专利名称：一种保健酒及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种酒及其制备方法，更具体地说，本发明涉及一种保健酒及其制备
方法。
背景技术：
蛇属于爬行纲蛇目。身体细长，四肢退化，身体表面覆盖鳞片。大部分是陆生，也 有半树栖、半水栖和水栖的。 一般分无毒蛇和有毒蛇。毒蛇和无毒蛇的体征区别有毒蛇的 头一般是三角形的；口内有毒牙，牙根部有毒腺，能分泌毒液；一般情况下尾很短，并突然 变细。无毒蛇头部是椭圆形；口内无毒牙；尾部是逐渐变细。降纤酶(Defibrase)是从蝮 蛇蛇毒中提取的一种丝氨酸蛋白酶，属胰蛋白酶。我国研制生产的有蝮蛇抗栓酶、去栓酶等 (1997卫药准字01号)，后统一更名为降纤酶。它是溶血栓微循环治疗剂，为治疗血栓的首 选药物。 地龙为环节动物门钜顿科动物参环毛顿、通俗环毛顿、威廉环毛顿或柿肓毛顿的 干燥体。前一种习称"广地龙"，后三种习称"沪地龙"，主产于广西、广东、福建。性寒，味成。 清热定惊，通络、平喘，利尿；用于高热神昏惊痫抽搐，关节麻痹，肢体麻木，半身不遂，肺热 喘咳，尿少水肿，高血压症。地龙是我国重要的中药材之一。最早的中药学专著《神农本草 经》中收载的67种动物药中就有蚯顿。李时珍著《本草纲目》虫部42巻中用蚯顿入药的处 方有40多种。蚯顿纤溶酶(EarthwormFibrinolytic Enzyme，EFE)。它是存在于蚯顿体内 的丝氨酸蛋白水解酶，具有纤溶活性或纤溶酶原激活活性。EFE是一组能水解血栓的蛋白水 解酶，对多种老年慢性病有较好的疗效且无毒副作用。 传统的蛇酒、地龙酒或者龙蛇酒多为整体入药或水煎剂，人体能够吸收的有效成 分少，疗效较差。目前没有见到成分为蛇毒降纤酶以及蚯蚓纤溶酶的龙蛇酒。蛇毒降纤酶是 抢救心、脑、肺以及肾栓塞首选药物，多为静脉注射剂，鲜有以酒的形式出现。蚯蚓纤溶酶对 高血压、冠心病、脑中风、糖尿病、免疫力低下及前列腺炎等多种老年慢性病有较好的疗效。
发明内容
本发明旨在克服上述缺陷，提供一种蛇毒降纤酶与蚯蚓纤溶酶并用以增强疗效，
降低毒副作用和成本的保健酒及其制备方法。其中加入的壳聚糖兼有保持活性，防腐防霉
及多种功效，加入的中药增强保健作用。 为了实现上述目的，本发明的技术方案如下 —种保健酒，其特征在于原料组成按如下重量份数为 蛇毒降纤酶混合液 0. 1-1 蚯顿纤溶酶混合液 0. 5-2 白酒 72-99.4。 所述原料中还有0. 1-1份壳聚糖和1-3份蜂蜜。 所述原料中还有三七醇提液1-5份、红花醇提液0. 1-1份、甘草水提液1-5份、川牛膝水提液1-5份、剌五加水提液1-5份。蛇毒降纤酶混合液0. 2蚯蚓纤溶酶混合液0. 6白酒90壳聚糖0. 3蜂蜜2三七醇提液2红花醇提液0. 3甘草水提液3川牛膝水提液2剌五加水提液2
一种保健酒的制备方法，其特征在于步骤如下
A、蛇毒预处理、静置，使蛇毒液神经毒素失活，然后进行抗失活防变性处理，保持
降纤酶的活性； B、超滤，制备蛇毒降纤酶混合液；
C、蚯顿预处理，制备蚯顿纤溶酶混合液； D、混合在配料罐中加入蛇毒降纤酶混合液，搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶 混合液，混合均匀，在4-l(TC条件下静置10-25min，然后加入白酒，灌装置于冰柜中或冷藏 库中4-l(TC贮存，即得保健酒成品。 所述A步骤的蛇毒预处理是取蛇毒液置于玻璃杯中或不锈钢桶中，在20-3(TC环 境下静置20-35min，使其神经毒素失活；抗失活防变性处理是将上述静置的蛇毒液在搅 拌下使其溶于O. 005mol/l pH = 8内含O. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液中，静置10-20min， 使其粗毒中所含金属蛋白酶失活，保持降纤酶的活性，防止变性；所述磷酸盐缓冲液体积是 蛇毒液体积的1-5倍；0. lmol/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的1-5%。
