专利名称：：狭叶荨麻多糖的制备及其用途的制作方法
技术领域：
：本发明属于食品、医药
技术领域：
，尤其是指狭叶荨麻多糖的制备及其抗疲劳的用途。
背景技术：
：荨麻为被子植物门、荨麻科、荨麻属(Urtica.L.)，一年生或多年生草本植物，味辛、苦、温、涩、有小毒。生命力极强，天然资源丰富，尤其在我国东北部资源更为丰富。狭叶荨麻(Urticaangustifolia)，亦称为蜇麻，多年生草本植物。茎高40150厘米，四棱形，有螫毛，分枝或不分枝。叶对生，披针形或狭卵形，长410厘米，宽1.22.8厘米，先端渐尖，基部圆形，边缘有尖锯齿，上面疏生短毛，下面沿脉上有疏生短毛；托叶分生，条形。雌雄异株，花序长达4厘米，多分枝；雄花花被片4，雄蕊4;雌花较雄花小，花被片4，在果期增大，柱头画笔头状。皮果卵形，扁，长约1毫米，光滑。在东北地区民间常用于治疗风湿性关节炎、荨麻疹、蛇咬伤、糖尿病等症。具有袪风除湿，活血止痛，平肝定惊，消积通便，解毒等功效。多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血糖、降血脂、保肝等多种功能。
发明内容本发明提供一种狭叶荨麻多糖的制备及其用途，狭叶荨麻多糖具有抗疲劳的功能。本发明狭叶荨麻多糖多糖的提取方法是一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加810倍量的水、加热到IOO'C，浸提23次，每次23小时；二、过滤，合并滤液，减压浓縮、浓縮至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓縮挥去溶剂，冷冻干燥。本发明狭叶荨麻多糖在制备具有抗疲劳功能的药物中的应用。本发明还提供用狭叶荨麻多糖以及药学上可接受的载体或赋形剂制备的各种新药。这些新药包括口服给药制剂、舌下片、栓剂、泡腾片、注射剂等。口服给药制剂包括口服固体制剂、口服液体制剂。口服固体制剂可以是片剂、胶囊、颗粒剂、丸剂、锭剂等。这些制剂中，除包括本发明总有效部位外，还可以任选含有药学上可接受的填充剂、助流剂、润滑剂、着色剂、矫味剂等。这些制剂还可以根据需要制备成缓释或控释制剂。口服液体制剂可以是溶液、混悬液、乳化液等。这些制剂中，除包括本发明总有效部位外，还可以任选含有药学上可接受的溶剂、助溶剂、增溶剂、助悬剂、乳化剂、表面活性剂、矫味剂等。本发明提供的以狭叶荨麻多糖为原料制得的新药不仅包括单方制剂，还包括在复方制剂中添加狭叶荨麻多糖作为活性成分的药物。本发明的有益效果是抗疲劳的效果明显，狭叶荨麻多糖人用量为0.1~1.5克/天，具有抗疲劳的功能，且安全无毒作用。具体实施方式下边通过狭叶荨麻多糖的药效学实验来进一步说明本发明。1、负重游泳试验检验原理，运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最直接的表现，游泳时间的长短可以反应动物运动疲劳的程度。仪器与器材游泳箱(大小约50cmx50cmx40cm);AL104电子天平，梅特勒-托利多仪器有限公司；铝丝；实验动物清洁级昆明种小鼠，体重1822g。剂量分组实验设三个剂量组和一个空白对照组，低、中、高剂量组受试量分别为100mg/Kg、200mg/Kg、300mg/Kg，浓度分别为4g/ml、8g/ml、12g/ml。实验步骤末次给予受试样品30min后，置小鼠在游泳箱中游泳。水深不少于30cm，水温25。C土1.(TC，鼠尾根部负荷5%体重的铝丝。记录小鼠自游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时间。实验结果与分析表l多糖对小鼠负重游泳时间的影响(X土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>*;与对照组比有显著差异(P<0.05)由表1可见，与对照组相比，低剂量组游泳时间提高了85.4%，中剂量组游泳时间提高了114.6%，高剂量组游泳时间提高了151.2%(P<0.05)。