与多种cc趋化因子结合的抗因子抗体的制作方法

专利名称：：与多种cc趋化因子结合的抗因子抗体的制作方法
技术领域：
：本发明涉及抗因子抗体(antikineantibody)或者与2、3、4、5种或更多种CC趋化因子(CC趋化因子也被称为“￠-趋化因子”)相结合的抗体，特别是与选自RANTES/CCL5、MIP-Ia/CCL3、MIP-I^/CCL4和MCP-1/CCL2之至少2种趋化因子相结合的那些抗体。与仅跟一种CC趋化因子结合的抗体不同，抗因子抗体通过一次结合、检测和/或中和多于一种CC趋化因子，从而在实践中解决了CC趋化因子之间功能冗余的问题。本发明的另一些方面包括抗因子抗体的诊断和治疗用途，包括治疗由CC趋化因子介导的病症、功能异常或疾病；产生抗因子抗体的杂交瘤细胞系以及通过序贯免疫产生杂交瘤的方法；使抗因子抗体人源化的方法；以及通过亲和力成熟来改善抗因子抗体的方法。相关技术描述趋化因子是炎症的关键介导物，并且参与自身免疫病的发生(Viola和Luster，Ann.Rev.Pharmacol.Toxicol.48:171-197(2008))。它们在炎症或感染部位产生，并诱导白细胞从循环迁移到组织中。长久以来一直在寻找对于由趋化因子介导之炎症或免疫过程进行调节的简单且有效的方法。大量不同的趋化因子及其受体在功能上的冗余和重叠使这些尝试变得复杂。例如，已在临床前动物模型中使用趋化因子抑制剂来治疗自身免疫性病症，但是尚未在临床上成功地用于治疗自身免疫性适应症。已提出，这种效力缺乏可能是由于趋化因子功能冗余所致。已鉴定出超过50种不同的趋化因子，每种都具有不同的结构和功能特性。一些趋化因子的特异性发生重叠，也就是说，它们与同一类型的受体结合或者作用于相似类型的细胞(Vergunst等人,ArthritisRheum.58:1931-1939(2008))。特定的趋化因子可以与多于一种趋化因子受体类型结合，给定的趋化因子受体可以与多于一种趋化因子类型结合。因此，非常期望开发出能够结合趋化因子、阻断趋化因子与受体结合或者中和多于一种趋化因子之活性的单一试剂。趋化因子(由趋化性细胞因子而得名)是小的分泌型多肽，其调节免疫细胞向组织中的移动(Baggiolini等人,Adv.Tmmuno1.55:97-179(1994);0ppenheim等人,Ann.Rev.Immunol.9:617-648(1991))。所有趋化因子都具有由保守性半胱氨酸残基之间的二硫键稳定的希腊钥匙(Greekkey)结构。然而，基于这些保守性半胱氨酸残基的数目和位置，趋化因子进一步分成4个不同的家族。a-和￠-趋化因子各自包含4个保守性半胱氨酸残基。a-趋化因子的前两个半胱氨酸被单个氨基酸分隔开，因而形成特征性的CXC氨基酸基序。￠-趋化因子的前两个保守性半胱氨酸是相邻的。因此，￠-趋化因子也被称为CC趋化因子。与之不同地，淋巴细胞趋化因子(Iymphotactin)是第三类XC趋化因子的唯一成员，其仅含有第二和第四个保守性半胱氨酸残基。第四类趋化因子(唯一成员是fractalkine)是CXXXC(或CX3C)类型，其中由3个氨基酸将前两个保守性半胱氨酸分隔开。在人类中，a-趋化因子主要由第4号染色体上的基因簇编码，￠-趋化因子主要由第17号染色体上的基因编码。淋巴细胞趋化因子编码于第I号染色体上，fractalkine编码于第16号染色体上。趋化因子形成梯度，其用作免疫细胞以及其它细胞(例如单核细胞、巨噬细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞和成纤维细胞)的化学引诱物和潜在增殖信号。CC趋化因子通过形成由趋化性细胞所识别的浓度梯度而表现出化学引诱物性质；CC趋化因子还是特定细胞类型包括成纤维细胞和免疫细胞(例如单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)的增殖信号。趋化因子(包括CC趋化因子)的靶受体和革巴细胞由Viola等人,Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.48171-197(2008)描述(参见图I)，该文献中关于CC趋化因子的化学引诱物和信号传导功能的教导通过引用并入本文。趋化因子共有与特定趋化因子功能(例如与趋化因子受体结合)相关的结构性征。共同的结构包括位于第一个半胱氨酸残基之前的延长的N末端区段(N末端结构域)，N环，31(|螺旋，P链(M、@2和33)，30’s、40’s、50s环；二硫键位置以及C-末端a-螺旋区段。这些以及其它CC趋化因子结构(包括不同CC趋化因子之间的保守性或同源性氨基酸残基，以及CC趋化因子中的溶剂可及的(solvent-accessible)、部分溶剂可及的和掩蔽的氨基酸)通过引用Fernandez等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.42:469-99(2002)(参见图I和2)而并入。完整、未变性的趋化因子中的掩蔽氨基酸残基不太可能形成趋化因子与抗体接触的表位或抗原决定簇。相比之下，暴露于溶剂或表面的CC趋化因子残基更易于与抗体结合。与CCL3/MIP-1a的趋化因子受体结合相关的CC趋化因子残基包括SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY),残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)和残基57-67(EffVQKYVSDLE)；与CCL4/MIP-1P的趋化因子受体结合相关的残基包括SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)；与CCL5/RANTES的结合相关的残基包括SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)；与CCL23/MPIF-1的结合相关的残基包括SEQIDNO:81的残基9-13(CCISY)、残基15-22(PRSIPCSL)、残基32-33(EC)或残基55-65(KQVQVCMRMLK)；以及与CCL15/HCC-2相关的残基包括SEQIDNO79的残基8-12(CCTSY)、残基14-21(SQSIPCSL)、残基31-32(EC)或残基54-64(PGVQDCMKKLK)。其它CC趋化因子的相应氨基酸残基由例如Fernandez等人,2002(同上)的图I所示。CC趋化因子的保守性结构域公开于http://www.ncbi.nlm.nih.rov/0该结构数据通过引用在2010年8月24日最后一次登录时上述网站上的蛋白质和保守性结构域数据库信息而并入。CC趋化因子类型中的趋化因子与称作“CC趋化因子受体”或“CCR”的七次跨膜G蛋白偶联受体相互作用(Rossi和Zlotnik,Ann.Rev.Immunol.18:217-242(2002))。趋化因子与其受体的相互作用调节粘附分子的活化，并且影响免疫细胞从循环渗出和溢出进入组织中。已显示，趋化因子参与多种炎性和免疫学病症、功能异常和疾病的发生和维持。这些包括类风湿性关节炎、多发性硬化症、动脉粥样硬化症、银屑病、炎性肠病(包括克罗恩病(Crohn’sdisease)、溃疡性结肠炎、乳糜泻)、血管再狭窄、狼疮肾炎、肾小球肾炎、移植排异、硬皮症、纤维化疾病、哮喘(和其它肺部炎性病症)。例如，在患有类风湿性关节炎、多发性硬化症(multiplesclerosis,MS)、动脉粥样硬化症等的患者的受影响组织中,CC趋化因子的水平升高。这些疾病的临床前动物模型显示，抑制个体趋化因子可以至少部分地改善疾病症状。例如，Kasama等人，J.Clin.Invest.95:2868-2876(1995)表明，在类风湿性关节炎的啮齿类动物模型中，施用抑制MIP-Ia/CCL3的抗体能够使关节炎的临床评分降低约50%。类似地，Ogata等人，J.Pathol.182:106-114(1997)显示，抗MCP-1/CCL2抗体能够使关节肿胀减少约30%。MIP-Ia/CCL3的受体(包括CCRl和CCR5)和MCP-1/CCL2的受体(CCR2)在白细胞中以重叠模式表达，因此针对MIP-Ia/CCL3和MCP-1/CCL2两者的抑制剂有可能比针对单独每种趋化因子的个体抑制剂更加有效。Viola等人,Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.48:171-197(2008)公开了与此类CC趋化因子相关或由其介导之特定疾病和病症的种类或类型，其通过引用并入本文。趋化因子活性的天然抑制剂是已知的，并且已开发了特异性药剂(例如与特定趋化因子结合或干扰其活性的抗体或小分子抑制剂)，参见Fernandez等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.42:469-99(2002)，这些抑制剂和药剂通过引用上述文献(参见例如第482-488页)而并入。牛痘和相关痘病毒产生称为“vCCI”(SEQIDN0:117)的可溶性35kD蛋白，其结合并抑制CC型趋化因子中的多种趋化因子。CC型趋化因子一般作用于白细胞，包括T细胞和单核细胞(Smith等人，Virology236:316-327(1997);Burns等人，J.Biol.Chem.277:2785-2789(2002))。已显示，在慢性炎性疾病的几种模型(包括实验性自身免疫性脑炎(Jones等人，Cytokine43:220-228(2008))和哮喘(Dabbagh等人，J.Immunol.165=3418-3422(2000)))中，重组vCCI可以有效地减少白细胞浸润。然而，使用对于对象免疫系统来说是外来性的天然物质(例如病毒蛋白，如vCCI)产生了安全问题。施用诸如vCCI的物质可引起不期望的生理或免疫应答，并且这些物质可作为外来物被宿主的清除或防御机制中和、去除或破坏。基于这一考虑，本发明人关注于开发生产如下抗体(尤其是人源化抗体)的方法，所述抗体能够特异性地结合以及中和多于一种趋化因子，但不会引起与例如vCCI分子相关的风险。现有技术中的趋化因子抑制剂(例如与单一CC趋化因子结合的抗体)受制于CC趋化因子受体的冗余问题。例如，CCL3/MIP-la和CCL5/RANTES均与趋化因子受体I(CCRl)和5(CCR5)结合(参见Viola，2008(同上)的图I)。仅仅抑制与这些趋化因子受体结合之CCL3的抗体不能阻止由其它CC趋化因子(例如CCL5)之结合引起的受体活化。本发明人最初将构成趋化因子受体CCRl和CCR5之主要配体的CC趋化因子MIP-Ia/CCL3、MIP-I^/CCL4和RANTES/CCL5作为目标。还将作为CCR2之配体的CCL2/MCP-I作为目标。如Viola等人,2008(同上)的图I所示,这些受体广泛表达于单核细胞和T细胞上，以及表达于其它白细胞亚群上。已显示它们参与临床前动物疾病模型和人类疾病中的多种炎性疾病状态。发明简述本发明的一个方面是可与至少2、3、4、5、6或7种或者更多种不同的CC趋化因子结合的分离的抗因子抗体或其抗原结合片段。抗因子抗体的一个实例是可与2种或更多种CC趋化因子(包括与趋化因子受体CCRl、CCR2、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9或CCRlO相互作用的至少一种CC趋化因子)结合的抗因子抗体。在另一个实施方案中，抗因子抗体将与和CCR1、CCR2和CCR5相互作用之CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP_1^、CCL5/RANTE和CCL2/MCP-1中的至少2种或3种相结合。抗因子抗体或抗因子抗体之抗原结合片段的另一些实例包括与选自CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-UCCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1的至少3种不同CC趋化因子相结合的那些。