所述B步骤具体过程是将上述金属蛋白酶失活的蛇毒溶液装入超滤机中，用含 1 X 10—4mol/l EDTA的与步骤B中相同的磷酸盐缓冲液超滤，充分超滤平衡得超滤液；所述 磷酸盐缓冲液体积为蛇毒溶液的5-10倍；1 X 10—4mol/l EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的
1- 5%。 所述B步骤中向上述超滤物中加入有蜂蜜、壳聚糖的混合液，所述蜂蜜体积为超 滤物的1_5%，壳聚糖体积为超滤物的0. 1-0. 5%。 所述C步骤中蚯蚓预处理是取人工养殖蚯蚓为原料，经水洗去杂放入水中浸泡 0. 5h-2h，轻轻搅动，尽量排出内脏污物，洗净；制备蚯蚓纤溶酶混合液的过程是
捣碎将洗净的蚯蚓在水中经臭氧消毒后洗净，加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐 水，在组织捣碎机中匀浆；所述蚯蚓与生理盐水的质量体积比为l : i-i : 2;0. 1%苯甲酸 体积为生理盐水体积的1-5% ; 提取将蚯蚓匀浆后置于不锈钢桶中，加入等体积的0. lmol/1氯化钠溶液，在
2- l(TC条件下搅拌提取3-10h，然后以6000r/min离心10_30min，收集上清液，即得蚯蚓纤 溶酶粗品；
回收向上一步的离心沉淀物中依次加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐水，胰凝 乳蛋白酶以及0. 05mol/l pH = 8内含0. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液，在32-40。C孵育 48-72h，最后将酶解液用4层纱布过滤，合并滤液，以3000r/min离心10_25min，收集沉淀酶 解上清液；所述离心沉淀物与生理盐水的质量体积比为1 : i-i : 2;0. 1%苯甲酸体积为 生理盐水体积的0. 5-4% ;胰凝乳蛋白酶质量为离心沉淀物质量的1-5% ;离心沉淀物与磷 酸盐缓冲液的质量体积比为l : 1.5-1 : 3. 5 ;0. lmol/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的 1-5% ; 混合将蚯蚓纤溶酶粗品与沉淀酶解上清液混合即得蚯蚓纤溶酶混合液。
所述D步骤是在配料罐中按配方先加入蜂蜜、壳聚糖，再加入蛇毒降纤酶混合液， 搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液，混合均匀，在4-l(TC条件下静置10-25min，然 后加入白酒，灌装置于冰柜中或冷藏库中4-l(TC贮存。 所述加入白酒时，或加入白酒的前后加入三七醇提液、红花醇提液、甘草水提液、 川牛膝水提液以及剌五加水提液，边加边搅拌，用5X柠檬酸调pH 5-6.5，甜味剂调味。
本发明带来的有益效果 1、本发明提供的保健酒中加入了蛇毒降纤酶和蚯蚓纤溶酶，双酶并用可减轻毒 性，提高防治心血管疾病的功效，有很好的抗栓效果，配合中药活血化瘀，解毒止血。
2、壳聚糖和蜂蜜有保持酶活性的作用，防止蛇毒降纤酶和蚯蚓纤溶酶失活。