2、血清尿素氮的测定试验方法末次给小鼠受试物30min后，在温度为30。C的水中不负重游泳90min，休息60min后拨眼球取血。于4。C静止3h后2000r/min离心15min，取出血清，用全自动生化分析仪测定血清尿素氮含量。小鼠尿素氮实验结果与分析见表2:<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>与对照组比*P<0.05;**P<0.01由表2可见，与对照组相比，低剂量组小鼠运动后的血清尿素氮降低了12.8%(P<0.05);中剂量组降低了13.6%(P<0.05);高剂量组降低了19.8%(P<0.01)。3、肝糖原测定蒽酮法。检测原理蒽酮可与游离糖或多糖起反应，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收。测定其光密度，可以确定糖原的含量。仪器和试剂723型分光光度计，辽宁科欣科学器材开发公司，Z200A离心机，德国哈默(Hermle)，fsh-2可调高速电动匀浆器，无锡中恒实验仪器有限公司，振荡器，移液泵，沸水浴，灌胃针头，手术器械，玻璃漏斗，加样器，2mL、5mL、10mL吸量管，20mL带塞刻度试管，10mL带塞离心管。试剂5%三氯醋酸(用蒸馏水配)(TCA)，葡萄糖标准液，浓硫酸(AR)，蒽酮试剂。蒽酮试剂溶液中含0.05%的蒽酮，1%的硫脲，用72X的H2S04配制。配制方法如下①72XH2S04配制烧杯中加入280mL蒸馏水，再加入高纯度的浓硫酸720mL(比重1.84)。②蒽酮试剂配法当H2S04温度降至80-9(TC时放入500mg纯的蒽酮，10g高纯度的硫脲，适当摇动烧杯混匀。冷却后存放于冰箱中，可保存两周。实验方法实验动物清洁级昆明种小鼠，体重18—22g。剂量设计和分组，实验设三个剂量组和一个空白对照组，低、中、高剂量组受试量分别为100mg/Kg、200mg/Kg、300mg/Kg，浓度分别为4g/ml、8g/ml、12g/ml。实验步骤末次给样后30min处死动物，取肝脏经生理盐水漂洗后用滤纸吸千，精确称取肝脏100mg，加入8mLTCA，每管匀桨lmin，将匀浆液倒入离心管，以3000转/min离心15min，将上清液转移至另一试管内。取lmL上清液放入lOmL离心管中，每管加入95%的乙醇4mL，充分混匀至两种液体间不留有界面。用干净塞子塞上，室温下竖立放置过夜(也可选用将试管放在37-4(TC水浴3h)。沉淀完全后，将试管于3000转/min离心15min。小心倒掉上清液并使试管倒立放置10min用2mL蒸馏水溶解糖原，加水时将管壁的糖原洗下。如管底的糖原不立即溶解，振荡管子直到完全溶解。制作试剂空白和标准管-.试剂空白吸2mL蒸馏水到干净离心管；标准管吸0.5mL葡萄糖标准液，含100mg/dL葡萄糖和1.5mL蒸馏水放入同样的管子。此时将10mL蒽酮试剂用力加入各管，液流(蒽酮试剂)直接进入管子中央，保证充分混合好。从管子中注入蒽酮试剂时起，将管子放在冷水龙头下冲凉。在所有管子都达到凉水温度后，将其浸于沸水浴(水浴深度略高于管子液面)15min，然后移到冷水浴，冷却到室温。将管内液体移入比色管，在620nm波长下，用试剂空白管调零后测定吸光度。并根据标准曲线计算出糖原含量，根据所称取的肝脏重量换算成肝糖原含量(以mg/g肝表示)，并进行统计分析。糖原含量计算DU(样品A)V(提取液的体积ml)肝糖原(mg/100g肝)=-XO.5X-X100X0.9DS(标准A)'G(干重g)DU:样品管吸光度，DS:标准管吸光度，0.5:为0.5mL葡萄糖标准液中的葡萄糖含量。0.9:为将葡萄糖换算成糖原的系数。提取液体积为8ML;200910067177.2肝组织克数为0.1g;实验结果与分析表3多糖对小鼠肝糖原的影响(X±SD)动物只数给药量(mg/Kg)氮含量(mg/g)空白对照组低剂量组中剂量组高剂量组与对照组比**P<0.01由表3可见，与对照组相比，低剂量组小鼠运动后的肝糖原含量提高了87.0%;中剂量组提高了469.6。