通过抗因子抗体与CC趋化因子之至少一个决定簇相接触而发生结合。例如，结合可发生在抗体与CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC或CCL23/MPIF-1的决定簇之间，所述决定簇位于CC趋化因子的CC残基与CC趋化因子的最后一个C残基之间。CC趋化因子中相邻CC(半胱氨酸-半胱氨酸)和最后一个半胱氨酸残基的位置是本领域公知的，其可在序列表中所示的CC趋化因子序列中容易地识别。抗因子抗体及其抗原结合片段还可以与CC趋化因子(包括CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-Ia、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1)的至少一个决定簇结合，所述决定簇位于所述CC趋化因子的N环、30’s环或40’s环中。抗因子抗体还可以表征为其能够与一些CC趋化因子(而非另一些)相结合。例如，抗因子抗体可以与CCL3/MIP-1a和CCL4/MIP-1P结合，但不与CCL5/RANTES、CCL2/MCP-UCCL8/MCP-2或CCL7/MCP-3结合。另一些则不与附图中列举之趋化因子和其它生物学活性分子(包括MIP-Ia、MIP-IP、RANTES、MPIF-I、HCC-I、HCC-2、HCC-4、Parc、MCP-2、MCP-3、MCP-4、Eotaxin、MDC、ELC、1-309、IL-8、SDF或Fractalkine)中的一些或全部相结合，以及与其它趋化因子相结合。例如，本文中示例了不与MCP-l、MCP-2或MCP-3中至少一种结合的抗因子抗体。抗因子抗体还可表征为其能够与一个物种的2种或更多种CC趋化因子结合，但不与另一物种的相应CC趋化因子结合。例如，抗因子抗体可以与人CCL3结合，但基本上不与鼠CCL3结合。抗因子抗体之结合特异性的具体实例示于图8-12中。一些抗因子抗体和其抗原结合片段还能够抑制CC趋化因子与相应受体的相互作用。这样的抑制可具有功能性作用，例如抑制趋化性或由趋化因子与受体结合所活化的其它作用。抗因子抗体可以与CC趋化因子中CC受体结合残基内的至少一个决定簇结合。现有技术中记载了CC趋化因子中被认为或已知与CC趋化因子受体结合相关的受体结合氨基酸残基和区段。一般认为N末端、N环、30s环以及与二硫键相邻的和a螺旋中的残基参与CC趋化因子家族的受体结合。对与趋化因子之多种功能相关的其特定结构特征的描述通过引用如下两篇出版物而并入Baysal等人，Proteins43(2):150-60(2001)以及Kuloglu等人,Biochemistry,40(42):12486-96(2001)。参见NCBI“保守性结构域数据库(ConservedDomainDatabase,CDD)”29111中指出的CC趋化因子的功能性结构域。本发明人生产并鉴定了特异性抗因子单克隆抗体3C12F、7D1G、7D12A、18V4F和18P7E。利用本领域已知的竞争性抑制测定，可使用这些抗因子抗体对另一些抗体或物质进行鉴定，所述另一些抗体或物质竞争性阻断这些抗因子单克隆抗体与其所识别的一种或更多种CC趋化因子的结合。本发明还包括抑制抗因子抗体结合的竞争性抑制剂(例如抗体)，以及利用抗因子单克隆抗体3C12F、7D1G、7D12A、18V4F和18P7E对这些竞争性抑制剂进行检测的方法。抗因子抗体可以是人抗体、人源化抗体、嵌合的人-鼠抗体、鼠或其它脊椎动物、鸟类或哺乳动物的抗体，或者其抗原结合片段。本发明一种类型的抗因子抗体具有与单克隆抗体3C12F相同或相似的结合特异性，并且可以与选自CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL15/HCC-2和CCL23/MPIF-I的至少2、3、4或5种CC趋化因子相结合。它们可以表现出不与其它趋化因子结合或基本上不与其它趋化因子结合，所述其它趋化因子包括图8中所示的其它趋化因子(例如HCC-1、PARC或者MCP1、2或3)。这种类型的抗体可以与对与趋化因子受体结合来说重要的结构域相结合，所述结构域包括CC趋化因子的N环、30s环或40’s环中的决定簇；CCL3/MIP-1a的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；CCL4/MIP-1^的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KWVREHNSLE)内；CCL23/MPIF-1的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO81的残基9-13(CCISY)、残基15-22(PRSIPCSL)、残基32-33(EC)或残基55-65(KQVQVCMRMLK)内；或CCL15/HCC-2的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO79的残基8-12(CCTSY)、残基14-21(SQSIPCSL)、残基31-32(EC)或残基54-64(PGVQDCMKKLK)内。该类型的抗体可以包含MAb3C12F的至少一个互补决定区(⑶R)，其选自SEQIDNO:3、4、5、8、9或10或SEQIDNO:53、54、55、58、59或60，或者可以包含竞争性抑制或阻断MAb3C12F与其所结合之CC趋化因子结合或者阻断RANTES与vCCI结合之抗体的至少一个⑶R(参见图2)。该类型的抗因子抗体可以含有MAb3C12F的1、2、3、4、5或6个⑶R，或者SEQIDNO:3、4、5、8、9和/或10或SEQIDNO:53、54、55、58、59和/或60中的1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基已缺失、插入或替换的⑶R。因此，⑶R序列可以与由杂交瘤细胞系3C12F或由其继代培养物所产生抗体的CDR序列相同；可以与3C12F之抗因子抗体类似物的CDR序列相对应，或者与竞争性阻断或抑制MAb3C12F与其所结合之两种或更多种CC趋化因子结合的抗因子单克隆抗体的CDR序列相对应。这种抗体可以采用如下形式人抗体，人源化抗体，嵌合的人-鼠抗体，鼠、鸟类或其它脊椎动物的抗体；或其抗原结合片段。第二类型的抗体具有与7D1G相似或相同的结合特异性，并与选自CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL23/MPIF-1和CCL18/PARC的至少2、3、4、5或6种CC趋化因子结合。该类型的抗体可以表现出不与其它趋化因子结合或基本上不与其它趋化因子结合，所述其它趋化因子例如图10所示的其它趋化因子(例如HCC-2、Eotaxin或MCP1、2、3或4)。该第二类型的抗体可以与趋化因子或CC趋化因子的结构决定簇结合，包括与MAb7D1G结合之至少一种CC趋化因子的N环或40’s环中的决定簇；CCL3/MIP-1a的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；CCL4/MIP-1^的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KWVREHNSLE)内；CCL23/MPIF-1的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO81的残基9-13(CCISY)、残基15-22(PRSIPCSL)、残基32-33(EC)或残基55-65(KQVQVCMRMLK)内；或CCL14/HCC-1的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO78的残基8-12(CCFTY)、残基14-21(TYKIPRQR)、残基31-32(QC)或残基54-64(KWVQDHKDMK)内；或CCL18/PARC的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO82的残基10-14(CCLVY)、残基16-23(SffQIPQKF)、残基33-34(QC)或残基56-66(KffVQKYISDLK)内。从结构上讲，这些抗体可以包含MAb7D1G的一个或更多个⑶R，其选自SEQIDNO:23、24、25、28、29或30，或者来自竞争性抑制或阻断MAb7D1G与其所结合之CC趋化因子结合的抗体的⑶R。该类型的一种抗因子抗体将含有MAb7D1G的1、2、3、4、5或6个⑶R，或者SEQIDNO:23、24、25、28、29和/或30中1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基已缺失、插入或替换的CDR。因此，CDR序列可以与由杂交瘤细胞系7D1G或由其继代培养物所产生抗体的CDR序列相同；可以与7D1G之抗因子抗体类似物的CDR序列相对应，或者与竞争性阻断或抑制MAb7D1G与其所结合之两种或更多种CC趋化因子结合的抗因子单克隆抗体的CDR序列相对应。这种抗体可以采用如下形式人抗体，人源化抗体，嵌合的人-鼠抗体，鼠、鸟类或其它脊椎动物的抗体；或其抗原结合片段。第三类型的抗因子抗体具有与7D12A相似或相同的结合特异性，并与选自CCL3/MIP-Ia、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES和CCL23/MPIF-1的至少2、3或4种CC趋化因子结合。这些可以表现出不与其它趋化因子结合或基本上不与其它趋化因子结合，所述其它趋化因子包括图9所示的其它趋化因子(例如CCL2/MCP-1)。这种抗体产品可以与至少一种所述CC趋化因子的N环或40’s环中的决定簇结合；其可以与如下抗原决定簇结合CCL3/MIP-1a的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；CCL4/MIP-1^的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内；或CCL23/MPIF-1的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO81的残基9-13(CCISY)、残基15-22(PRSIPCSL)、残基32-33(EC)或残基55-65(KQVQVCMRMLK)内。从结构上讲，这些第三类型的抗体可以包含MAb7D12A的至少一个⑶R，其选自SEQIDNO:13、14、15、18、19或20，或者竞争性抑制MAb7D12A与其所结合之CC趋化因子结合的抗体的至少一个⑶R。该类型的抗因子抗体可含有MAb7D12A的1、2、3、4、5或6个CDR，或SEQIDNO:13、14、15、18、19和/或20中的1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基已缺失、插入或替换的CDR。因此，CDR序列可以与由杂交瘤细胞系7D12A或由其继代培养物所产生抗体的CDR序列相同；可以与7D12A之抗因子抗体类似物的CDR序列相对应，或者与竞争性阻断或抑制MAb7D12A与其所结合之两种或更多种CC趋化因子结合的抗因子单克隆抗体的CDR序列相对应。这种抗体可以采用如下形式人抗体，人源化抗体，嵌合的人-鼠抗体，鼠、鸟类或其它脊椎动物的抗体；或其抗原结合片段。第四类型的抗因子抗体具有与18V4F相似或相同的结合特异性，并与选自CCL3/MIP-Ia、CCL4/MIP-1^和CCL5/RANTES的至少2种或3种CC趋化因子结合。这些可以表现出不与其它趋化因子结合或基本上不与其它趋化因子结合，所述其它趋化因子包括图11所示的其它趋化因子(例如CCL2/MCP-1)。