专利名称：：含异源黄素血红蛋白基因的植物及其使用方法含异源黄素血红蛋白基因的植物及其使用方法相关申请的交叉参考根据美国法典第35章第U9(e)项，本申请要求2005年5月5日提交的美国临时申请序号60/678,166的权益，该临时申请通过引用整体结合到本文中。序列表的引入将序列表的两个拷贝(拷贝1和拷贝2)和该序列表的计算机可读形式(CRF)通过引用结合到本文中，所述序列表均在CD-R上，每个都含有名为52267B_05052006.ST25.txt的文件，该文件为779,000字节(在MS-WINDOWS中测算)，于2005年5月5日生成。发明领域本文公开的发明属于植物遗传学和发育生物学领域。更具体地说，本发明提供作物的转基因种子，其中所述种子的基因组包含用于表达异源黄素血红蛋白的重组DNA,所述DNA导致产生生长增加、产量增加和/或氮利用效率改善的转基因植物。发明背景氮经常是植物生长和生产力的限制元素。植物的代谢、生长和发育深受其氮供应的影响。受限的氮供应改变茎根比、根发育、初级代谢酶的活性和老叶的衰老(死亡)率。所有大田作物都对无机氮肥具有基础依赖性。因为氮肥被快速地由大部分土壤类形中去除，所以在生长季节必须向生长中的作物提供2或3次氮肥。通常作为硝酸铵、硝酸钾或尿素提供的氮月巴典型地占作物(例如玉米和小麦)相关成本的40%。估计北美和西欧每年均使用约1100万吨氮肥，每年耗费农民22亿美圆(Sheldrick,1987,WorldNitrogenSurvey,技术文献第59号，Washington,D.C.)。而且，世界银行预测提示，在下一个IO年当中，全世界每年氮肥需求量将由约9000万吨增加至远超过1.3亿吨。植物增加氮利用率应当能使作物在较低肥料投入下培育，或者在劣质土壤上培育，并因此会在发达国家和发展中国家的农业体系中均具有显著经济影响。植物育种家已尝试使用常规选择技术通过利用玉米、小麦、水稻和其它作物品种的天然群中的可用变种来改善氮使用效率。但是，对于大田条件下难以评价的性状，存在着相当大的难度，这些难度与用常规育种程序筛选广泛群体有关，这种选择策略大部分不成功。遗传工程的最新进展已提供了转化植物以包含外源(经常称为"异源的或异种的")基因或改良的内源基因的必备工具。将特定DNA导入植物基因组中的能力还提供了产生具有改善表型和/或独特表型的植物的机会。黄素血红蛋白由血红素结合域和铁氧还蛋白还原酶样结构域组成，通过将NO氧化为N03—脱毒高水平的一氧化氮(NO),在大肠杆菌中起NO加双氧酶(NOD)的作用(Vasudevan等，1991,Mol.Gen.Genet.226:49-58,和Gardener等，2002,丄ofBiologicalChemistry270:8166-8171)。已有报道指NO可参与植物中的许多生理响应，包括病原体反应、程序性细胞死亡、发芽(Beligni和L画ttina,2000,Planta.210::21S-n)、植物抗毒素产生(Noritake等，l"6)和乙烯排放(Leshem,2000:丄Exp.Bot.51:1471-1473)。另外，发现NO对水杨酸信号传导(Klessig等，2000,Proc.Natl.Acad.Sci.USA.97:8849-8855)和细胞因子信号传导有关键作用。已发现NO通过增加的一氧化氮合酶(NOS,EC1.14.13.39)活性产生平行信号传导途径，该途径介导特定基因对UV-B耐受的响应。而且，业已报道一氧化氮介导小麦、莴苣、马铃薯和拟南芥中的光形态发生反应，促进玉米根延伸(Gouvea,1997,PlantGrowthRegulation21:183-187)，并促进草莓和聘梨成熟(Leshem和Pinchasov,2000,J.Exp.Bot.51:1471-1473)。