/0(P〈0.01);高剂量组提高了747.8%(P<0,01)。4、结果与讨论经口灌胃小鼠IO天多糖后，与对照组相比低剂量、中剂量、高剂量都提高了小鼠的游泳时间，高剂量组与空白对照组相比有统计学的意义，且P<0.05;运动后的小鼠与空白对照组相比，血清尿素氮含量均低于空白对照组，且均具有统计学意义，低剂量组与空白对照P<0.05，中剂量组与空白对照P〈0.05，高剂量组与空白对照P〈0.01;肝糖原含量均高于空白对照组，且中剂量和高剂量组都有统计学意义，中剂量组与空白对照组相比P<0.01;高剂量组与空白对照组相比P<0.01。因此，中、高剂量组多糖对小鼠具有抗疲劳的作用。实施例1狭叶荨麻多糖的制备一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加8倍量的水、加热到10(TC，浸提3次，每次3小时；二、过滤，合并滤液，减压浓縮、浓缩至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓縮挥去溶剂，冷冻干燥。实施例2一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加9倍量的水、加热到10(TC，浸提3次，每次2.5小时；二、过滤，合并滤液，减压浓縮、浓縮至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓縮挥去溶剂，冷冻干燥。实施例3一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加8倍量的水、加热到10(TC，浸提2次，每次2小时；二、过滤，合并滤液，减压浓縮、浓縮至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95%乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓縮挥去溶剂，冷冻干燥。实施例4本发明胶囊剂的制备狭叶荨麻多糖50.00g,药用淀粉200.00g，二者充分混合，装胶囊，制成1000粒胶囊，每粒重0.25g，含狭叶荨麻多糖50mg。实施例5本发明片剂的制备狭叶荨麻多糖25.00g,制备片剂的常规辅料225.00g，压片，审U成1000片，每粒重0.25g，含狭叶荨麻多糖25mg。权利要求1、一种狭叶荨麻多糖的制备方法，包括下列步骤一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加8～10倍量的水、加热到100℃，浸提2～3次，每次2～3小时；二、过滤，合并滤液，减压浓缩、浓缩至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95％乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓缩挥去溶剂，冷冻干燥。2、狭叶荨麻多糖在制备具有抗疲劳功能的药物中的应用。全文摘要本发明涉及狭叶荨麻多糖的制备及其用途，属于食品、医药领域。一、取狭叶荨麻，阴干、粉碎，加8～10倍量的水、加热到100℃，浸提2～3次，每次2～3小时；二、过滤，合并滤液，减压浓缩、浓缩至原液体积1/12，三、以3500转/分钟、离心15分钟，取上清液，95％乙醇醇沉；四、Sevage法脱蛋白3次，以3500转/分钟、离心10分钟，浓缩挥去溶剂，冷冻干燥。狭叶荨麻多糖在制备具有抗疲劳功能的药物中的应用。其抗疲劳的效果明显，且安全无毒作用。文档编号A23L1/29GK101580552SQ20091006717公开日2009年11月18日申请日期2009年6月24日优先权日2009年6月24日发明者张海悦申请人:张海悦