这种抗体产品可以与至少一种所述CC趋化因子的N环或40’s环中的决定簇结合；可以与如下决定簇结合CCL3/MIP-1a的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；CCL4/MIP-1P的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。从结构上讲，该第四类型的抗体可以包含MAb18V4F的至少一个⑶R，其选自SEQIDNO:33、34、35、38、39或40或SEQIDNO:63、64、65、68、69或70，或者竞争性抑制MAb18V4F与其所结合之CC趋化因子结合的抗体的至少一个CDR。该类型的抗因子抗体可含有MAbl8V4F的1、2、3、4、5或6个CDR，或SEQIDNO:33、34、35、38、39和/或40或者SEQIDNO=63,64,65,68,69和/或70中1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基已缺失、插入或被其它氨基酸残基替换的CDR。因此，CDR序列可以与由杂交瘤细胞系18V4F或由其继代培养物所产生抗体的CDR序列相同；可以与18V4F之抗因子抗体类似物的CDR序列相对应，或者与竞争性阻断或抑制MAb18V4F与其所结合之两种或更多种CC趋化因子结合的抗因子单克隆抗体的CDR序列相对应。这种抗体可以采用如下形式人抗体，人源化抗体，嵌合的人-鼠抗体，鼠、鸟类或其它脊椎动物的抗体；或其抗原结合片段。第五类型的抗因子抗体具有与18P7E相似或相同的结合特异性，并与选自CCL3/MIP-Ia、CCL4/MIP-1^和CCL5/RANTES的至少2种或3种CC趋化因子结合。这些可以表现出不与其它趋化因子结合或基本上不与其它趋化因子结合，所述其它趋化因子包括图12所示的其它趋化因子(例如CCL2/MCP-1)。这种抗体产品可以与上述3种CC趋化因子中至少一种的N环或40’s环中的决定簇相结合。这种抗体产品可以与至少一种所述CC趋化因子的N环或40’s环中的决定簇结合；可以与如下决定簇结合CCL3/MIP-1a的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EffVQKYVSDLE)内；CCL4/MIP-1^的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇，其位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。从结构上讲，该第五类型的抗体可以包含MAb18P7E的至少一个⑶R，其选自SEQIDN0:43、44、45、48、49或50，或者竞争性抑制MAb18P7E与其所结合之CC趋化因子结合的抗体的至少一个⑶R。该类型的抗因子抗体可含有MAb18P7E的1、2、3、4、5或6个⑶R，或SEQIDN0:43、44、45、48、49和/或50中1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基已缺失、插入或被其它氨基酸残基替换的CDR。因此，CDR序列可以与由杂交瘤细胞系18P7E或由其继代培养物所产生抗体的CDR序列相同；可以与18P7E之抗因子抗体类似物的CDR序列相对应，或者与竞争性阻断或抑制MAb18P7E与其所结合之两种、三种或更多种CC趋化因子结合的抗因子单克隆抗体的CDR序列相对应。这种抗体可以采用如下形式人抗体，人源化抗体，嵌合的人-鼠抗体，鼠、鸟类或其它脊椎动物的抗体；或其抗原结合片段。轻链和重链可变结构域序列(包括3C12F、7D1G、7D12A、18V4F、18P7E及其类似物或其它抗因子抗体的每个CDR的那些序列)可以用作抗体模拟物药物设计中的核心结构，可以用作干扰CC趋化因子-受体结合的竞争性抑制剂，可以用作分离或鉴定趋化因子的配体或针对CC趋化因子抗体的抗独特型(anti-idiotypic)抗体,或者可以用作免疫原以诱导针对CC趋化因子抗体的抗独特型抗体。这种肽包括经修饰或稳定化的肽或者构象限制性肽，例如包含抗因子抗体之CDR的圆形或环形肽。利用抗体CDR进行肽设计的方法是本领域已知的，其通过引用Takahashi等人，Chem.Eur.J.6(17):3196-3203或者Feng等人，Cell.Host.Microb.98(2):311-316而并入。这些CDR包括SEQIDNO:3-5、8_10、13-15、18-20、23-25、28-30、33-35、38-40、43-45、48-50、53-55、58-60、63-65和68-70的那些以及通过亲和力成熟产生的这些肽序列的类似物。可以使用不同CDR的组合以调节或抑制CC趋化因子的结合或活性，抑制趋化因子二聚化或多聚化，或诱导有用的生理或免疫应答，所述不同CDR的组合可作为包含不同CDR的单独肽的组合，或者可作为两个或更多个CDR肽序列的缀合物、杂合物或融合物以形成单个肽产物。本发明的抗因子抗体可以制备成组合物，其包含抗因子抗体或其抗原结合片段以及如下更详细描述的载体、赋形剂或缓冲剂。制备产生抗因子抗体之杂交瘤细胞系的方法包括用特定的CC趋化因子对哺乳动物(例如小鼠)进行序贯免疫，随后用一种或更多种不同的CC趋化因子加强免疫，接着从所述哺乳动物得到杂交瘤细胞系(例如通过使其脾细胞与骨髓瘤或永生化B细胞系融合来实现)，以及将产生与两种或更多种趋化因子或CC趋化因子相结合之抗因子抗体的杂交瘤细胞系分离出来。治疗由一种或更多种CC趋化因子介导的疾病、功能异常或病症(特别是由被抗因子抗体识别的至少两种或三种CC趋化因子介导的那些)的方法包括对有此需要的对象施用抗因子抗体或其抗原结合片段。这些疾病、功能异常或病症可以表征为炎症或自身免疫。通过以下的附图和对实施方案的详细描述，本发明的其它方面将是显而易见的。附图简述图I示意利用ELISA得到的经纯化之3C12F与趋化因子的结合。图2显示3C12F阻断vCCI与RANTES/CCL5的结合。图3显示趋化性测定中经纯化之3C12F的抑制活性的浓度分析。图4显示趋化性测定中经纯化之7D12A的抑制活性的浓度分析。图5显示趋化性测定中经纯化之7D1G的抑制活性的浓度分析。图6显示趋化性测定中经纯化之18V4F的抑制活性的浓度分析。图7显示趋化性测定中经纯化之18P7E的抑制活性的浓度分析。图8示意利用MSD平台得到的3C12F的趋化因子结合特异性。图9示意利用MSD平台得到的7D12A的趋化因子结合特异性。图10示意利用MSD平台得到的7D1G的趋化因子结合特异性。图11示意利用MSD平台得到的18V4F的趋化因子结合特异性。图12示意利用MSD平台得到的18P7E的趋化因子结合特异性。图13a、b、c和d显示被5种抗因子抗体识别之趋化因子序列的比对。发明详述术语“抗体”广义地理解为描述单个单克隆抗体、具有多表位特异性的抗体组合物以及抗体片段(例如Fab、F(ab')2、scFv和Fv)，只要其表现出期望的生物学活性(例如能够与特定抗原、表位或抗原决定簇结合)即可。该术语包括完整的抗体、全长或未截短的抗体，以及抗体片段和抗体衍生物、变体和类似物。抗体(包括下述抗因子抗体)可具有不同的同种型——例如IgA、IgD、IgE、IgG、IgM和IgY，以及多种同种型亚型——例如人IgG亚型1、2、3和4或者IgA亚型I和2。多价抗体可以用其对多价抗原的亲和力来表征。亲和力使得与具有重复性相同表位的抗原的结合增强，一些趋化因子表征为二聚或四聚结构。个体抗体分子具有越多的抗原结合位点，则其与抗原的亲和力越高。抗体可以获得自或来源于不同的脊椎动物(包括哺乳动物和鸟类的抗体)。本文使用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同源的抗体群中获得的抗体，S卩，除了可能以微量存在的可能之天然突变以外，所述群中包含的各抗体是相同的。单克隆抗体是高度特异性的，其针对单个抗原位点。此外，与通常包括针对不同决定簇(表位)之不同抗体的常规(多克隆)抗体制备物不同，每个单克隆抗体针对抗原上的单个决定簇。除了其特异性之外，单克隆抗体的优势还在于其由杂交瘤培养物合成，不会污染有其它免疫球蛋白。修饰语“单克隆”表示抗体从基本上均质的抗体群获得的特征，其不应被理解为需要通过任何特定方法来产生抗体。例如，根据本发明使用的单克隆抗体可以通过由KShler和Milstein,Nature,256:495(1975)首次描述的杂交瘤方法制备，或者可以通过重组DNA方法(参见例如Cabilly等人，美国专利No.4，816，567)制备。“嵌合抗体”是指含有来自两个不同来源之氨基酸序列的抗体，例如含有与已知结合特定表位或抗原之鼠抗体的可变区段剪接而成的保守性人抗体区段的抗体。每条重链和轻链氨基酸序列的一部分与来源于特定物种或属于特定类型的抗体中的序列相同或同源，而链的其余区段与来自另一物种的序列同源或相同。在一个实施方案中，本发明表征了一种嵌合抗体或抗原结合片段，其中轻链和重链的可变区模拟来源于一个哺乳动物物种的抗体可变区，而恒定部分与来源于另一物种的抗体中的序列同源。在本发明的一个实施方案中，通过将小鼠抗体CDR移至人抗体框架区来制备嵌合抗体。因此，本发明的单克隆抗体包括“嵌合”抗体以及这种抗体中保留与CC趋化因子结合能力的片段，所述“嵌合”抗体中重链和/或轻链的一部分与来源于特定物种或属于特定抗体类型或亚类的抗体中的相应序列相同或同源，而链的其余部分与来源于另一物种或属于另一抗体类型或亚类的抗体中的相应序列相同或同源。嵌合抗体的特性及其制备方法通过引用Cabilly等人，美国专利No.4，816，567以及Morrison等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984)而并入。“互补决定区(⑶R)”构成免疫球蛋白分子轻链或重链可变区的一部分。抗体链的这些部分构成决定抗体对于抗原上特定表位之特异性的区域的一部分，并且构成抗体分子中可与表位直接结合的部分。在构成抗体的不同CDR中，CDR3显示出最高的可变性。CDR介导抗体与其所识别之表位之间的接触。包含CDR序列或类似于CDR序列的分离肽可表现出额外的功能活性Polonelli等人，PLoSOne3e2371(2008)。“人源化抗体”是指包含含有基本上来自人抗体链(称为“接受体免疫球蛋白(或抗体)”)之可变区框架残基以及基本上来自非人抗体(例如小鼠)之至少一个互补决定区(OTR)的至少一条链的抗体。除了⑶R移植之外，通常对人源化抗体进行进一步改变，以提高亲和力和/或减少免疫原性。“人源化抗体”不完全是人的抗体，其是含有来源于非人免疫球蛋白之尽可能少的序列的嵌合抗体。人源化抗体的大部分是人免疫球蛋白(受者抗体)，其中受者的高变区残基被具有期望特异性、亲和力和能力的来自非人物种(供者抗体)(例如小鼠、大鼠、兔或非人灵长类)的高变区残基所取代。在一些情况下，人免疫球蛋白的框架区(FR)残基被相应的非人残基所取代。此外，人源化抗体可以包含在受者抗体或供者抗体中不存在的残基。进行这些修饰以进一步完善抗体性能。一般地，人源化抗体包含至少一个(通常两个)可变结构域的基本上全部，其中全部或基本上全部的高变区对应于非人免疫球蛋白的那些区域，全部或基本上全部的FR是人免疫球蛋白序列的那些序列。人源化抗体任选地还包含免疫球蛋白恒定区(Fe)的至少一部分，所述Fe通常是与两种或更多种CC趋化因子免疫特异性结合的人免疫球蛋白的Fe，其已通过引入氨基酸残基的替换、缺失或添加(即突变)而改变。在一些实施方案中，人源化抗体是衍生物。这种人源化抗体在一个或更多个非人CDR中包含氨基酸残基的替换、缺失或添加。当与非衍生的人源化抗体相比时，人源化抗体衍生物可具有基本上相同的结合、更好的结合或更差的结合。在一些特定的实施方案中，CDR的1、2、3、4或5个氨基酸残基已被替换、缺失或添加(即突变)。