专利名称：：无菌灌装设备外表面消毒效果的定量评价方法
技术领域：
：本发明涉及一种啤酒或其他饮料的无菌灌装设备外表面消毒效果的定量评价方法。技术背景啤酒或其他饮料灌装区域，尤其是无菌冷灌装设备外部表面的消毒效果，与灌装区域是否有发生二次污染的危险有着直接的关系。为此，生产厂家安装了灌装设备外部表面自动消毒系统，并设置了相应的消毒程序用消毒剂对设备外部表面进行消毒。对啤酒或其他饮料灌装区域设备外部表面消毒效果的评价，目前并没有定量的分析方法来评价其效果的好坏，尤其是消毒系统覆盖区域内的均一性以及不同消毒程序(包括采用不同消毒剂)之间消毒效果的对比分析评价存在着一定的困难。
发明内容本发明的目的在于针对上述问题，提供一种可快速、定量评价无菌灌装设备外部表面消毒效果的方法。为达到上述目的，本发明采用如下技术方案-无菌灌装设备外部表面消毒效果的定量评价方法，由如下步骤组成A、将接有标准微生物的检测片附着于待测设备外部表面；B、运行设备外部表面消毒程序；C、采集检测片上的残存标准微生物，并进行培养和计算，得出标准微生物残存量数值;D、比较标准微生物残存量数值和原始量数值，得出评价结果。上述标准微生物为枯草芽孢杆菌，或枯草杆菌。枯草芽孢杆菌或枯草杆菌在啤酒中不能存活和繁殖，不会对啤酒造成危害，既使在试验中，假如灌装区域消毒不完全，残留的枯草芽孢杆菌或枯草杆菌也不会形成二次污染；枯草芽孢杆菌或枯草杆菌易于培养，用常规的营养琼脂培养基即可，同时其个体形态较易在显微镜下观察和辨别，尤其是枯草芽孢杆菌具有其明显典型的芽孢体。作为优选，枯草芽孢杆菌或枯草杆菌的浓度为106CfU/ml~108Cfii/ml。进一步，上述检测片携带标准微生物的量为106个/检测片。上述检测片是厚度为0.1~0.5mm的金属片。所述金属片的规格为2535rnrnx5565mm。所述的金属片可为铝材片、铁材片或不锈钢材片，优选易于裁剪的铝材片。上述D步骤中，采用如下公式计算出杀菌力作为评价结果杀菌力-lg标准微生物原始量数值-lg标准微生物残存量数值。杀菌力值越大，表明消毒效果越理想。对于啤酒和其他饮料厂来说，使用枯草芽孢杆菌的杀菌力值要求^1.5，使用枯草杆菌的杀菌力值要求^3.5。本发明的优点在于能用试验数据快速、定量地评价无菌灌装设备外表面的消毒效果，并能判断消毒系统覆盖区域内各个地方的消毒效果是否均一，也可以作为一种无菌灌装设备外表面不同消毒程序(含不同消毒剂)间消毒效果的对比分析评价手段。图l是本发明的流程图。现结合附图和实施例对本发明作进一步说明具体实施方式如图1所示，本发明所述的无菌灌装设备外部表面消毒效果的定量评价方法，由如下步骤组成A、将接有标准微生物的检测片附着于待测设备外部表面B、运行设备外部表面消毒程序；C、采集检测片上的残存标准微生物，并进行培养和计算，得出标准微生物残存量数值；D、比较标准微生物残存量数值和原始量数值，得出评价结果。在上述A步骤中，需完成如下操作1)检测片磨花处理，清洗和消毒将厚度为(U0.5mm的金属片裁剪成规格为25~35mmx5565mm的检测片；对检测片一侧表面的三分之二面积用360#水砂纸反复打磨，直至检测片表面有明显可见的较密凹痕为止。处理后，用水刷洗干净，然后用75%酒精浸泡30分钟或18(TC烘箱干燥1小时消毒，备用。2)将接有一定浓度标准微生物的检测片粘附于待测设备外部表面取一定量(《5(Hxl)106cfu/ml108cfu/ml枯草芽孢杆菌或枯草杆菌菌悬液，通过移液枪均匀地涂布在检测片经过磨花处理的表面上。待检测片上菌液完全干燥后，牢固安放于所选定的设备外表面。另外留4片检测片作为空白对照样品。上述B步骤中，在安放好检测片后，正常运行设备外部表面的自动消毒程序。上述C步骤中，需完成如下操作1)采集检测片上的残存标准微生物在自动消毒程序完成后，在现场将检测片经磨花处理的部分借助无菌处理过的剪刀或其他裁剪工具分别直接收集到容量为120ml的无菌取样袋内；作为空白对照样品的检测片同样分别收集到容量为120ml的无菌取样袋内。向每个袋内加入100ml无菌生理盐水,然后将装有检测片的样品袋放在超声波水浴内震荡5~10分钟，以将其上面的残留标准微生物洗脱下来。2)标准微生物培养和计数对所获得的液体进行膜过滤处理后培养，空白样品进行梯度稀释后培养，以确定初始数量。所用培养基为营养琼脂培养基。样品在2526'C培养23天后计数，即得到检测片上标准微生物的残存量和空白样品上的标准微生物的原始量。