NO与烟草防御反应的关联可能是最多文件证实的一氧化氮在植物信号传导中所起的作用(Klessig等，2000,Proc.Natl,Acad.SciUSA97:8849-8855;Foissner等，2000,Plant丄23:817-824)。因此，我们预期通过过表达NO脱毒酶去除内源NO可揭示NO在玉米农学性状(例如谷粒成熟、叶衰老、疾病抗性、根生长和/或光形态发生)表达中所起的作用。由NO活化的酶的过表达也可影响相似的过程。在两种情况下，农学性状还可通过减少亚硝化应力或增强NO信号传导得以改善。本发明部分地基于我们的令人惊奇的发现大肠杆菌黄素血红蛋白在玉米植抹中的表达导致在足量氮或有限氮生长条件下更强壮的生长特征以及增加的种子产量。发明概述本发明涉及转基因植物系的种子，其中所述种子在其基因组中包含提供用于黄素血红蛋白表达的重组多核苷酸。特别令人感兴趣的是，本发明提供含黄素血红蛋白的转基因种子，以产生具有改良农学性状的转基因植物。改良农学性状的特征为在足量氮生长条件下或有限氮生长条件下更快的生长速率、增加的鲜或干生物量、增加的种子或果实产量、增加的种子或果实氮含量、种子或果实中增加的游离氨基酸含量、种子或果实中增加的蛋白含量和/或营养组织中增加的蛋白含量。另外在本发明中特别令人感兴趣的是转基因作物的种子，所述作物优选为玉米(Zeawqys)或大豆(G(y""ewox)作物。在本发明中用于生产含异源黄素血红蛋白基因的转基因种子的其它令人感兴趣植物包括但不限于棉花、卡诺拉、小麦、向日葵、高粱、苜蓿、大麦、黍、水稻、烟草、水果和蔬菜作物以及草冲草。因此，在实行以上所述时，本发明在一个方面提供3种非天然多核苷酸，这些多核苷酸如SEQIDNO1、2和260所述，分别具有用于在植物中表达大肠杆菌HMP蛋白、酵母YHB1蛋白和欧文氏菌黄素血红蛋白的优化植物表达密码子。本发明还提供用于植物转化的重组DNA构建物，其含处于植物表达用启动子控制之下的黄素血红蛋白基因。在另一方面，本发明提供产生具有改良农学性状的转基因植物的方法，所述改良农学性状包括更快的生长速率、增加的鲜或干生物量、增加的种子或果实产量、增加的种子或果实氮含量、种子或果实中增加的游离氨基酸含量、种子或果实中增加的蛋白含量和/或营养组织中增加的蛋白含量。该方法包括以下步骤用用于表达黄素血红蛋白的重组DNA构建物转化植物细胞，将转化的植物细胞再生成表达黄素血红蛋白的转基因植物，并进行筛选，以鉴别具有改良农学性状的植物。改良农学性状的特征为在足量氮生长条件下或有限氮生长条件下更快的生长速率、增加的生长速率、增加的种子或果实氮产量、种子或果实中增加的游离氨基酸含量和/或营养组织中增加的蛋白含量。在再另一方面，本发明提供被筌别为大肠杆菌HMP同系物的示例性黄素血红蛋白，其如SEQIDNO:130至SEQIDNO:256所述，可用于实施本发明。附图和序列表简述图1.植物细胞中黄素血红蛋白的分子功能。图2.用于植物转化的重组DNA构建物pMON69471,其包含SEQIDNO:3。图3.用于植物转化的重组DNA构建物pMON67827，其包含SEQIDNO:4。图4.用于植物转化的重组DNA构建物pMON95605，其包含SEQIDNO:105。图5.用于表达密码子优化的大肠杆菌HMP基因的玉米转化构建物pMON99286。图6.用于表达密码子优化的大肠杆菌HMP基因的玉米转化构建物pMON99261。图7.用于表达密码子优化的大肠杆菌HMP基因的玉来转化构建物pMON99276。图8.用于表达大肠杆菌HMP基因的玉米转化构建物pMON94446。图9.用于表达酵母YHB基因的玉米转化构建物pMON102760。图10.用于表达大肠杆菌HMP基因的大豆转化构建物pMO簡622。SEQIDNO:l,密码子优化的大肠杆菌HMP基因。SEQIDNO:2，密码子优^匕的酵母YHB基因。SEQIDNO:3，大肠杆菌HMP基因。SEQIDNO:4:酵母YHB基因。SEQIDNO:5，大肠杆菌HMP蛋白。SEQIDNO:6，酵母YHB蛋白。