产生人源化抗体的方法通过引用欧洲专利No.EP239，400、EP592，106和EP519,596;国际公开No.WO91/09967和WO93/17105;美国专利No.5,225,539,5,530,101、5,565,332、5，585,089、5，766,886和6,407,213；以及Padlan,MolecularImmunology28(4/5):489-498(1991);Studnicka等人，ProteinEngineering7(6):805-814(1994)；Roguska等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA91:969-973(1994)；Tan,等人，J.Immunol.1691119-25(2002)；Caldas等人，ProteinEng.13:353-60(2000);Morea等人，Methods20267-79(2000)；Baca等人，J.Biol.Chem.272:10678-84(1997)；Roguska等人，ProteinEng.9:895-904(1996);Couto等人，CancerRes.55(23Supp):5973s_5977s(1995)；Couto等人，CancerRes.55:1717-22(1995)；Sandhu,Gene150:409-10(1994);Pedersen等人，J.Mol.Biol.235:959-73(1994)Jones等人，Nature321:522-525(1986)；Reichmann等人，Nature332:323-329(1988);和Presta,Curr.Op.Struct.Biol.2:593-596(1992)而并入。本文中的“变体”或“类似物”抗体是指由于“亲本”抗体序列中一个或更多个氨基酸残基的添加、缺失和/或替换而使得氨基酸序列不同于“亲本”抗体氨基酸序列的分子。在一个实施方案中，变体包含亲本抗体一个或更多个高变区中的一个或更多个氨基酸替换。例如，变体可以包含亲本抗体一个或更多个高变区中的至少I个(例如约I至约10个，优选约2至约5个)替换。通常，变体具有与亲本抗体重链或轻链可变结构域序列至少75%(更优选至少80%,更优选至少85%,更优选至少90%,最优选至少95%)氨基酸序列同一性的氨基酸序列。关于该序列的同一性或同源性在本文中定义为对序列进行比对并引入空位(需要时)以实现序列同一性百分比最大化之后，候选序列中与亲本抗体残基相同之氨基酸残基的百分比。N末端、C末端或内部的延长、缺失或插入抗体序列均不应被理解为影响序列的同一性或同源性。变体保留了与受体结合的能力，并且优选具有优于亲本抗体的特性。例如，变体可以具有更强的结合亲和力，增强的活化受体之能力等。为了分析这些特性，例如应当将变体的Fab形式与亲本抗体的Fab形式或者将变体的全长形式与亲本抗体的全长形式进行比较，因为在本文公开的生物活性测定中已发现抗体的形式影响其活性。本文特别感兴趣的变体抗体是当与亲本抗体相比时展示出至少约10倍、优选至少约20倍、最优选至少约50倍的生物活性增强的抗体。本文中的“亲本”抗体是由用于制备变体之氨基酸序列所编码的抗体。优选地，亲本抗体具有人框架区并具有人抗体恒定区。例如，亲本抗体可以是嵌入供者(鼠)抗体CDR的人抗体。“分离的”抗体是已经鉴定并从其天然环境组分中分离和/或回收的抗体。其天然环境的杂质组分是会干扰抗体之诊断或治疗用途的物质，其可以包括酶、激素和其它蛋白质的或非蛋白质的溶质。在一些实施方案中，抗体将被纯化(I)至高于约95(重量)％(最优选高于99(重量)％)的抗体，如Lowry法所测定地，(2)至利用旋转杯式测序仪(spinningcupsequenator)足以获得N末端或内部氨基酸序列中至少15个残基的程度，或者(3)使用考马斯蓝(或优选地，银染)在还原或非还原条件下通过SDS-PAGE至均质。分离的抗体包括重组细胞内的原位抗体，因为不存在抗体天然环境中的至少一种组分。然而，通常，分离的抗体将通过至少一个纯化步骤来制备。短语“基本上不含细胞物质”包括这样的抗体或抗体片段制备物，其中抗体或抗体片段与其所分离或重组产生之细胞的细胞组分相分离。因此，基本上不含细胞物质的抗体或抗体片段包括具有少于约30%、20%、10%或5%(干重)异源蛋白质(本文中也称为“杂质蛋白质”)的抗体或抗体片段制备物。当抗体或抗体片段为重组产生时，还优选其不含培养基，g卩，培养基占蛋白制备物体积的小于约20%、10%或5%。当抗因子抗体或其抗体片段通过化学合成产生时，优选其产生时不含化学物质前体或其它化学物质，即，其与参与蛋白质合成的化学物质前体或其它化学物质相分离。因此，除了目的抗体或抗体片段之夕卜，抗体或抗体片段的这种制备物具有少于约30%、20%、10%、5%(干重)的化学物质前体或化合物。在一个实施方案中，本发明的抗体或其片段是分离的或经纯化的。术语“抗因子抗体”是指如上文所定义的与两种或更多种趋化因子结合的抗体，优选地，抗因子抗体将与三种或更多种人CC趋化因子结合。抗因子抗体可以是单克隆或多克隆抗体，优选地，其是分离的或经纯化的单特异性或单克隆抗体。抗因子抗体可以是哺乳动物抗体，例如鼠或人的抗体，或者嵌合或人源化抗体。全人抗体可以从人或转基因动物或噬菌体展不平台获得，参见Lonberg,Curr.Opin.Tmmuno1.20(4):450_9(2008),从转基因动物获得人抗体的方法通过引用该文献而并入。抗因子抗体可以是合成的抗体、单结构域抗体(例如纳米抗体(nanobody)(VhH)或骆骑化抗体)、单链FV(scFv)、单链抗体、Fab片段、F(ab’)片段、二硫键连接的Fv、胞内抗体(intrabocy)和抗独特型(抗Id)抗体(包括针对本发明抗因子抗体(例如3C12F等)的抗独特型抗体和抗抗独特型抗体)、双特异性抗体以及与CC趋化因子的决定簇或表位结合的上述任何抗体之片段。经改造抗体的多种结构形式通过引用McCafferty等人编的AntibodyEngineeringAPracticalApproach,OxfordUniversityPress(1996)而并入。术语“抗因子抗体”包括免疫球蛋白分子和含有至少一个抗原结合位点(antigenbindingsite,ABS)的免疫球蛋白分子之免疫学活性片段。这些可以是任何同种型，包括IgA、IgD、IgE、IgG、IgM和IgY，其可以来源于产生抗体的脊椎动物(例如哺乳动物和鸟类)。优选地，抗因子抗体是人的或人源化的，尽管抗因子抗体可适于向动物(例如家养或商业化饲养的动物，或野生动物或圈养动物)施用。这些包括伴侣动物(例如狗和猫)、家畜(例如牛、马、野牛、水牛、猪、山羊、绵羊、骆驼、美洲驼等)以及家禽(例如鸡、火鸡、鹅、猎鹰等)。本领域技术人员将理解如何得到抗因子抗体以及如何使其适用于非人用途，例如通过诱导由特定类型的动物表达针对CC趋化因子的抗体和/或通过类似于人源化的抗体改造方法来实现。抗因子抗体或其片段将与特定的CC趋化因子结合，并且不与其它趋化因子或多肽非特异性结合。与CC趋化因子或CC趋化因子之片段免疫特异性结合的抗因子抗体或其片段可以与其它抗原发生交叉反应。然而，可以选择不与其它抗原发生交叉反应的、与CC趋化因子或其片段免疫特异性结合的抗因子抗体或片段。可以例如通过免疫测定或本领域技术人员已知的其它技术对与特定CC趋化因子免疫特异性结合的抗因子抗体或其片段进行鉴定。“片段”描述完整多肽分子(例如CC趋化因子或抗因子免疫球蛋白)的一部分。“片段”可以包括包含氨基酸序列(例如完整的成熟CC趋化因子或者抗体多肽轻链或重链的序列)中至少5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、75、80、90、100、120、130、150、175、200或250个连续氨基酸残基之氨基酸序列的肽或多肽。对于CC趋化因子而言，片段是分子的一部分，其短于成熟趋化因子全长，例如包含至少5个连续氨基酸残基、至少10个连续氨基酸残基、至少15个连续氨基酸残基、至少20个连续氨基酸残基、至少25个连续氨基酸残基、至少40个连续氨基酸残基、至少50个连续氨基酸残基或任何中间数值(最多但不包括成熟CC趋化因子的全部氨基酸序列)之氨基酸序列的CC趋化因子片段。对于抗因子抗体而言，片段包括包含至少5、10、15、20、25、30、35、40、45或50个连续氨基酸残基或者最多但不包括抗体Vh和/或\部分全长之氨基酸的肽或多肽，其与CC趋化因子特异性结合，并且与跟完整抗因子抗体结合的至少两种或三种CC趋化因子结合。抗因子抗体片段可以是单链片段，例如轻链或重链或者轻链或重链的一部分，还包括具有多条链的片段(例如Fab或F(ab’)2片段)。“亲和力成熟的抗体”是通过改变可变区中一个或更多个残基的类型或位置从而使其结合亲和力和/或生物学活性增加的抗体。改变的一个实例是可以发生在CDR或框架区中的突变。亲和力成熟的抗体通常具有比分离的或天然的抗体或其片段提高2至500倍的结合亲和力。亲和力成熟的抗体可具有针对受体抗原的纳摩尔或甚至皮摩尔的亲和力。亲和力成熟的抗体通过本领域已知的方法产生。Marks,J.D.等人,Bio/TechnologylO779-783(1992)(其通过引用而并入)描述了通过Vh和Vl结构域改组(shuffling)使得亲和力成熟。⑶R和/或框架残基的随机突变通过引用Barbas，C.F.等人，ProcNat.Acad.Sci,USA91:3809-3813(1994)；Schier,R.等人，Gene169:147-155(1995)；Yelton,D.E.等人，J.Tmmun01.155;1994-2004(1995)；Jackson,J.R.等人，J.Tmmuno1.154(7)3310-9(1995)以及Hawkins，R.E.等人，J.Mol.Biol.226:889-896(1992)而并入。“抗因子抗体衍生物”是指包含与至少2、3、4种或更多种CC趋化因子结合之抗因子抗体或CC趋化因子结合抗体片段的氨基酸序列的多肽，其已通过引入氨基酸残基的替换、缺失或添加而改变。本文使用的术语“衍生物”还指经共价修饰(例如糖基化、乙酰化、聚乙二醇化、磷酸化、酰胺化、利用已知的保护/封闭基团衍生化、蛋白水解切割、与细胞配体或其它蛋白连接等)的抗因子抗体或抗因子抗体片段。可以利用本领域技术人员已知的技术(包括但不限于特异性化学切割、乙酰化、甲酰化、衣霉素的代谢合成等)进行化学修饰而产生这样的抗因子抗体衍生物。抗因子抗体衍生物将保留与两种或更多种CC趋化因子特异性结合的能力。“抗因子抗体类似物”是指包含与已知抗因子抗体基本上类似的氨基酸序列并且保留已知抗因子抗体与两种或更多种CC趋化因子结合的能力的多肽。类似物还可以含有1、2、3、5或10个或更多个非常规氨基酸。可通过参考与另一蛋白质的同一性或者通过参考包括如下的编码多核苷酸序列对与抗因子抗体多肽具有相似之氨基酸序列的多肽进行描述(i)与已知抗因子抗体的至少一条重链或轻链或者至少一个⑶R的氨基酸序列具有至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%同一性的氨基酸序列的多肽；(ii)由与编码本文所述之抗因子抗体或抗因子抗体片段的核苷酸序列在严格条件下杂交的多核苷酸序列所编码的多肽，其中所述多肽包含至少5、10、15、20、25、30、35、40、50、75、90、100、125或至少150个氨基酸残基。温度和离子强度条件决定杂交的“严格度”。低严格杂交条件对应于55°C的Tm，其包括例如5XSSC、0.1%SDS,0.25%奶且无甲酰胺；或30%甲酰胺、5XSSC、0.5%SDS0中严格杂交条件对应于较高的Tm，例如40%甲酰胺、5X或6XSSC，高严格杂交条件对应于最高的1，例如50%甲酰胺、0.1XSSC，以及(iii)由与编码已知抗因子抗体或抗因子抗体片段的核苷酸序列具有至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或至少99%同一性的核苷酸序列所编码的多肽。与本文所述的抗因子抗体或抗因子抗体片段具有相似结构的多肽是指与已知的抗因子抗体或其片段具有相似的二级、三级或四级结构的多肽。可以通过本领域技术人员已知的方法(包括但不限于X-射线晶体学、核磁共振和晶体电子显微镜)确定多肽和蛋白质的结构。术语“高变区”是指抗体中负责与抗原结合的氨基酸残基。