上述D步骤中，计算出平均细菌减少量(以对数级别计，即杀菌力)。杀菌力(平均细菌减少量，以对数级别计)=lg(标准微生物的原始量)_lg(处理后平均残存量)。杀菌力值越大，表明消毒效果越理想。对于啤酒和其他饮料厂来说，使用枯草芽孢杆菌的杀菌力值要求>1.5，使用枯草杆菌的杀菌力值要求^3.5。以下为对某啤酒生产线灌装区域的设备外表面实施本发明1、检测片为厚度为0.2mm的铝片，规格为25~35mmx5565mra，共24片。对检测片一侧表面的三分之二面积用360#水砂纸反复打磨，直至铝片表面有明显可见的较密凹痕为止。处理后，用水刷洗干净，然后用75%酒精浸泡30分钟消毒。2、取50^1的107cfu/ml枯草杆菌菌液，通过移液枪均匀地涂布在检测片作过磨花处理部分的表面上。在通风橱内等待检测片上菌液完全干燥后，将20片检测片牢固安放于某啤酒生产线灌装区域的设备外表面。另外留4片检测片作为空白对照样品。3、正常启动某啤酒生产线灌装区域设备外部表面的自动消毒程序。消毒剂为Vortexx(有效成分为过氧乙酸)。灌装区域分为IO组进行消毒，每组自动消毒时间如下<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>4、自动消毒程序完成后，在现场将铝片作过磨花处理过的部分用消毒过的剪刀剪下直接收集到容量为120ral的无菌取样袋内，然后向每个袋内加入100ml无菌生理盐水,并将样品袋放在超声波水浴内震荡8分钟。空白对照样品作同样处理。5、对所获得的液体用孔径微0.45微米的膜片进行膜过滤处理，同时将空白样稀释成100倍，1000倍和10000倍后分别用营养琼脂培养基、2526"C培养3天后计数，即得到检测片上标准微生物的残存量和原始菌量。<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>平均原始细菌量=1.1E+06消毒处理后平均细菌量=1.8E+026、此次设备外部表面消毒效果评价根据杀菌力(平均细菌减少量，以对数级别计)=lg(平均原始细菌量)-lg(处理后平均平均残存细菌量)，该次Vortexx自动消毒程序的杀菌力值为3.79，整个灌装区域的杀菌力值范围为3.643.87，说明该消毒程序效果比较理想，而且消毒所能覆盖的区域内各部分消毒效果比较均一。权利要求1、无菌灌装设备外表面消毒效果的定量评价方法，其特征在于，由如下步骤组成A、将接有标准微生物的检测片附着于待测设备外部表面；B、运行设备外部表面消毒程序；C、采集检测片上的残存标准微生物，并进行培养和计算，得出标准微生物残存量数值；D、比较标准微生物残存量数值和原始量数值，得出评价结果。2.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松龙的生产方法，其特征在于所述的简单节杆菌是通过下述方法培养的培养基在120122"C下，湿热灭菌1525min;斜面培养基成分为葡萄糖和酵母膏，3033'C下恒温培养1~2天，3-5'C保藏待用，保藏时间在1525天。3.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松龙的生产方法，其特征在于所述的种子培养基及发酵培养基成分均为葡萄糖、玉米浆、酵母膏和磷酸二氢钾，采用自来水配制，初始pH值为6.77.0。4.根据权利要求1所述的醋酸泼尼松龙的生产方法，其特征在于所述的亲水性有机溶剂为甲醇、乙醇、二甲基亚砜中的一种。全文摘要本发明涉及一种啤酒或其他饮料的无菌灌装设备外表面消毒效果的定量评价方法。所述定量评价方法，由如下步骤组成A.将接有标准微生物的检测片附着于待测设备外部表面；B.运行设备外部表面消毒程序；C.采集检测片上的残存标准微生物，并进行培养和计算，得出标准微生物残存量数值；D.比较标准微生物残存量数值和原始量数值，得出评价结果。本发明的优点在于能用试验数据快速、定量地评价无菌灌装设备外表面的消毒效果，并能判断消毒系统覆盖区域内各个地方的消毒效果是否均一，也可以作为一种无菌灌装设备外表面不同消毒程序(含不同消毒剂)间消毒效果的对比分析评价手段。文档编号C12Q1/06GK101210263SQ20071003276公开日2008年7月2日申请日期2007年12月21日优先权日2007年12月21日发明者方贵权,李惠萍申请人:广州珠江啤酒股份有限公司