3、蛇毒处理中加入含EDTA的磷酸盐缓冲液可使蛇毒中所含金属蛋白酶失活，保 持降纤酶的活性，防止变性。 4、本发明提供的保健酒中海可以加入中药，增强其保健作用 (D三七止血化瘀、消肿止痛。具有良好的止血功效，显著的造血功能，能加强和 改善冠脉微循环。 (2)红花气香行散，入血分具有活血通经，祛瘀止痛的功效。主治瘀滞腹痛，胸痹 心痛，血积，跌打瘀肿，关节疼痛，斑疹紫暗。 (3)甘草补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛。主治脾胃虚弱，倦怠乏力，心 悸气短，咳嗽痰多，脘腹，四肢挛急疼痛。 (4)川牛膝逐瘀通经，通利关节，利尿通淋。主治关节痹痛，足痿筋挛，尿血血淋， 跌扑损伤。 (5)剌五加益气健脾，补肾安神。主治脾肾阳虚，体虚乏力，食欲不振，腰膝酸痛， 失眠多梦。
具体实施方式
实施例1 —种保健酒，原料组成按如下重
蛇毒降纤酶混合液
蚯顿纤溶酶混合液
白酒
实施例2 —种保健酒，原料组成按如下重
6
量份数为 0. 3 0. 7 89. 5
量份数为
蛇毒降纤酶混合液0. 7蚯蚓纤溶酶混合液1. 2白酒75. 6实施例3一种保健酒，原料组成按如下重量份数为蛇毒降纤酶混合液0. 8蚯蚓纤溶酶混合液1. 9白酒90. 1实施例4根据实施例1-3， 一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料壳聚糖0. 3蜂蜜1. 2实施例5根据实施例1-3， 一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料壳聚糖0. 5蜂蜜1. 8实施例6根据实施例1-3， 一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料壳聚糖0. 8蜂蜜2. 1实施例7根据实施例4-6，一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料三七醇提液2. 7红花醇提液0. 5甘草水提液2. 2川牛膝水提液1. 9剌五加水提液2. 5实施例8根据实施例4-6，一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料三七醇提液3. 6红花醇提液0. 7甘草水提液3. 4川牛膝水提液3. 1剌五加水提液3. 4实施例9根据实施例4-6，一种保健酒，还可以加入以下重lt份数的原料三七醇提液4. 1红花醇提液0. 8甘草水提液4. 6:0095] 川牛膝水提液 3.8
:0096] 剌五加水提液 4. 6
:0097] 实施例10
:0098] 根据实施例l-3，一种保健酒，还可以加入以下重量份数的原料
:0099] 三七醇提液 2. 8
:0100] 红花醇提液 0.6
:0101] 甘草水提液 2.5
:0102] 川牛膝水提液 2. 1
:0103] 剌五加水提液 2.7
:0104] 实施例11
:0105] 根据实施例l-3，一种保健酒，还可以加入以下重量份数的原料
:0106] 三七醇提液 3.5
:0107] 红花醇提液 0.7
:0108] 甘草水提液 3.3
:0109] 川牛膝水提液 3.2
:0110] 剌五加水提液 3.7
:oiii] 实施例i2
:0112] 根据实施例l-3，一种保健酒，还可以加入以下重量份数的原料
:0113] 三七醇提液 4.3
:0114] 红花醇提液 0.9
:0115] 甘草水提液 4.5
:0116] 川牛膝水提液 3.9
:0117] 剌五加水提液 4.4 实施例13 :蛇毒降纤酶混合液的制备 取蝮蛇毒液置于玻璃杯中或不锈钢桶中，在22t:环境下静置27min，将静置的蝮 蛇毒液在搅拌下使其溶于0. 005mol/l pH = 8内含0. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液中，静 置12min。磷酸盐缓冲液体积是蝮蛇蛇毒液体积的2倍；0. lmol/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲 液体积的3%。 将上一步中的蛇毒溶液装入超滤机中(截留分子量5000以上)，用含1X10—4mol/ 1 EDTA的与步骤B中相同的磷酸盐缓冲液超滤。磷酸盐缓冲液体积为蛇毒溶液的7倍； 1 X 10—4mol/l EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的2% 。 向超滤物中加入蜂蜜、壳聚糖的混合液以保持酶活性，即得蛇毒降纤酶混合液。蜂 蜜体积为超滤物的2%，壳聚糖体积为超滤物的0. 2%。