高变区包含来自重链和轻链可变结构域中“互补决定区”或“⑶R”的氨基酸残基(Kabat等人，SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,第5版，PublicHealthService,NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.(1991))和/或来自重链和轻链可变结构域中“高变环”的那些残基(Chothia和Lesk，J.Mol.Biol.196:901-917(1987))。“框架区”或“FR”残基是除了如本文所定义之高变区残基之外的那些可变结构域残基。抗体的结构特征以及用于确定或分析抗体结构的方法是本领域人员公知的，其通过引用Kabat(同上)，Chothia等人(同上);D6ret等人，Comput.Appl.Biosci.11(4):435-9(1995)；Martin,Protein25(1)130-3(1996);Abhinandan等人，Mol.Immunol.45(14):3832-9(2008)以及Abhinandan等人，J.Mol.Biol.369(3):852-62(2007)而并入。“CC-趋化因子”是指来自趋化细胞因子家族的多肽，其含有四个保守的半胱氨酸残基，其中前两个是相邻的(例如，如VanCoillie等人，Cytokine&GrowthFactorRev.10:61-86(1999)所述)。CC趋化因子也称为“P-趋化因子”。基于这些相邻的半胱氨酸-半胱氨酸(cys-cys或C-C)残基，P-趋化因子被称为“CC”趋化因子，其中“CC”代表相邻的半胱氨酸残基。CC趋化因子的实例是与CCRl和CCR5结合的那些，包括CCL3/MIP-Ia、CCL4/MIP-1P和CCL5/RANTES。CC趋化因子存在于哺乳动物和鸟类中。用于人或鼠的特定趋化因子(例如人CCL3/MIP-la)的术语可以用于标识另一物种中的相应分子(例如“鼠MIP-Ia”或“牛MIP-Ia”)，其应当理解为是指所指示物种中的类似的、结构上相似的分子。哺乳动物和鸟类物种之间的类似趋化因子可具有至少40%、50%、60%、70%、80%、90%、95%或99%或该范围内任何中间值的序列同一性，并且其将表现出相同或相似的功能性免疫活性。脊椎动物CC趋化因子(包括哺乳动物和鸟类的那些)的序列通过引用NCBI数据库而并入，具体参考该数据库中由最近更新的登记号标识的那些序列(2010年8月9日最后一次登录)以及Fernandez和Lolis,Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.42:469(2002)，其通过引用并入本文。人趋化因子CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-I、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1等的多核苷酸和多肽的具体登记号提供于表4中。每个通过引用表4中描述的货号、供应商或NCBI登记号而具体地并入。这些趋化因子从表4中所述的供应商处有售。本文使用的术语“CC趋化因子决定簇”是指CC趋化因子中与抗体的抗原结合残基接触的部分。该术语包括CC趋化因子上由抗因子抗体识别的常规线性表位以及构象表位(包括非线性表位)。CC趋化因子中被抗因子抗体结合或与其抗原结合氨基酸残基直接接触的一个或更多个部分是其决定簇。CC趋化因子抗原性决定簇的去除、取代、破坏或变性可降低或消除抗因子抗体与CC趋化因子结合的能力。确定抗体结合表位的方法是本领域公知的，如Ladner,Biotechnol.Genet.Eng.Rev.24:1-30(2007)所述(其通过引用而并入)。CC趋化因子决定簇包括参与结合趋化因子受体(例如CCRl或CCR5)的区段或结构域，例如其N环，P_1、2和3链，30’s、40’s和50’s环以及其C-末端螺旋区段，这些决定簇通过引用Fernandez和Lolis,Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.42:469(2002)；Viola等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.48171以及Pakianathan等人，Biochem.36(32):9642(1997)而并入。还通过与来自病原体之蛋白质的结合对CC趋化因子决定簇进行定义，例如与牛痘病毒的vCCI结合的CC趋化因子决定簇，这些决定簇通过引用Zhang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.103(38):13985-13990(2006)而并入。术语“结合”是指两种不同物质之间的化学或物理接触或相互作用。这包括抗因子抗体与相应决定簇(例如CC趋化因子分子上的表位)之间的缔合。这种接触或相互作用可以通过一个或更多个离子键、非离子键、氢键、范德华(vanderwaals)键、疏水键或其它已知类型的分子间键来实现。结合可以包括两个分子之间(例如配体和其相应受体之间)的直接接触，或经由间隔部分的间接接触(例如通过接头或者双价或多价部分的共价或非共价键合)。“结合亲和力”由亲和力常数Ka描述，其是抗体与抗原结合和解离的速率常数之t匕。IgG抗体通常的亲和力是10_510_9摩尔/L。通过本领域已知的许多不同的技术对抗体亲和力进行测定，包括平衡透析、表面等离子共振(BIAcore)以及动力学排斥测定(kineticexclusionassay)(KillExA)。已结合和游离抗原与抗体亲和力之间的关系表示为Scatchard方程r/c=Kn-Kr,其中r=[已结合抗原]与[总抗体]之比，c=[游离抗原]，K=亲和力，n=每个抗体分子的结合位点数(价)。如果所有抗体对抗原具有相同的亲和力(例如单克隆抗体)，r/c对r作图将得到直线，其斜率为-K，截距r接近n。如果抗体是异质的(例如多克隆抗体)，r/c对r作图将得到曲线，平均亲和力可通过当半数结合位点被占据(r=I)时的曲线斜率来确定。短语“与CC趋化因子特异性结合”描述抗体或抗体片段与特定CC趋化因子或一组CC趋化因子之间高于背景的相互作用，而不与其它趋化因子相互作用。CC趋化因子包括但不限于CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^和CCL5/RANTES，CC趋化因子区段或结构域的实例包括其趋化因子受体结合残基，其N环，0-1、2和3链，30’s、40’s和50’s环及其C-末端螺旋区段。与CC趋化因子或其结构域或区段之一特异性结合的抗体可以以较低亲和力(如通过例如免疫测定、表面等离子共振(BIAcore)或本领域已知的其它测定来确定)与其它抗原结合。例如，当在相同浓度和相同条件下进行比较时，与另一抗体或对照抗体相比抗因子抗体与特定CC趋化因子结合的能力高出4倍或更高将被认为与CC趋化因子特异性结合。然而，可以使用其它比较性结合标准，所述标准在结合量或亲和力中建立显著性差异，这些包括抗因子抗体结合量高2、3、4、5、10、20、50、100或1000倍，或者结合亲和力强2、5、10、15、20、100或至少1000倍。与2、3、4、5或更多种CC趋化因子特异性结合的抗体或片段不需要与其它非趋化因子抗原或非CC趋化因子发生交叉反应。可以通过免疫测定、BIAcore或本领域技术人员已知的其它技术对与CC趋化因子或其片段特异性结合的抗因子抗体或片段进行鉴定。抗体或其片段以高于任何交叉反应性抗原的亲和力(如利用实验技术所测定地，例如Western印迹、放射免疫测定(RIA)和酶联免疫吸附测定(ELISA))与CC趋化因子抗原或其片段特异性结合。参见，例如Paul编，FundamentalImmunology,第2版，RavenPress,NewYork(1989)第332-336页针对抗体特异性的论述。术语“抑制性浓度”是指与对照相比使CC趋化因子活性降低例如5%、10%、20%、30%、50%、80%、90%、95%、99%或多至100%之抗体(例如抗因子抗体或其CC趋化因子结合片段)的浓度。可以在体内或体外确定CC趋化因子活性，包括测定CC趋化因子活性(例如趋化性)。这些测定包括钙流量或整联蛋白活化。还可以在体内动物模型中确定抗因子抗体或其CC趋化因子结合片段以及对照抗体(例如那些不与CC趋化因子结合的抗体或与一种趋化因子结合的抗体)的调节作用，包括测定免疫现象(例如炎症和自身免疫)中CC趋化因子活化的那些。抑制趋化因子的活性是指，与抑制剂不存在时相比，在该试剂存在下导致趋化因子的至少一种活性相对减少。抑制可包括趋化因子活性的拮抗或中和，例如通过抗体与趋化因子上的活性位点结合来实现，或通过导致趋化因子的有效去除、固定或失活的结合来实现。术语“趋化性抑制”是指，与抗体或其抗原结合片段不存在时观察到的趋化活性相比，在抗体或其抗原结合片段存在下细胞的趋化活性的相对量减少。可以利用测定特定细胞类型(包括不同的白细胞类型)的趋化性抑制的公知方法，其通过引用ChemokineProtocols,Meth.inMol.Biol.138(2000),HumanaPress,Eds.AEIProudfoot,TNCWells,andCAPower而并入。“分离的”或“经纯化的”产物或组分基本上不含该产物或组分所来源之细胞或组织来源的细胞物质或其它杂质蛋白，或者当通过化学方法合成时基本上不含化学物前体或其它化学物质。分离或经纯化的组分、分子或其它物质(包括肽、多肽、抗体、趋化因子、多聚核酸或细胞)是从其通常的或天然的或固有的环境中回收或单独合成的。分离的或经纯化的产物或组分还可以物理方式或化学方式从与其缔合的混合物或成分(包括不期望的生物杂质)中回收或分离，或者，如果合成时，从与其合成相关的底物或副产物中回收或分离。纯化可扩展至任何程度，包括去除其它组分的1%、5%、10%、50%、75%、90%、95%或100%。在抗体情形中，分离可从血液或血清中回收，或者对于单克隆抗体来说，分离可从腹水或组织培养液中回收。术语“核酸”和“核苷酸序列”包括DNA分子(例如cDNA或基因组DNA)、RNA分子(例如mRNA)、DNA和RNA分子的组合或DNA/RNA杂合分子以及DNA或RNA分子的类似物。本发明的核酸序列可以编码抗因子抗体类似物或变体的部分。这样的类似物可使用例如核苷酸类似物(包括但不限于次黄嘌呤核苷或三苯甲基化的碱基)来制备。这样的类似物还可包括包含经修饰骨架的DNA或RNA分子，所述经修饰骨架赋予分子以有益性质(例如核酸酶抗性或提高的穿过细胞膜的能力)。核酸或核苷酸序列可以是单链的、双链的，其可以同时包含单链和双链部分，并且可以含有三链部分，但优选为双链DNA。“分离的”核酸分子是与核酸分子天然来源中存在的其它核酸分子相分尚的分子。“分尚的”核酸分子(例如cDNA分子)可以基本上不含其它细胞物质，或者当通过重组技术产生时基本上不含培养基，或者当通过化学合成时基本上不含化学物质前体或其它化学物质。在一个实施方案中，编码本发明之抗体或其片段的核酸分子是分离的或经纯化的。本文中使用的术语“宿主细胞”是指经核酸分子转染的特定对象细胞以及该细胞的后代细胞或潜在后代细胞。因为在连续传代或核酸分子整合进宿主细胞基因组中时可能发生突变或环境影响，所以这种细胞的后代细胞可能与经核酸分子转染的亲本细胞不一致。宿主细胞可以用于重组表达抗因子抗体或其组分之一，例如轻链或重链或其片段。为了确定两个核酸或氨基酸序列的“同一性百分比”，首先出于最佳比较的目的进行序列比对(例如，可将空位引入第一氨基酸或核酸序列中，以与第二氨基酸或核酸序列进行最佳比对)。接着对相应氨基酸位置或核苷酸位置处的氨基酸残基或核苷酸进行比较。当第一序列中的位置被第二序列中相应位置处相同的氨基酸残基或核苷酸占据时，则分子在该位置是一致的。两个序列之间的同一性百分比是序列共有之相同位置的数目的函数(即，同一性％=相同的重叠位置的数目/总位置数X100%)。在一个实施方案中，两个序列长度相同。还可以利用数学算法来确定两个序列之间的同一性百分比。