SEQIDNO:7至SEQIDNO:129,大肠杆菌HMP同系物的DNA序列。SEQIDNO:130至SEQEDNO:256,大肠杆菌HMP同系物的蛋白序列。表1.下表列出了鉴别为NUCSEQIDNO的DNA序列和由对应DNA编码、以PEPSEQIDNO标识的黄素血红蛋白序列。<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>SEQIDNO:257,重组DNA构建物pMON69471的全长序列SEQIDNO:258,重组DNA构建物pMON67827的全长序列SEQIDNO:259，重组DNA构建物pMON95605的全长序列SEQIDNO:260,得自胡萝卜软腐欧文氏菌的密码子优化的HMP基因SEQIDNO:261,重组DNA构建物pMON99286的全长序列SEQIDNO:262,重组DNA构建物pMON99261的全长序列SEQIDNO:263,重组DNA构建物pMON99276的全长序列SEQIDNO:264,重组DNA构建物pMON94446的全长序列SEQIDNO:265,重组DNA构建物pMONl02760的全长序列SEQIDNO:266，重组DNA构建物pMON95622的全长序列SEQIDNO:267至SEQIDNO:272:PCR引物发明详述本发明涉及转基因植物种子以及由该种子培育的转基因植物，白的重组DNA。在有限氮生长条件或足量氮生长条件下，由本发明提供的转基因植物与对照植物性状相比具有改良的性状。特别令人感兴趣的是由本文提供的转基因种子培育的转基因植物，其中改良性状是增加的种子产量。本发明公开的重组DNA构建物包含重组DNA,其提供mRNA生产，以调节基因表达，赋予植物改良性状。本文使用的"黄素血红蛋白"指由血红素结合域和铁氧还蛋白还原酶样FAD和NAD结合域组成的蛋白。其还被称为黄素血红素蛋白、一氧化氮加双氧酶、一氧化氮加氧酶和黄素氧还蛋白还原酶。得自大肠杆菌、真养产石成杆菌(v4.ewZrap/nO、酉良酒酵母(Socdaraw少c"'cereWwae)和透明颤菌属(r^msc/〃as;)的黄素血红蛋白基因分别缩写为HMP、FHP、YHB1(或YHG)和VHP。本文使用的"基因"指染色体DNA、质粒DNA、cDNA、合成DNA或编码肽、多肽、蛋白或RNA分子的其它DNA以及侧接编码序列的涉及表达调节的区域。本文使用的"转基因种子"指其基因组已通过掺入重组DNA(例如通过本文所述的转化)而改变的植物种子。术语"转基因植物"用于指由原始转化事件生产的植物，或得自植物与转基因植物的后代或杂交的子代，只要该子代在其基因组中包含重组DNA。本文使用的"重组DNA"指具有遗传工程改造的修饰的多核苷酸，所述修饰通过将内源和/或外源元件组合在转录单元中、经诱变操作、限制酶等导入，或仅通过插入多个拷贝的天然转录单元导入。重组DNA可包含得自不同来源的DNA节段，或得自相同来源的DNA节段，但它们已进行了操作，以接合不以接合形式天然存在的DNA节段。重组多核苷酸可例如作为PCR片段存在于细胞外，或者整合入基因组如植物基因组中。本文使用的"性状"指植物或特定植物材料或细胞的生理、形态、生物化学或物理特征。在某些情况下，该特征是人眼可见的，例如种子或植抹大小，或者可通过生物化学技术检测，例如检测种子或叶的蛋白、淀粉或油含量，或者可通过观测代谢或生理过程检测，例如通过检测二氧化碳的摄取，或者可通过观测一种或多种基因的表达水平检测，例如通过使用RNA分析、RT-PCR、微阵列基因表达测定或报告基因表达系统，或者可通过农学观测来检测，例如逆境忍耐、产量或病原体耐受。本文使用的"对照植物"是无本文公开的重组DNA的植物。对照植物用于检测和对比具有这种重组DNA的转基因植物中的性状改基因植物。或者，对照植物可为含空载体或标记基因但不含产生性状改良的重组DNA的转基因植物。对照植物还可为半合子转基因植物的阴性分离子代。