.2520.0002.5D—max组分2(d2)1.0880.0001.5D—msx组分3(d3)-1.7490.0003D—min组分4(d4)-2.6260細11.3D—min组分5(d5)1.1030細1.25D一m3x组分6(d6)1.6150.00090D—m3x各组分在组方中重要程度排字组分6.:组分r组分5〉组分2〉组分3)组分4主要药d6及其交互项(didj)与联用药效(E)的关系组别d6d1d6d2d6d3d6d4d6d5d6E100.7351.2862.0572.5711.7140.002155220.8571.8372.6790.4291.0711.4290.002617831.3712.4490.4291.71401.1430.00207941.54301.2860.5141.6070.8570.002518951.3710.4901.0290.6430.5710.002336460.8570.490.3210.2570.1070.2860.0026385主要药d6的交互项(did"与推存剂:交互项bP推荐剂量剂量注释相互作用d6d10.4410細2.5D—msxd6d2-1.1090.0000D_mind6d31.1970細3D—maxd6d41.3620.00067.8D_maxd6d5-1.1210.0000D—mind6-0.080交互项的重要程度排序d6d4>d6d3>d6dl.、'd6>d6d2>d6d5注d6供参比用，表中推荐剂S为与d6交互组分的剂量IE.EIEIE(itWD档WIS同抗同同抗协拮协协拮2.2受试物对缺铁性贫血模型大鼠体重的影响由表7可见，恢复实验前，各组大鼠体重的差异均无显著性(P>0.05)，而恢复实验末1#~6#实验组大鼠与低铁对照组大鼠相比，体重显著增高(P<0.05)。表7各组大鼠实验前后的体重(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>试验小结参照《保健食品检验与评价技术规范》中的实验方法对委托单位提供的6个受试样品进行改善营养性贫血功能的动物实验。结果表明1~6实验组大鼠与低铁对照组大鼠相比，血红蛋白浓度显著升高(P<0.05)，且实验前后血红蛋白平均升高幅度均达到10g/L以上；同时红细胞内游离原卟啉显著降低(P<0.05)。用DAS软件对实验结果分析后发现，6个组分对血红蛋白含量影响的重要程度排序为组分6〉组分1〉组分3〉组分4〉组分5〉组分2。组分l、2、3、5和组分6之间具有相加作用，组分4和组分6之间具有拮抗作用；6个组分对红细胞游离原卟啉影响的重要程度排序为组分6〉组分l〉组分5〉组分2〉组分3〉组分4，组分l、3、4和组分6之间具有协同作用，组分2、5和组分6之间具有拮抗作用。此外，实验组大鼠实验后体重显著高于低铁对照组(P<0.05)。综上所述，通过建立缺铁性贫血大鼠模型来筛选6个组分和6个剂量改善营养性贫血功能的动物实验表明，具有改善营养性贫血功能的有效组分中，组分6(叶啉铁)、组分l(当归)、组分3(熟地黄)配合较为合理。建议的推荐剂量组分6为90mg/kg，组分1为2.5g/kg(以生药量计)、组分3为(以生药量计)3g/kg。建议该产品全方为卟啉铁90mg/kg，当归2.5g/kg(以生药量计)，熟地黄-3gAg(以生药量计)。除以上三种中药成分外还可以加入食品辅料。实施例试验目的进一步筛选卟啉铁、当归、熟地黄对改善营养性贫血的剂量范围。试验方法1.材料与方法U受试物1#3#样品，外观呈深色液体状，由上海交大昂立股份有限公司提供。1.2实验动物健康雄性断乳大鼠，由复旦大学实验动物科学部提供，合格证号SCXK沪2002—0002。1.3低铁饲料表l低铁饲料配方成分%成分%EDTA处理酪蛋白15AIN—^M混合维生素1.0大米粉(梗稻)70氯化胆碱0.2玉米油5.0明胶5.0AIN^M混合矿物盐3.5DL-蛋氨酸0.31.4剂量分组配方受试物序号13分别对应卟啉铁、当归、熟地黄三个成分不同剂量的组合，设3个实验组及低铁对照组，每组10只大鼠。实验分组如下。1、低铁对照组2、剂量l组卟啉铁为lmg/kg(以铁计)，当归为0.5g/kg(生药计)，熟地黄为0.5g/kg(生药计)3、剂量2组卟啉铁为100mg/kg(以铁计)，当归为10g/kg(生药计)，熟地黄为10g/kg(生药计)4、剂量3组卟啉铁为200mg/kg(以铁计)，当归为20g/kg(生药计)，熟地黄为20g/kg(生药计)1.5实验步骤1.5.1建立缺铁性贫血大鼠模型选用健康雄性断乳大鼠在实验环境下适应35日后饲予低铁饲料及双蒸水，采用不锈钢笼及食罐，实验过程中避免铁污染。