用于比较两个序列的数学算法的优选、非限制性实例有Karlin和Altschul,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.87:2264-2268(1990)的算法，如Karlin和Altschul，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.90:5873-5877(1993)中所改良。将这种算法与Altschul等人，J.Mol.Biol.215403(1990)的NBLAST和XBLAST程序相联合。可以利用NBLAST核苷酸程序参数设定(例如分值=100，字长=12)进行BLAST核苷酸检索，以获得与本发明的核酸分子同源的核苷酸序列。可以利用XBLAST程序参数设定(例如分值=50，字长=3)进行BLAST蛋白质检索，以获得与本发明的蛋白质分子同源的氨基酸序列。为了比较目的获得空位比对，可以如Altschul等人，NucleicAcidsRes.25:3389-3402(1997)所述利用GappedBLAST。又或者，可以利用PSI-BLAST进行迭代检索(iteratedsearch)，其检测分子之间的远源关系(同上)。当利用BLAST、GappedBLAST和PSI-Blast程序时，可以使用各程序(例如XBLAST和NBLAST)的缺省参数。用于比较序列的数学算法的另一优选、非限制性实例是Myers和Miller,CABIOS4:11-17(1988)的算法。将这种算法与ALIGN程序(2.0版)相联合，所述ALIGH程序是GCG序列比对软件包的一部分。当利用ALIGN程序比较氨基酸序列时，可以使用PAM120权重残基表(weightresiduetable)、空位长度罚分12以及空位罚分4。可以利用与上述类似的技术确定两个序列之间的同一性百分比，其中允许或不允许具有空位。在计算同一性百分比时，通常仅计数精确配对。“保守性变化”是指在构象或抗原性方面基本上不变的变化，与亲本或本源肽或多肽相比，其产生肽或多肽变体三级结构的最小变化，或产生肽或多肽变体或类似物抗原决定簇的最小变化。在趋化因子的情形中，保守性变化包括基本上不影响所得趋化因子变体或类似物之特异性和/或亲和力(例如，如通过其表现出亲本趋化因子的至少一种功能的能力所确定地，所述功能包括例如诱导趋化现象、参与细胞因子网络或者诱导酶或细胞因子的产生，或者与亲本或天然趋化因子的受体相结合)的氨基酸替换。当应用于抗体的变体或类似物、抗体片段(包括CDR区段)时，保守性变化是指产生能够与相应未经修饰之抗体产物的相同表位或抗原结合之抗体产物的氨基酸替换。预测哪种氨基酸替换使分子在构象和抗原性方面保持不变在本领域的范畴之内，如由Berzofsky,Science229932-940(1985)以及Bowie等人，Science247:1306-1310(1990)所述。对于哪种替换最有可能在构象和抗原性方面保持不变的指导包括(a)由于疏水性残基更可能位于蛋白质内部，因此对疏水性氨基酸的替换较少可能影响抗原性，(b)用生化性质相似的氨基酸进行替换较少可能影响构象，这是因为经替换的氨基酸在结构上模拟天然氨基酸；和(C)改变进化上保守的序列可能对构象产生不利影响，因为这种保守性表明这些氨基酸序列在功能上可能具有重要性。“组合物”或“药物或治疗性组合物”是指含有抗因子抗体或其CC趋化因子结合片段或其另外之片段的载体、赋形剂或溶液的组合，其直接地或间接地治疗由CC趋化因子介导的病症、功能异常或疾病或其至少一种症状，或者降低其严重性。术语“可药用载体“包括与本发明的分子相容并且适于药物施用的任何以及所有的载体和赋形剂，例如稀释剂、溶剂、分散剂、乳化剂、脂质双分子层、脂质体、包衣、防腐剂(包括抗细菌剂或抗真菌剂)、等渗剂、PH缓冲剂以及吸收调节剂等。使用这些载体、崩解剂、赋形剂和试剂用于施用药学活性物质是本领域公知的，参见HandbookofPharmaceuticalExcipients,第3版，Am.Pharm.Assoc.(2000),其通过引用而并入。本发明的药物组合物通常制备为与预期施用途径(例如肠胃外、经口或表面施用)相容。本发明的治疗性组合物包括在可药用载体中的本发明至少一种抗体或抗体片段。“可药用载体”是常规地与活性成分、生物学产物或药物相混合并适于施用的至少一种组分。载体可以含有本领域中使用的任何药物赋形剂以及任何形式的施用载剂。组合物可以例如是注射用溶液、含水混悬液或溶液、非含水悬液或溶液、喷雾、固体和液体口服制剂、药膏、凝胶、软膏、皮内贴剂、霜剂、洗剂、片剂、胶囊、持续释放制剂等。另外的赋形剂可以包括例如着色剂、遮味剂、助溶剂、助悬剂、压缩剂、肠溶衣、持续释放助剂等。本领域技术人员可以根据例如u.S.FDACDERDataStandardsManualC-DRG-00201，Version08所述的剂型或FDA网站http://www.fda.gov/Forlndustry/DataStandards/StructuredProductLabeling/ucml62038.htm(2010年8月9日最后一次登录)上列出的剂型来选择适宜的剂型，二者通过引用并入本文。经口施用的组合物可包括固体载体或赋形剂，或者可以制备成液体或凝胶制备物，可以包括可食用的或惰性的载体，并且可以包封于胶囊中、压制成片剂或制备成锭剂。经口施用的组合物可以制备成延时释放或包封形式，从而防止在胃中降解并优化分子吸收。注射用组合物可通过本领域公知的方法制备，其可包含治疗性分子的无菌溶液或分散剂体系。这常常包括无菌稀释剂(例如水、生理盐水)或与本发明分子相容的其它缓冲剂。注射用组合物可制备成单位剂量或者制备在单位剂量容器(例如小管、安瓿瓶或注射器)中。可以使用常规的缓冲剂和等渗剂，并且可以利用公知的试剂(例如HCl或NaOH或缓冲剂)调节PH值。可以存在抗微生物剂或抑菌剂、螯合剂(例如EDTA或EGTA)和抗氧化剂以及防腐剂。本发明的治疗性组合物可以通过任何可接受的施用途径施用，包括表面、粘膜上、经口或经肠或肠胃外施用。这些途径包括但不限于表面、透粘膜、经口(包括含服、舌下)、粘膜(结膜、鼻、窦、尿道、阴道、肠、直肠)、经肠、透皮、皮内、皮下(s.C.)、肌内、腹膜内、静脉内(i.V.)、心脏内、关节或骨内、器官(脑、脊柱、眼、耳、肝、脾、肾、胆囊、膀胱)内、骨内、软骨内或关节组织内、经吸入(例如鼻内、气管内、肺内或支气管内)、口服、经颊(subuccal)。本领域技术人员可以根据U.S.FDA,CDER,DataStandardsManual“RoutesofAdministration”，CDRG-00301,004版列出的那些或根据http://www.fda.gov/Drugs/GuidanceCompIianceRegulatoryInformation/DrugRegistrationandListing/ucm084039.htm(2010年8月9日最后一次登录)(通过引用并入本文)表2中的那些对途径进行选择。“治疗有效量”是指足以治疗由CC趋化因子介导的病症、功能异常或疾病或者降低其严重性、增强所述病症、功能异常或疾病之另一疗法的疗效或者防止所述病症、功能异常或疾病或其至少一种症状复发或严重性增加的治疗剂的量。治疗有效量可以指足以延缓疾病发作或使其降至最低的治疗剂的量。治疗有效量还可以指在疾病的治疗或控制中提供治疗益处的治疗剂的量。此外，本发明治疗剂的治疗有效量是指在疾病的治疗或控制中提供治疗益处(例如足以增强足以治疗或管理疾病之治疗性抗体的治疗效力)的治疗剂单独的量或者与其它疗法联用时的量。涉及本发明抗体的量时，该术语可以包括改善总体治疗、减少或避免不期望的作用或者额外地增强或协同增强另一治疗剂之治疗效力的量。本文中使用的术语“对象”或“患者”是指表达CC趋化因子的脊椎动物，包括鸟类和哺乳动物(例如牛、马、猪、山羊、绵羊、犬科动物或猫科动物)，优选是人。对象或患者可以是需要用有效量的抗因子抗体进行治疗的，所述抗因子抗体调节其所识别之CC趋化因子的CC趋化因子活性。“炎性病症、功能异常或疾病”是指明显的或可定量的生理现象，其包括但不限于浮肿、发热、白细胞的趋化或迁移、血管增殖、结缔组织增殖、发红、局部热、渗液以及如Robbins,ThePathologicalBasisofDisease,第6版，Cotran等人编，W.B.Saunders,Co.(1999)(特别是第3、7和15章)中所描述的其它指征。在CC趋化因子之抗因子抗体的背景下，该术语是指与CC趋化因子(例如MIP-Ia、MIP-I^、RANTES、MCP-I或其它趋化因子)有关或由其直接或间接介导的现象。“免疫亲和树脂”是指结合至少一种免疫配体或受体的固体基质。例如，抗因子抗体可以通过其除抗原结合位点以外的区域与树脂结合，从而使得抗体与CC趋化因子上的抗原决定簇结合。类似地，CC趋化因子可以有效地结合到树脂上，同时允许其与抗因子抗体结合。可用于固定免疫配体或受体的许多树脂是本领域已知的，其常规地用于形成免疫亲和树脂。这种树脂可以用于分析被特定配体或受体结合的组分、用于免疫测定中或用于纯化方法中。可以使用任何这种树脂形成本发明的免疫亲和树脂。本发明人试图寻找解决现有技术中与施用多种CC趋化因子抗体相关的难题。出人意料地，他们发现了能够与多于一种类型之CC趋化因子结合的抗体一抗因子抗体。这些抗因子抗体提供了对于在炎性疾病情形中抑制单种趋化因子或单种趋化因子受体的改进，因为仅需要一种抗体即可阻断多种趋化因子的功能。本发明的抗因子抗体还避免了施用具有不同药代动力学性质之两种或更多种抗体的缺点，例如针对每种抗体使用不方便的、单独的给药方案。抗因子抗体避免了双特异性抗体的劣势，所述双特异性抗体与特定趋化因子抗原结合的效率较低并且形成更易于与Fe受体结合从而被细胞摄入并在溶酶体中降解的复合物。如本文所述，本发明人提供了几种抗因子抗体，其可简化对由多种趋化因子介导之人炎性和免疫学病症、功能异常和疾病的治疗。这些抗因子抗体将用作结构和功能原型，以通过例如亲和力成熟和抗体人源化方法产生更有效和安全的抗因子抗体。抗因子抗体与两种或更多种CC趋化因子结合并抑制其活性。通过靶向CC趋化因子(包括MIP-Ia、MIP-IP、RANTES和MCP-1)，本发明人鉴定出可用于调节趋化因子的抗体，所述趋化因子活化相同或不同的趋化因子受体(包括CCR1、CCR2、CCR3和CCR5)。例如，由于MIP-Ia、MIP-I^和RANTES均与趋化因子受体CCR5结合，因此识别这三种CC趋化因子的抗因子抗体比针对一种CC趋化因子的抗体能够更全面地调节CCR5的活性。CCR5的活化靶向未成熟的骨髓树突细胞、单核细胞、Thl、TMg、NK和浆细胞样树突细胞。类似地，MIP-Ia、RANTES、MPIF-1和HCC-I均与CCRl结合，其活化靶向单核细胞、记忆性T细胞和NK细胞。与这些CCRl结合之趋化因子中的两种或更多种结合的抗因子抗体更全面地调节受体的活化。因而，能够同时结合并抑制MIP-Ia和RANTES的抗体有效地阻断CCRl和CCR5两者的两种主要配体。因此，本发明人已鉴定出抑制不同趋化因子受体之主要配体的抗因子抗体，所述受体在白细胞(包括参与炎性疾病的单核细胞和T细胞)上表达。针对这些趋化因子组合之任一种的抑制剂提供了对在炎性疾病情形中抑制一种趋化因子(或抗体阻断与单种趋化因子受体的结合)的改进，因为仅需要一种抗体即可阻断单个受体上多种趋化因子的功能或多种受体上趋化因子的活性。抗因子抗体具有不同的特异性和功能活性，这取决于其所结合的趋化因子。本发明提供了与多种CC趋化因子特异性结合并且有利地与RANTES、MIP-Ia、MIP-IP和/或MCP-I中至少两种结合的抗因子抗体。本发明进一步提供了与RANTES和MIP-Ia、与RANTES和MIP-IP、与RANTES和MCP-I、与MIP-Ia和MIP-1^、与MIP-1a和MCP-1或与MIP-13和MCP-I特异性结合的抗体。类似地，本发明提供了与RANTES、MIP-1a、MIP-1P和/或MCP-I中至少三种或四种以及与其它紧密相关的CC趋化因子结合的抗因子抗体。