本文使用的"改良的性状"指相对于对照植物或参比在转基因植物中具有可检测改良的性状。在某些情况下，性状改良可定量检测。例如，性状改良可使观测性状产生至少2%的期望差异、至少5%的期望差异、至少约10%的期望差异、至少约20%的期望差异、至少约30%的期望差异、至少约50%的期望差异、至少约70%的期望差异或至少约100%的期望差异乃至更高的期望差异。在其它情况下，性状改良仅定性检测。已知性状可存在天然变异。因此，与对照植物或参比中观测到的性状分布相比，观测到的性状改良使转基因植物中的正常性状分布改变，该改变通过本文提供的统计学方法评价。性状改良包括但不限于产量增加，包括在无应力状态下增加的产量和在环境应力状态下增加的产量。应力状态可包括例如干旱、遮荫、真菌病、病毒病、细菌病、昆虫侵扰、线虫侵扰、遭受低温、受热、渗透应力、降低的氮营养利用度、降低的磷营养利用度和高植物密度。许多农学性状可影响"产量"，包括但不限于植抹高度、荚数、植抹上的结荚位、节间数、裂果发生率、粒度、小结形成和固氮的效率、营养同化效率、对生物和非生物应力的抗性、碳同化、林型、倒伏抗性、种子发芽百分率、苗木活力和幼性(juveniletrait)。可影响产量的其它性状包括发芽效率(包括在应力状态下的发芽)、生长速率(包括在应力状态下的生长速率)、穗数、每穗种子数、种子大小、种子组成(淀粉、油、蛋白)和种子填充特征。还感兴趣的是表现出期望的表型特性的转基因植物世代，所述表型特性可赋予或可不赋予植物整体产量的增加。这些特性包括包括增强的植物形态学、植物生理学或由转基因植物收获的成熟种子成分的改良。本文使用的"足量氮生长条件"指其中土壤或生长培养基包含或接受足量的氮营养物以维持健康植株生长和/或用于使植抹达到其特定植物品种或特定品系的典型产量的生长条件。足量氮生长条件在种间和种内品系间变化，还在不同的地理位置之间变化。但是，本领域技术人员了解在特定地理位置用于栽培即便不是全部也是大部分重要作物的氮非限制性生长条件的构成。例如，对于小麦栽培，参见Alcoz等，AgronomyJournal85:1198-1203(1993)，Rao和Dao,J.Am.Soc.Agronomy84:1028-1032(1992),Howard和Lessman,AgronomyJournal83:208-211(1991);关于玉米栽培，参见Wood等，J.ofPlantNutrition15:487-500(1992),Tollenear等，AgronomyJournal85:251-255(1993),Straw等，TennesseeFarmandHomeScience:ProgressReport,166:20-24(Spring1993),Dara等，J.Am.Soc.Agronomy84:1006-1010(1992),Binford等，AgronomyJournal84:53-59(1992);关于大豆栽培，参见Chen等，CanadianJournalofPlantScience72:1049-1056(1992),Wallace等,JournalofPlantNutrition13:1523-1537(1990);关于水稻栽培，参见Oritani和Yoshida,JapaneseJournalofCr叩Science53:204-212(1984);关于番痴栽培，参见Grubinger等，JournaloftheAmericanSocietyforHorticulturalScience118:212-216(1993),Cerne,M.,ActaHorticulture277:179-182,(1990);关于菠萝栽培，参见Asoegwu,S.N.,FertilizerResearch15:203-210(1988)，Asoegwu,S.N.,Fruits42:505-509(1987);关于莴苣栽培，参见Richardson和Hardgrave，JournaloftheScienceofFoodandAgriculture59:345-349(1992);关于马铃薯栽培，参见Porter和Sisson，AmericanPotatoJournal,68:493-505(1991);关于芸苔作物栽培，参见Rahn等，Conference"Proceedings,secondcongressoftheEuropeanSocietyforAgronomy"WarwickUniv.,424-425页(1992年8月23-28日)；关于香蕉栽培，参见Hegde和Srmivas,TropicalAgriculture68:331-334(1991),Langenegger和Sm池，Fruits43:639-643(1988);关于草莓栽培，参见Human和Kotze,CommunicationsinSoilScienceandPlantAnalysis21:771-782(1990);关于高粱栽培，参见Mahalle和Seth,IndianJournalofAgriculturalSciences59:395-397(1989);关于甘蔗栽培，可参见Yadav,R.L.,FertiliserNews31:17-22(1986),Yadav和Sharma,IndianJournalofAgriculturalSciences53:38-43(1983);关于糖甜菜栽培，参见Draycott等，Conference"SymposiumNitrogenandSugarBeet"InternationalInstituteforSugarBeetResearch-BrusselsBelgium,293-303页(1983)。另参见Goh禾口Haynes,"NitrogenandAgronomicPractice"载于MineralNitrogeninthePlant-SoilSystem,AcademicPress,Inc.,Orlando,Fla.,379-468页(1986),Engelstad,O.P.,FertilizerTechnologyandUse,第3版,SoilScienceSocietyofAmerica,633页(1985),Yadav和Sharmna,IndianJournalofAgriculturalSciences,53:3-43(1983)。本文使用的"氮营养物"指常用作植物氮肥的硝酸盐的任一种或任意混合物，包括但不限于硝酸钾、硝酸钩、贿酸钠、硝酸铵。本文使用的术语铵指常用作植物氮肥的铵盐的任一种或任意混合物，例如硝酸铵、氯化铵、」琉酸铵等。本领域技术人员会认识到用于大部分植物品种的这种土壤、培养基和肥料投入的构成。本文使用的"有限氮生长条件"指不包含足量氮营养物来维持健康植抹生长和/或用于使植4朱达到其在足量氮生长条件下的典型产量的植物生长条件。例如,有限氮生长条件可指具有常规氮投入的50%或以下的生长条件。本文使用的本发明转基因植物的"增加的产量"可以多种方式证明和检测，包括检验重量、每林种子数、种子重量、每单位面积种子数(即每英亩的种子或种子重量)、每英亩的蒲式耳数、每英亩的吨数、每公顷的公斤数。例如，玉米产量可以每单位生产面积的脱壳玉米粒产量检测，例如以每英亩的蒲式耳数或每公项的公吨数表示，经常在调整过水分的基础上报告，例如以15.5%水分报告。增加的产量可源于关键生化化合物如氮、磷和糖的利用度改善，或者可源于对环境应力如冷、热、干旱、盐以及害虫或病原体攻击的耐受改善。由于植物生长调节剂表达的改变或者细胞周期或光合途径的改变，改善性状的重组DNA也可用于提供具有改善的生长和发育的转基因植物，并最终增加产量。本文使用的"启动子"包括所提到的转录起点上游DNA区，其参与识别和结合RNA聚合酶和其它蛋白，以启动转录。"植物启动子"是能够在植物细胞中启动转录的启动子，无论其起源是不是植物细胞。