实施例14 :蛇毒降纤酶混合液的制备 取蝮蛇毒液置于玻璃杯中或不锈钢桶中，在27t:环境下静置32min，将静置的蝮 蛇毒液在搅拌下使其溶于0. 005mol/l pH = 8内含0. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液中，静 置18min。磷酸盐缓冲液体积是蝮蛇蛇毒液体积的4倍；0. lmol/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲 液体积的4%。 将上一步中的蛇毒溶液装入超滤机中(截留分子量5000以上)，用含1X10—4mol/
81 EDTA的与步骤B中相同的磷酸盐缓冲液超滤。磷酸盐缓冲液体积为蛇毒溶液的9倍； 1 X 10—4mol/l EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的3% 。 向超滤物中加入蜂蜜、壳聚糖的混合液以保持酶活性，即得蛇毒降纤酶混合液。蜂 蜜体积为超滤物的3%，壳聚糖体积为超滤物的0. 4%。
实施例15 :蚯蚓纤溶酶混合液的制备 取人工养殖的赤子爱胜蚓为原料，经水洗去杂放入水中浸泡lh，轻轻搅动，排出内 脏污物。将洗净的蚯蚓在水中经臭氧消毒后洗净，加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐水，在组 织捣碎机中匀浆。蚯蚓与生理盐水的质量体积比为1 : 1.2;0. 1%苯甲酸体积为生理盐水 体积的3%。 将蚯蚓匀浆后置于不锈钢桶中，加入等体积的0. lmo1/1氯化钠溶液，在5t:条件 下搅拌提取4h，然后以6000r/min离心14min，收集上清液，即得蚯蚓纤溶酶粗品。向上一步 的离心沉淀物中依次加入内含0. 1%苯甲酸的生理盐水，胰凝乳蛋白酶以及0. 05mol/l pH =8内含0. lmo1/1 EDTA的磷酸盐缓冲液，在34t:孵育50h，最后将酶解液用4层纱布过滤， 合并滤液，以3000r/min离心13min，收集沉淀酶解上清液。离心沉淀物与生理盐水的质量 体积比为l : 1.3 ;0. 1%苯甲酸体积为生理盐水体积的1.2%;胰凝乳蛋白酶质量为离心沉 淀物质量的3% ;离心沉淀物与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1 : 1.8;0. lmo1/1 EDTA体 积为磷酸盐缓冲液体积的2%。 将蚯蚓纤溶酶粗品与沉淀酶解上清液混合即得蚯蚓纤溶酶混合液。
实施例16 :蚯蚓纤溶酶混合液的制备 取人工养殖的赤子爱胜蚓为原料，经水洗去杂放入水中浸泡1. 5h，轻轻搅动，排出 内脏污物。将洗净的蚯蚓在水中经臭氧消毒后洗净，加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐水，在 组织捣碎机中匀浆。蚯蚓与生理盐水的质量体积比为1 : l.S;O. 1%苯甲酸体积为生理盐 水体积的4%。 将蚯蚓匀浆后置于不锈钢桶中，加入等体积的0. lmo1/1氯化钠溶液，在『C条件 下搅拌提取9h，然后以6000r/min离心25min，收集上清液，即得蚯蚓纤溶酶粗品。向上一步 的离心沉淀物中依次加入内含0. 1%苯甲酸的生理盐水，胰凝乳蛋白酶以及0. 