抗体或结合抗原之抗体片段与趋化因子的结合通过抗体的抗原结合位点(ABS)中的氨基酸残基与趋化因子抗原决定簇或表位之间的接触而发生。公知的是，表位可以是包含多个抗原决定簇的线性肽序列或构象表位，甚至是不构成线性连续氨基酸序列之一部分的单个氨基酸或氨基酸侧链。例如，位于a-螺旋一面上的残基可以与抗体的ABS接触，而相反面上的那些则不能。本发明的抗体和结合抗原之抗体片段可以与不含信号肽之成熟CC趋化因子的N末端或C末端一半相结合。例如，人RANTES的成熟形式缺少信号肽残基1-23。因此，其N末端部分的范围是残基1-35，其C-末端的范围是36-68(SEQIDNO:73)。本发明的抗体和结合抗原之抗体片段可以通过与跟趋化因子结合其受体相关的CC趋化因子残基结合而阻断CC趋化因子的结合。有关所提出的CC趋化因子功能性结构域，参见NCBI保守性结构域数据库(ConservedDomainDatabase)CDD29111,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez(2010年8月9日最后一次登录)。每种CC趋化因子的潜在结合位点残基显示如下CCL3/MIP-1aSEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)和残基57-67(EffVQKYVSDLE)；CCL4/MIP-1PSEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKIPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)；CCL5/RANTESSEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)。CCL14/HCC-1SEQIDNO:78的残基8-12(CCFTY)、残基14-21(TYKIPRQR)、残基31-32(QC)或残基54-64(KWVQDHKDMK)。CCL15/HCC-2SEQIDNO:79的残基8-12(CCTSY)、残基14-21(SQSIPCSL)、残基31-32(EC)或残基54-64(PGVQDCMKKLK)。CCL23/MPIF-1SEQIDNO81的残基9-13(CCISY)、残基15-22(PRSIPCSL)、残基32-33(EC)或残基55-65(KQVQVCMRMLK)。CCL18/PARCSEQIDNO:82的残基10-14(CCLVY)、残基16-23(SWQIPQKF)、残基33-34(QC)或残基56-66(KWVQKYISDLK)。这样的抗体或抗原结合片段可以与MCP-1、MIP-1a、MIP-1P和RANTES以及其它相关CC趋化因子(其参与所述趋化因子与其受体的结合)中至少两种的区段结合。抗因子抗体(例如3C12F)可以与结合趋化因子之病毒蛋白(例如vCCI)的相同决定簇结合，或可以抑制这些病毒蛋白与趋化因子的结合。本发明人已产生并表征了与CC趋化因子RANTES、MIP_la和/或MIP-1P结合的单克隆抗体3C12F、7D1G、7D12A、18V4F和18P7E。这些抗体提供必要的信息，包括高变区以及轻链和重链CDR的结构信息，以开发能够同时调节多种CC趋化因子活性的人源化抗体以及治疗由CC趋化因子介导的炎性疾病。上述三种MAb的高变序列和CDR序列如下所示3C12F-SEQIDNO:2_5和7_10；人源化3C12F-SEQIDNO:52-55和57-60；7D12A-SEQIDNO:12-15和17-20；7D1G-SEQIDNO:22-25和27-30；18V4F-SEQIDNO:32-35和37-40;人源化18V4F-SEQIDNO:62-65和67-70;以及18P7E-SEQIDNO:42-45和47-50。公开了五种特定类型的抗因子抗体，表征为特定抗因子抗体3C12F、7D1G、7D12A、18V4F和18P7E。此外，公开了人源化形式的3C12F和18V4F。第一类型的抗体通过由杂交瘤细胞系3C12F或其继代培养物产生之单克隆抗体的结合特异性来表征。该类型的单克隆抗体(MAb)的典型抗体是3C12F。因此该类型包括MAb3C12F，以及其类似物和衍生物，包括通过亲和力成熟或通过人源化方法产生的抗体。3C12F类型的抗体可以含有SEQIDNO:2或52所示的重链可变区或含有3C12F重链的CDRl(SEQIDNO:3或53)、CDR2(SEQIDNO:4或54)和CDR3(SEQIDNO:5或55)中至少一个的重链。这种抗体可以含有包含SEQIDNO:7或57或含有如SEQIDNO:8或58所示的CDRUnSEQIDNO9或59所示的CDR2和如SEQIDNO:10或60所示的CDR3中至少一个的轻链可变区。SEQIDNO:2-5和7-10描述非人源化3C12F，而SEQIDNO:52-55和57-60描述人源化3C12F。人源化3C12F含有SEQIDNO52所示的重链可变区，或含有3C12F重链的CDRl(SEQIDNO:53)、CDR2(SEQIDNO54)和CDR3(SEQIDNO55)中至少一个的重链。这种抗体可以包含含有SEQIDNO:57或含有如SEQIDN0:58所示的⑶R1、如SEQIDNO59所示的CDR2和如SEQIDNO60所示的CDR3中至少一个的轻链可变区。第二类型的抗体通过由杂交瘤细胞系7D12A或其继代培养物产生之单克隆抗体的结合特异性来表征。该类型的单克隆抗体(MAb)的典型抗体是7D12A。因此该类型包括MAb7D12A，以及其类似物和衍生物，包括通过亲和力成熟或通过人源化方法产生的那些抗体。7D12A抗体类型的抗体可以含有SEQIDNO:12所示的重链可变区或含有7D12A重链的CDRl(SEQIDNO:13)、CDR2(SEQIDNO:14)和CDR3(SEQIDNO:15)中至少一个的重链。其还可以包含含有SEQIDNO:17或含有如SEQIDNO:18所示的CDRl、如SEQIDNO19所示的⑶R2和如SEQIDNO20所示的⑶R3中至少一个的轻链可变区。第三类型的抗体通过由杂交瘤细胞系7D1G或其继代培养物产生之单克隆抗体的结合特异性来表征。该类型的单克隆抗体(MAb)的典型抗体是7D1G。该类型包括MAb7D1G以及其类似物和衍生物，包括通过亲和力成熟或通过人源化方法产生的那些抗体。7D1G类型的抗体可以含有SEQIDN0:22所示的重链可变区或含有7D1G重链的CDR1(SEQIDNO:23)、CDR2(SEQIDNO:24)和CDR3(SEQIDNO:25)中至少一个的重链。其还可以包含含有SEQIDNO:27或含有如SEQIDNO:28所示的CDRl、如SEQIDNO:29所示的CDR2和如SEQIDNO30所示的⑶R3中至少一个的轻链可变区。第四类型的抗体通过由杂交瘤细胞系18V4F或其继代培养物产生之单克隆抗体的结合特异性来表征。该类型的单克隆抗体(MAb)的典型抗体是18V4F。该类型包括MAb18V4F以及其类似物和衍生物，包括通过亲和力成熟或通过人源化方法产生的那些抗体。18V4F类型的抗体可以含有SEQIDNO32或62所示的重链可变区或含有18V4F重链的CDRl(SEQIDNO:33或63)、CDR2(SEQIDNO:34或64)和CDR3(SEQIDNO:35或65)中至少一个的重链。其还可以含有包含SEQIDNO:37或67或含有如SEQIDN0:38或68所示的CDRUnSEQIDNO:39或69所示的CDR2和如SEQIDNO40或70所示的CDR3中至少一个的轻链可变区。SEQIDNO:32-35和37-40描述非人源化18V4F，而SEQIDNO:62-65和67-70描述人源化18V4F。人源化18V4F含有SEQIDNO:62所示的重链可变区或含有18V4F重链的CDRl(SEQIDNO:63)、CDR2(SEQIDNO64)和CDR3(SEQIDNO65)中至少一个的重链。这种抗体可以包含含有SEQIDNO:67或含有如SEQIDNO:68所示的⑶R1、如SEQIDNO69所示的CDR2和如SEQIDNO70所示的CDR3中至少一个的轻链可变区。第五类型的抗体通过由杂交瘤细胞系18P7E或其继代培养物产生之单克隆抗体的结合特异性来表征。该类型的单克隆抗体(MAb)的典型抗体是18P7E。该类型包括MAb18P7E以及其类似物和衍生物，包括通过亲和力成熟或通过人源化方法产生的那些抗体。18P7E类型的抗体可以含有SEQIDN0:42所示的重链可变区或含有18P7E重链的CDRl(SEQIDNO:43)、CDR2(SEQIDNO:44)和CDR3(SEQIDNO:45)中至少一个的重链。其还可以包含含有SEQIDNO:47或含有如SEQIDNO:48所示的CDRl、如SEQIDNO:49所示的⑶R2和如SEQIDNO50所示的⑶R3中至少一个的轻链可变区。除了上述特定类型的抗因子抗体之外，本发明还包括与3、4、5或更多种趋化因子结合的抗因子抗体，例如与MIP-1a、MIP-1^、RANTES和/或其它相关CC趋化因子结合的抗因子抗体(例如MAb3C12F以及上面描述的其它抗体)。有利地，抗因子抗体可以针对与特定CCR结合的所有CC趋化因子而产生，或者其可以靶向参与特定病症、功能异常或疾病的那些CC趋化因子。抗因子抗体具有足以允许其与CC趋化因子结合的结合亲和力。与其所结合之CC趋化因子的示例性结合亲和力包括1，000、900、800、400、200、150、100、75、50、40、30、20、10、5、I、0.InM或更少。然而，如附图所示，不同的CC趋化因子可以具有不同的结合亲和力。本领域技术人员有能力选择具有适当结合亲和力的抗体。出于许多治疗目的，具有高亲和力的抗体比具有低亲和力的抗体更为理想，例如已表明被动施用的高亲和力抗体比低亲和力抗体能够更有效地去除体内抗原,较高亲和力的抗体产生较低水平的循环免疫复合物，并且对肾小球功能损害较小(Steward,AntibodiesTheirStructureandFunction,TaylorandFrancis(1984),参见表4、5),确定抗体亲和力的方法以及低和高亲和力抗体的特性和功能通过引用上述文献而并入。另一方面，抗体的中和能力不仅取决于其亲和力，还取决于其浓度、价数和分子构型以及其所施用的位点，对于一些应用来说，较高浓度的较低亲和力之抗体可以是理想的。用于产生抗因子抗体的免疫原可以包括分离的天然CC趋化因子制备物、重组表达的CC趋化因子或化学合成的CC趋化因子以及任选地佐剂。用于增强免疫应答的各种佐剂包括但不限于弗氏(Freund’s)(完全和不完全)、矿物凝胶(例如氢氧化铝)、表面活性物质(例如溶血卵磷脂、聚醚多元醇(pluronicpolyol)、聚阴离子、肽、油乳齐[I、二硝基苯酹等)、人佐剂(例如卡介苗(BacilleCalmette-Guerin)和短小棒状杆菌(corynebacteriumparvum))或类似的免疫刺激剂。MIP-1a、MIP-1^、RANTES和MCP_1蛋白的序列以及编码这些蛋白的多核苷酸序列是已知的，其可见于例如公众可获得的序列数据库(例如GenBank中或参考表4中的登记号。除非另有说明，这些序列的适当版本是本申请临申请前进入这些数据库的那些序列。此外，各种CC趋化因子(包括MIP-1a、MIP-1@、RANTES和MCP-1)的序列已公开，其可见于例如Furutani等人，Biochem.Biophys.Res.Commun.159:249_255(1989)(MCP-1),Obaru等人，J.Biochem.99:885-894(1986)(MIP-1a);Lipes等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA859704-9708(1988)(MIP-lW;SchalI等人，Immunol.141:1018-1025(1988)(RANTES)中，每篇公开内容均作为整体通过引用并入本文。公知地，一些或所有这些趋化因子存在等位基因变体。