自第3周开始每周选取部分大鼠采尾血测Hb，直至多数动物Hb低于100g/L以下时，测定全部大鼠的体重及Hb。1.5.2恢复试验选取HlxlOOg/L的大鼠作为实验动物，根据贫血大鼠Hb水平和体重将其随机分为6个实验组和低铁对照组，各组均继续饲予低铁饲料。实验组大鼠每日灌胃给予受试物溶液，对照组大鼠灌胃给予等量双蒸水，连续30天，测定体重及各项血液学指标。1.6观察指标体重、血红蛋白、红细胞内游离原卟啉1.7数据处理和结果判定采用方差分析进行统计。受试物组与低铁对照组比较，若血红蛋白浓度的差异有显著性(P<0.05)，且前后平均升高幅度达到10g/L以上，受试物组红细胞内游离原卟啉与低铁对照组比较差异有显著性，可判定该受试物改善营养性贫血功能动物实验结果阳性。2.实验结果2.1受试物对缺铁性贫血模型大鼠血红蛋白、红细胞内游离原卟啉浓度的影响经喂饲低铁饲料至恢复实验前，各组大鼠血红蛋白浓度均低于100g/L，缺铁性贫血模型成立。而恢复实验末剂量1~3实验组的大鼠与低铁对照组的大鼠相比，血红蛋白浓度显著升高(P<0.05)，且各受试物组大鼠实验前后血红蛋白平均升高幅度均达到10g/L以上；同时红细胞内游离原卟啉显著低于低铁对照组大鼠(P<0.05)，见表4。表2各組L大鼠血红蛋白、红细胞内游离原卟啉浓度(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>2.2受试物对缺铁性贫血模型大鼠体重的影响由表3可见，恢复实验前，各组大鼠体重的差异均无显著性(P>0.05)，而恢复实验末剂量1#~3#实验组大鼠与低铁对照组大鼠相比，体重显著增高表3各组大鼠实验前后的体重(X士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>*与低铁对照组比较，p<0.0试验小结参照《保健食品检验与评价技术规范》中的实验方法对委托单位提供的3个受试样品进行改善营养性贫血功能的动物实验。结果表明l-3实验组大鼠与低铁对照组大鼠相比，血红蛋白浓度显著升高(P<0.05)，且实验前后血红蛋白平均升高幅度均达到10g/L以上；同时红细胞内游离原卟啉显著降低(P<0.05)。此外，实验组大鼠实验后体重显著高于低铁对照组(P<0.05)。综上所述，通过建立缺铁性贫血大鼠模型来筛选3个有效组分和3个剂量改善营养性贫血功能的动物实验表明，具有改善营养性贫血功能的有效组分中的剂量范围如下卟啉铁(以铁计)的剂量范围为lmg/kg~200mg/kg，当归(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg~20g/kg，熟地黄(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg~20g/kg。除以上三种中药成分外还可以加入食品辅料。权利要求1.一种改善营养性贫血的功能性食品，其特征在于，所述食品中包含卟啉铁、当归和熟地黄三种组分；所述卟啉铁以铁计的剂量范围为1mg/kg～200mg/kg，所述当归以生药计的剂量范围为0.5g/kg～20g/kg，所述熟地黄以生药计的剂量范围为0.5g/kg～20g/kg。2.根据权利要求1所述的功能性食品，其特征在于，所述卟啉铁以铁计的剂量为90mg/kg，所述当归以生药量计的剂量为2.5g/kg，所述熟地黄以生药量计的剂量为3g/kg。全文摘要本发明涉及一种改善营养性贫血的功能性食品，由卟啉铁、当归和熟地黄三种中药成分组成，其中卟啉铁(以铁计)的剂量范围为1mg/kg～200mg/kg、当归(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg～20g/kg、熟地黄(以生药计)的剂量范围为0.5g/kg～20g/kg。本功能性食品的改善效果很好，使用后血红蛋白浓度显著升高且红细胞内游离原卟啉显著降低。此外，体重也显著提高。文档编号A23L1/29GK101209102SQ20061014838公开日2008年7月2日申请日期2006年12月30日优先权日2006年12月30日发明者钧张,汤健俭,沙大年,佳米,范小兵申请人:上海交大昂立股份有限公司