示例性的植物启动子包括但不限于得自植物、植物病毒和包含在植物细胞中表达的基因的细菌(例如农杆菌或根瘤菌)的启动子。处于发育控制之下的启动子实例包括在诸如叶、根或种子的某些组织中优先启动转录的启动子。这种启动子被称为"组织优选的"。仅在某些组织中启动转录的启动子被称为"组织特异性的"。"细胞类型"特异性启动子主要驱动在一个或多个器官中的某些细胞类型(例如根或叶中的脉管细胞)中的表达。"请导型"或"阻抑型"启动子是处于环境控制之下的启动子。可通过诱导型启动子影响转录的环境条件的实例包括缺氧状态或某些化学物质，或光的存在情况。组织特异性启动子、組织优选启动子、细胞类型特异性启动子和诱导型启动子构成了"非组成型"启动子类别。"组成型"启动子是在大部分条件下有活性的启动子。本文使用的"反义方向"包括所提到的以其中反义链被转录的方向有效连接至启动子的多核苷酸序列。反义链与内源转录产物足够互补，使得内源转录产物的翻译经常被抑制。本文使用的"有效连接"指两个或更多个核酸片段结合在单个核酸片段上，使得一个的功能受到另一个影响。例如，在启动子能够影响编码序列表达时，该启动子与该编码序列有效连接(即编码序列处于启动子转录控制之下)。編码序列可以有义或反义方向有效连接至调节序列。本文使用的"共有序列"指由同源基因编码的蛋白保守部分的人工氨基酸序列，例如通过同系物蛋白氨基酸序列的CLUSTALW比对测定。同源基因是与第二个基因相关的基因，该基因编码的蛋白与第二个基因编码的蛋白具有相同或相似的生物功能。同源基因可通过物种形成事件产生(见直向同源物)，或通过遗传复制事件产生(见共生同源物)。"直向同源物"指不同物种中的一组同源基因，其通过物种形成由共同祖先基因进化而来。一般来说，直向同源物在进化过程中保持相同的功能；而"共生同源物"指相同物种中的一组同源基因，其由于遗传复制而彼此差异。因此，同源基因可来自相同或不同生物。本文使用的"同系物"指与第二种蛋白执行相同生物功能的蛋白，包括通过序列同一性检索鉴别的蛋白。同一性百分率指两个最优比对DNA或蛋白节段在整个组分(例如核苷酸序列或氨基酸序列)比对窗中不变的程度。测试序列和参比序列的比对节段的"同一性分数"是两个比对节段的序列共有的相同组分数除以比对窗内参比节段中的序列组分总数，该总数小于完整测试序列或完整参比序列。"同一性百分率"("同一性％")是同一性分数乘以100。"共有氨基酸序列的同一性％，，是100乘以与本发明共有氨基酸序列最优比对的测试蛋白氨基酸序列比对窗中的同一性分数。重组DNA构建物本文使用的"表达"指DNA转录以产生RNA。所获RNA可不限于编码蛋白的mRNA、与编码蛋白的mRNA互补的反义RNA或含有义和反义基因区的组合的RNA转录物，例如用于RNAi技术的RNA转录物。本文使用的表达还可指由mRNA生产编码蛋白。"异位表达"指RNA分子或蛋白在其中所述RNA或所述蛋白一般表达的细胞类型以外的细胞类型中表达，或在所述RNA或所述蛋白一般表达的时间以外的时间表达，或在所述RNA—般表达水平以外的表达水平表达。本文使用的"过表达"表示目标蛋白在转基因植物或转基因植物的发明的一个优选实施方案中，重组DNA构建物包含相对于启动子为有义方向的目标多核苷酸，以实现基因过表达。本发明提供含本文公开的多核苷酸的重组DNA构建物，其编码黄素血红蛋白。这种构建物典型地还包含有效连接至所述多核苷酸的启动子，以提供在目标植物中的表达。其它构建物组分可包括额外的调节元件，例如5'或3'非翻译区(例如聚腺香酸化位点)、内含子区以及转运肽或信号肽。在一个优选实施方案中，本发明的多核苦酸在重组DNA构建物中有效连接至在植物中有功能的启动子，以提供有义方向的多核苷酸表达，使得产生预期多肽，以实现过表达或异位表达。按照本发明制备的重组构建物一般来说还可包括3'非翻译DNA区(UTR)，其典型地包含在多核苷酸编码区后的聚腺苷酸序列。