专利名称：一种磷脂酶水解制备甘油磷酸胆碱(gpc)的方法
技术领域：
一种磷脂酶水解制备甘油磷酸胆碱(GPC)的方法，涉及到食品化学、精细化学、有 机化学和药物化学领域。
背景技术：
L-α -甘油磷脂胆碱(L-α -Glycerophosphorylcholine, L-α -GPC)为体内天然 存在的水溶性磷脂代谢产物，它的原子结构示意图如下所示。它能穿过血脑屏障，是乙酰胆 碱和磷脂酰胆碱合成的胆碱源，是一种重要的的神经递质和磷脂前体。
权利要求
1.一种磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征在于，包括如下工 艺步骤(1)磷脂酶水解卵磷脂反应磷脂中加入去离子水，固液比1 1 1 30g/ml，0 75°C水浴，均质后加入金属盐MxNy、磷脂酶，反应0 36h，得到GPC溶液，过滤，得到清夜。(2)L- α -GPC混合物脱色浓缩酶解液，加入脱色剂，固液比1 5 1 100g/mL，0 900C，搅拌0 他，过滤，得到无色澄清溶液。(3)L-α-GPC纯化脱色后GPC水溶液，在0 70°C，减压旋蒸，除去水，重新溶于甲醇 中，由水相变醇相，调PH = 10，流速0 lOmL/min，阳离子树脂吸附解析，再过阴离子树脂， 得到L-α -GPC的水溶液，在O 70°C，减压旋蒸，最终得到无色透明的L_a -GPC。
2.低温结晶法制备高纯卵磷脂(PC)的方法，其特征在于，包括如下工艺步骤(1)醇溶磷脂的制备把粉末磷脂中加入低碳链醇中(醇含量70% 100%)，固液比 为1 1 1 50(g/mL)，0 70°C水浴、搅拌O 5h，分离得到磷脂的醇溶液，不溶物用 相同醇溶液萃取1 10次，将所得到醇溶液合并，减压浓缩、干燥得到PC含量为40 65% 左右的醇溶磷脂，低碳链醇回收。(2)低温结晶法制备高纯PC利用步骤(1)中的醇溶磷脂为原料，将其加入到低碳链醇 中(纯度0% 100% )，固液比1 1 1 50&/11^)，在-30 01、静置0 311，分离 得到磷脂的醇溶液，不溶物在相同条件下重复低温结晶萃取1 10次，将所得到的溶液合 并，在0 55°C、减压浓缩得到金黄色磷脂，其中PC含量为65% 85%，低碳链醇回收。
3.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所用原料为粉末磷脂、醇溶磷脂、高纯PC。
4.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述的磷脂酶解反应中添加的磷脂酶为磷脂酶A1、磷脂酶A2。
5.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述的磷脂酶解反应中添加的金属盐离子M为Mg、Ca、Ba、Fe、Mn、Cr、Cu、Zn、Co、Pd。
6.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述的磷脂酶解反应中添加的金属盐中的负离子X为F、Cl、Br、I、S。
7.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述的磷脂酶解反应中添加的金属卤化物的分子式为仏队。
8.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述的酶解液的脱色剂为活性炭、凹凸棒土等中的一种或多种。
9.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特征 在于所述酶解液的树脂纯化用的阳离子树脂为强酸性、弱酸性、大孔吸附阳离子树脂的Na 型和H型。
10.根据权利要求1所述的磷脂酶水解法制备甘油磷酸胆碱(L-a-GPC)的方法，其特 征在于所述酶解液的树脂纯化用的阴离子树脂为强碱性、弱碱性、大孔吸附性阴离子树脂 的Cl型和OH型。
11.根据权利要求2所述的醇溶磷脂的制备，其特征在于所述的醇溶磷脂提取用的低 碳链醇为甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丁醇、戊醇、己醇或戊醇和己醇的异构体。
12.根据权利要求2所述的低温结晶法制备高纯PC，其特征在于所述的低温结晶醇溶磷脂提取用的低碳链醇为甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、异丁醇、戊醇、己醇或戊醇和己醇的异 构体。
全文摘要
本发明公开了一种酶法水解制备甘油磷酸胆碱(GPC)的方法，属于脂质开发应用技术领域。包括如下步骤以粉末磷脂、醇溶磷脂、高纯PC为原料，在水相中，用磷脂酶水解磷脂酰胆碱(PC)制备甘油磷酸胆碱(GPC)；活性炭脱色，得到GPC水溶液，转化成醇相，采用阳离子树脂吸附解析和阴离子吸附的方法纯化，得到纯度比较高的GPC水溶液，低温、减压旋蒸得到无色透明的L-α-GPC溶液，化学纯度98.8％，光学纯度ee99％，mp142-143℃，H2O含量14％，pH＝5.8)。本发明为制备甘油磷酸胆碱提供了一种新的思路和方法，也增加了磷脂酶在脂质科学中的应用。
文档编号C12P13/00GK102041281SQ20101024859
公开日2011年5月4日 申请日期2010年8月9日 优先权日2010年8月9日
发明者刘元法, 周丽, 张康逸, 王兴国, 钱祥云 申请人:江南大学