05mol/l pH =8内含0. lmo1/1 EDTA的磷酸盐缓冲液，在38t:孵育65h，最后将酶解液用4层纱布过滤， 合并滤液，以3000r/min离心20min，收集沉淀酶解上清液。离心沉淀物与生理盐水的质量 体积比为l : 1.5;0. 1%苯甲酸体积为生理盐水体积的3%;胰凝乳蛋白酶质量为离心沉淀 物质量的4% ;离心沉淀物与磷酸盐缓冲液的质量体积比为1 : 3. 2;0. lmo1/1 EDTA体积 为磷酸盐缓冲液体积的4%。 将蚯蚓纤溶酶粗品与沉淀酶解上清液混合即得蚯蚓纤溶酶混合液。
实施例17 在配料罐中按配方先加入蜂蜜14kg、壳聚糖4kg，再加入蛇毒降纤酶混合液3kg， 搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液7kg，混合均匀，在5t:条件示静置16min，然后 加入三七醇提液22kg、红花醇提液2kg、甘草水提液26kg、川牛膝水提液27kg以及剌五加水 提液23kg，边加边搅拌，用5%柠檬酸调pH 5. 2，甜味剂调味，最后余量全为白酒，灌装置于 冰柜中或冷藏库中5t:贮存。
实施例18
9
在配料罐中按配方先加入蜂蜜25kg、壳聚糖6kg，再加入蛇毒降纤酶混合液6kg， 搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液12kg，混合均匀，在7t:条件下静置19min，然后 加入三七醇提液35kg、红花醇提液5kg、甘草水提液37kg、川牛膝水提液39kg、剌五加水提 液34kg以及750kg白酒，边加边搅拌，用5%柠檬酸调pH 5. 8，甜味剂调味，最后灌装置于 冰柜中或冷藏库中7t:贮存。
实施例19 在配料罐中按配方先加入蜂蜜28kg、壳聚糖8kg，再加入蛇毒降纤酶混合液9kg， 搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液18kg，白酒820kg，混合均匀，在『C条件下静置 22min，然后加入三七醇提液46kg、红花醇提液7kg、甘草水提液45kg、川牛膝水提液42kg以 及剌五加水提液47kg，边加边搅拌，用5X柠檬酸调pH 6.2，甜味剂调味，最后灌装置于冰 柜中或冷藏库中『C贮存。
权利要求
一种保健酒，其特征在于原料组成按如下重量份数为蛇毒降纤酶混合液0.1-1蚯蚓纤溶酶混合液0.5-2白酒72-99.4。
2. 根据权利要求l所述的一种保健酒，其特征在于原料中还有O. l-l份壳聚糖和l-3 份蜂蜜。
3. 根据权利要求1或2所述的一种保健酒，其特征在于原料中还有三七醇提液1-5 份、红花醇提液0. 1-1份、甘草水提液1-5份、川牛膝水提液1-5份、剌五加水提液1-5份。
4. 一种保健酒的制备方法，其特征在于步骤如下A、 蛇毒预处理、静置，使蛇毒液神经毒素失活，然后进行抗失活防变性处理，保持降纤 酶的活性；B、 超滤，制备蛇毒降纤酶混合液；C、 蚯蚓预处理，制备蚯蚓纤溶酶混合液；D、 混合在配料罐中加入蛇毒降纤酶混合液，搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液，混合均匀，在4-l(TC条件下静置10-25min，然后加入白酒，灌装置于冰柜中或冷藏库中 4-l(TC贮存，即得保健酒成品。
5. 根据权利要求4所述的一种保健酒的制备方法，其特征在于A步骤的蛇毒预处理 是取蛇毒液置于玻璃杯中或不锈钢桶中，在20-3(TC环境下静置20-35min，使其神经毒素 失活；抗失活防变性处理是将上述静置的蛇毒液在搅拌下使其溶于0. 005mol/l pH = 8 内含O. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液中，静置10-20min，使其粗毒中所含金属蛋白酶失活， 保持降纤酶的活性，防止变性；所述磷酸盐缓冲液体积是蛇毒液体积的1-5倍；0. lmol/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的1-5%。