有用的3'UTR的实例包括得自根癌农杆菌(Jgra/)Grc^7'wwmwe/adem)月因脂氨酸合酶基因(nos)、编码核酮糖-l,5-二磷酸羧化酶-力。氧酶小亚基(rbcS)的基因和根癌农杆菌(v4gra6af"e〃ww/wwe/ac/em)的T7转录物的3'UTR。构建物和栽体还可包括用于将目标基因靶向植物细胞器、具体地说是靶向叶绿体、白色体或其它质体细胞器的转运肽。关于叶绿体转运肽用途的描述，参见美国专利5,188,642和美国专利第5,728,925号，这些专利通过引用结合到本文中。重组DNA构建物可包含其它元件。例如，所述构建物可包含在细菌细胞中提供复制功能和抗生素选择性的DNA节段。例如，所述构建物可包含大肠杆菌复制起点如ori322，或广泛宿主范围的复制起,存、，^口oriV、oriRi或oriColE。构建物还可包含选择标记，例如编码得自Tn5的新霉素磷酸转移酶II基因的Ec-ntpII-Tn5,其赋予对新霉素和卡那霉素的抗性；编码Tn7氨基糖苷腺苷酰基转移酶(aadA)的Spc/Str,其赋予对壮观霉素或链霉素的抗性；或庆大霉素标记(Gm,Gent)或众多已知选择标记基因中的一种。载体或构建物还可包含适于选择具有本发明DNA构建物的植物或细菌细胞的筛选标记和其它元件。设计具有合适选择标记的DNA构建物，其可赋予细胞抗生素或除草剂耐受性。抗生素耐受性多核苷酸序列包括但不限于所编码蛋白涉及对卡那霉素、新霉素、潮霉素和其它本领域已知抗生素的耐受性的多核苷酸序列。在这种栽体中的抗生素耐受基因可用编码以下的除草剂耐受性基因替代用于耐受草甘膦的S-烯醇丙酮酰基莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS,描述于美国专利第5,627,061号和5,633,435号；Padgette等，HerbicideResistantCrops,LewisPublishers,53-85，1996;以及栽于Penaloza-Vazquez等，尸/a"fCe〃A印om14:482-487,1995)和aroA(美国专利号5,094,945)、用于耐受溴苯腈的溴苯腈腈水解酶(Bxn)(美国专利号4,810,648)、用于耐受达草灭的八氬番茄红素去饱和酶(crtl(Misawa等，尸/"W4:833-840,1993;和Misawa等，尸/a",/.6:481-489,1994)、乙酰轻基酸合成酶(AHAS,Sathasiivan，等，版/.爿c/Ato.18:2188-2193,1990)。业已证实转基因植物耐受并可应用本发明方法的除草剂包括但不限于草甘膦、磺酰脲、咪唑啉酮、溴苯腈、delapon、环己二酮(cyclohezanedione)、原卟啉原氧化酶抑制剂和异恶唑草酮除草剂。选择标记、筛选标记和其它元件的其它实例在本领域众所周知，可容易地用于本发明。本领域技术人员应参考以下的详述(关于选择标记，参见Potrykus等，Mo/.Ge".199:183-188,1985;Hinchee等，5/0.『ec/"o.6:915-922,1988;Stalker等，J.舰C/iem.263:6310-6314，1988;欧洲专利申请154,204;Thillet等，J.肠/.C/亂263:12500-12508,1988;关于筛选标记，参见Jefferson，尸/aWAYo/.历o/,Rep.5:387-405,1987;Jefferson等，EMBOJ.6:3901-3907,1987;Sutcliffe等,淑/./km/.U.S.A.75:3737-3741,1978;Ow等,Sc/e脏234:856-859,1986;Ikatu等，6w.rec/mo/8:24-242,1990;关于其它元件，参见欧洲专利申"i青发明者A·巴斯拉,G·J·李,L·拉特费亚,M·D·埃杰顿,M·卢,W·吴,X·吴申请人:孟山都技术有限公司