6. 根据权利要求4所述的一种保健酒的制备方法，其特征在于B步骤具体过程是将 上述金属蛋白酶失活的蛇毒溶液装入超滤机中，用含1X10—4mol/l EDTA的与步骤B中相同 的磷酸盐缓冲液超滤，充分超滤平衡得超滤液；所述磷酸盐缓冲液体积为蛇毒溶液的5-10 倍；1 X 10—4mol/l EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的1_5% 。
7. 根据权利要求4或6所述的一种保健酒的制备方法，超滤液中加入蜂蜜、壳聚糖的混 合液，所述蜂蜜体积为超滤物的1_5%，壳聚糖体积为超滤物的0. 1-0. 5%。
8. 根据权利要求4所述一种保健酒的制备方法，其特征在于C步骤中蚯蚓预处理是 取人工养殖蚯蚓为原料，经水洗去杂放入水中浸泡0. 5h-2h，轻轻搅动，尽量排出内脏污物， 洗净；制备蚯蚓纤溶酶混合液的过程是捣碎将洗净的蚯蚓在水中经臭氧消毒后洗净，加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐水，在 组织捣碎机中匀浆；所述蚯蚓与生理盐水的质量体积比为1 : i-i : 2;0. 1%苯甲酸体积 为生理盐水体积的卜5% ;提取将蚯蚓匀浆后置于不锈钢桶中，加入等体积的0. lmol/1氯化钠溶液，在2-10°C 条件下搅拌提取3-10h，然后以6000r/min离心10_30min，收集上清液，即得蚯蚓纤溶酶粗<formula>formula see original document page 2</formula>回收向上一步的离心沉淀物中依次加入内含O. 1%苯甲酸的生理盐水，胰凝乳蛋白酶以及O. 05mol/l pH二8内含0. lmol/1 EDTA的磷酸盐缓冲液，在32-40。C孵育48_72h，最后将酶解液用4层纱布过滤，合并滤液，以3000r/min离心10-25min，收集沉淀酶解上清液；所述离心沉淀物与生理盐水的质量体积比为1 : 1-1 : 2 ;0. 1%苯甲酸体积为生理盐水体积的O. 5-4% ;胰凝乳蛋白酶质量为离心沉淀物质量的1-5% ;离心沉淀物与磷酸盐缓冲液的质量体积比为l : 1.5-1 : 3. 5;0. lmo1/1 EDTA体积为磷酸盐缓冲液体积的1-5% ;混合将蚯蚓纤溶酶粗品与沉淀酶解上清液混合即得蚯蚓纤溶酶混合液。
9. 根据权利要求4或7所述所述一种保健酒的制备方法，其特征在于所述D步骤是在配料罐中按配方先加入蜂蜜、壳聚糖，再加入蛇毒降纤酶混合液，搅拌均匀后，再缓慢加入蚯蚓纤溶酶混合液，混合均匀，在4-l(TC条件下静置10-25min，然后加入白酒，灌装置于冰柜中或冷藏库中4-l(TC贮存。
10. 根据权利要求9所述所述一种保健酒的制备方法，其特征在于所述加入白酒时，或加入白酒的前后加入三七醇提液、红花醇提液、甘草水提液、川牛膝水提液以及剌五加水提液，边加边搅拌，用5%柠檬酸调pH 5-6. 5，甜味剂调味。
全文摘要
本发明公开了一种保健酒及其制备方法，其原料为蛇毒降纤酶混合液、蚯蚓纤溶酶混合液和白酒，另外还可以加入三七、红花、甘草、川牛膝、刺五加等中药。本发明提供的保健酒双酶并用可减轻毒性，提高防治心血管疾病的功效，有很好的抗栓效果，配合中药活血化瘀，解毒止血且生产成本较低，制法简便，易于推广。
文档编号C12G3/04GK101732700SQ20091026349
公开日2010年6月16日 申请日期2009年12月18日 优先权日2009年12月18日
发明者何忠泽, 刘天银, 张友平, 马瑞卿 申请人:刘天银