SEQIDNO:71-74示出用于免疫以及筛选针对MIP-1a、RANTES和MCP-I之抗因子抗体的人序列。为了生产单克隆抗体，可以通过注射CC趋化因子的天然蛋白或其合成的变体或衍生物或多于一种CC趋化因子的组合，对多种合适的宿主动物(例如兔、山羊、小鼠或其它哺乳动物)进行免疫。例如，可以用MIP-1a,MIP-1^>RANTES和MCP-I的混合物作为免疫原来诱导针对这些CC趋化因子的免疫应答。如果需要，可以从哺乳动物中(例如从血液中)分离出针对CC趋化因子的多克隆抗体分子，并通过公知技术(例如，蛋白A色谱)进行进一步纯化，以获得免疫球蛋白级分，以及进行免疫亲和纯化以选择与两种或更多种CC趋化因子结合的抗因子抗体。对于许多应用而言，优选产生单克隆抗体形式的抗因子抗体。可以使用为了通过连续细胞系培养产生抗体分子而提供的任何技术。这些技术包括但不限于杂交瘤技术(参见Kiihler■和Milstein,Nature256:495-497(1975))、三体杂交瘤(trioma)技术、人B细胞杂交瘤技术(参见Kozbor等人,Immunol.Today4:72(1983))以及EBV杂交瘤技术以产生人单克隆抗体(参见Cole等人，In:MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss，Inc.，77-96页(1985))。可以利用人单克隆抗体实施本发明，其可以通过如Cote等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA80=2026-2030(1983)所述利用人杂交瘤产生，或通过用EB病毒体外转化人B细胞而产生，参见Cole等人，In:MonoclonalAntibodiesandCancerTherapy,AlanR.Liss,Inc.,77-96页(1985)。本段中引用的所有文献通过引用而并入。除了这些产生单克隆抗体的常规方式以外，本发明人发现，就抗原原罪(antigenicsin)(Hoskins效应)的问题而言,序贯免疫方法出人意料地产生识别多于一种CC趋化因子的抗因子抗体。发现免疫的顺序影响所得抗体的特异性。发现这些方法可以产生与特定CC趋化因子结合的抗体以及阻断痘病毒vCCI蛋白与CC趋化因子(RANTES/CCL5)结合的一些抗体。通过例如用合适佐剂中的第一趋化因子对动物进行免疫，数周后用第二趋化因子加强免疫，最后用第三趋化因子进行二次加强免疫，从而用不同的趋化因子对脊椎动物(优选小鼠)进行序贯免疫。然而，可以通过涉及多次免疫和加强免疫的方法(例如利用2、3、4或更多种不同趋化因子的不同组合)产生抗因子抗体。可以进行基于蛋白质和DNA的趋化因子免疫。DNA免疫是本领域公知的,其通过引用AntibodiesALaboratoryManual(E.Harlow和D.Lane编，1988)而并入。趋化因子的多核苷酸序列是本领域公知的，其也通过引用Yoshie等人，Adv.Immunol.78:57-110(2001)而并入。可以利用佐剂或趋化因子与载体蛋白的缀合物进行免疫，例如由AntibodiesALaboratoryManual,E.Harlow和D.Lane编(1988)(通过引用而并入)所述的那些。优选地，向每只小鼠施用约500yg/kg体重或约IOug的趋化因子，并且优选的初次免疫的佐剂是完全弗氏佐剂，随后加强免疫的佐剂是不完全弗氏佐剂。用作免疫原的示例性CC趋化因子包括CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1^和CCL5/RANTES中的至少两种。在序贯免疫的一个实施方案中，首先用MIP-1a对小鼠进行免疫，随后用RANTES和/或MCP-I进行加强免疫，或者，使用CC趋化因子RANTES、MIP-la、MIP-1@和/或MCP-1的任何其它顺序。通过ELISA对小鼠血清进行针对RANTES、MIP-1a、MIP-1^和MCP-I的反应性测试。接着用具有合适血清应答之小鼠的脾脏进行杂交瘤生产。可以通过ELISA对由杂交瘤细胞系产生的抗体进行识别CC趋化因子之能力的测试以及在体外趋化测定中或在vCCI/趋化因子结合测定中进行阻断活性的测试。利用这种策略，鉴定出结合并抑制多种CC趋化因子的几种独特的单克隆抗体。这些抗体被命名为“抗因子抗体”。还可以在其它功能性测定中对杂交瘤产生的抗体进行测试。接着对产生具有多种CC趋化因子反应性之抗体的杂交瘤细胞系进行克隆和扩增，以产生抗体并进行纯化。确定抗体结合特异性的筛选测定是本领域公知且常规实施的。对于这些测定的全面论述，参见Harlow等人编，AntibodiesALaboratoryManual；ColdSpringHarborLaboratory；ColdSpringHarbor,N.Y.,第6章(1988)。初始鉴定后，可以例如通过亲和力成熟或通过改造其⑶R或框架序列对抗因子抗体进行亲和力增强，或者其可以被人源化。对于人类治疗中的用途，优选地，抗因子抗体完全是人的或是人源化的，并识别2、3、4或更多种CC趋化因子。在一个实施方案中，筛选具有期望特异性之抗体的方法包括但不限于酶联免疫吸附测定(ELISA)和本领域已知的其它免疫学介导的技术。在一个特定的实施方案中，通过产生与具有CC趋化因子特定结构域的CC趋化因子片段结合的杂交瘤，从而有利于对特异性针对该结构域的抗体进行选择。本文中还提供了特异性针对CC趋化因子内一个或更多个结构域(例如CC趋化因子家族蛋白的保守性结构域或其衍生物、片段、类似物或同源物)的抗体。可以在竞争性和非竞争性结合免疫测定中测试本发明的抗因子抗体和其片段与CC趋化因子(特别是MIP-1a、MIP-1P、RANTES、MCP-I和/或其它趋化因子)的特异性结合。免疫测定的公知方法通过引用Stites和Terr编，BasicandClinicalImmunology,第7版(1991);Maggio编EnzymeImmunoassay,CRCPress,BocaRaton,Fla.(1980)；Tijan,PracticeandTheoryofEnzymeImmunoassays,LaboratoryTechniquesinBiochemistryandMolecularBiology,ElsevierSciencePublishersB.V.,Amsterdam(1985);Harlow和Lane编，Antibodies,aLaboratoryManual,ColdSpringHarbor,N.Y.(1988);Chan编，Immunoassay:APracticeGuide,AcademicPress,Orlando,Fla.(1987);Price和Newman编，PrinciplesandPracticeofImmunoassays,StocktonPress,N.Y.(1991)以及Ngo编(1988)Non-isotopicImmunoassays,PlenumPress,N.Y.(1988)而并入。测定抗体结合的免疫测定可以是竞争性或非竞争性的。一般地，在抗体的情况下，竞争性测定涉及两个抗体之间竞争性结合配体。例如，可以使用经标记的MCP-I评估一种抗体是否可与另一抗体竞争结合经标记的MCP-1。测定可以基于例如酶联免疫吸附测定(ELISA)或例如放射性免疫测试(RIA)的标准测定。或者，可以在非竞争性测定中测试本发明的抗体和抗体片段与底物的结合。例如，可以利用标准ELISA，其中将配体(例如MCP-1)固定于ELISA板上。使测试抗体与配体孵育并使其结合。对板进行清洗，其后如果测试抗体与配体结合，则经酶缀合的第二抗体(例如小鼠抗人Fe抗体)与测试抗体结合。清洗后，加入酶的底物，并使其与酶反应。一般地，颜色的变化表示存在与配体反应的抗体。可针对不同的CC趋化因子重复进行ELISA，以确定测试抗体识别哪些趋化因子。免疫测定中常常使用经标记的测定组分。标记物可采用多种形式，其可以依照本领域公知的方法直接或间接地偶联至期望的测定组分。测定组分的常用标记物包括放射性同位素(包括3h、125i、35s、14c和32P)、荧光团、化学发光试剂和酶。具体标记物的选择将取决于所需灵敏度、与化合物缀合的容易程度、稳定性要求以及可利用的仪器，并且其可以由本领域普通技术人员容易地确定。评估本发明的抗体是否抑制CC趋化因子(特别是MIP-1a、MIP-1^、RANTES、MCP-I和/或其它趋化因子)活性的测定可以利用针对趋化性、胞内钙增加等已知测定容易地进行。例如但不限于，可以在96孔塑料腔室中进行趋化因子趋化性测定。所述孔通过滤器分为两个区室。滤器允许细胞响应于化学物梯度从一个区室穿过进入另一区室。将测试细胞放置于腔室的一个区室中的培养基中，CC趋化因子例如放置于另一区室中的培养基中。对穿过滤器的细胞进行计数。在其它孔中，将CC趋化因子与测试抗体混合，以确定抗体是否能够阻断细胞迁移。为了对通过如上筛选方法鉴定出的抗因子单克隆抗体进行进一步抗体改造，如实施例7中所述地确定抗体的DNA序列。可以利用本领域已知的方法进一步提高本发明之抗因子抗体的亲和力，例如由Raipal等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.102:8466-8471(2005)；Lippow等人，Nat.Biotechnol.25:1171-1176(2007);Wu等人，J.Mol.Biol.368=652-665(2007);Yang等人，J.Mol.Biol.254:392-403(1995)以及Huse等人，J.Immunol.149:3903-3913(1992)所描述的那些方法，其中每篇均作为教导亲和力成熟或抗体增强的方法通过引用而并入。本发明的抗因子抗体可以具有少于200、IOOnM的亲和力(例如最初分离的鼠抗体3C12F对MIP-Ia具有49恤的亲和力)，其通过亲和力成熟方法可以增强到少于40、30、20、10、5、1、0.5或0.InM。用于单克隆抗体亲和力成熟的方法是本领域公知的,其通过引用AntibodyEngineering(HumanaPress,2004)以及PhageDisplay,T.Clackson和H.BLowman,editors(OxfordUniversityPress,2004)而并入。这些方法可以起始于这种抗因子抗体的嵌合形式，其可以单独地进行人源化或与亲和力成熟同时进行人源化。抗体的可变区可以表示为纤维状噬菌体表面上的Fab片段。可以实施诱变方案，以改变6个CDR内的任一残基，以制备噬菌体上表达之Fab片段的组合文库。可以对这些进行趋化因子抗原结合的筛选以及亲和力提高的分析。随后，可以联合进行优选氨基酸替换，以使亲和力甚至更大地提高。同时可以对可变结构域框架区内的突变进行分析，以找到具有改进性质的序列。由于亲本抗体序列中一个或更多个氨基酸残基的添加、缺失和/或替换，上述“变体”或“类似物”抗体的氨基酸序列与亲本抗体的氨基酸序列不同。在一个实施方案中，变体包含亲本抗体一个或更多个高变区中的一个或更多个氨基酸替换。可以通过替换3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E重链或轻链序列的CDR、高变区或框架区中1、2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基，对抗体类似物进行改造。类似地，可以通过本领域已知的同种型转换(isotypeswitching)技术或通过基因改造方法(例如⑶R移植、形成嵌合抗体或人源化)改变这种抗体的同种型。可以通过3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E类型的单克隆抗体的亲和力成熟方法产生类似物。一般地，选择具有更高结合亲和力或同时可获得的更宽趋化因子结合谱的类似物。可以通过例如利用ELISA或其它公知的测定确定类似物是否与亲本抗体所结合之相同趋化因子结合，从而容易地对类似物进行鉴定。类似物包括重链和轻链与3C12F、7D1G、7D12AU8V4F或18P7E的相应重链和轻链序列共有约90、95、99或100%序列同一性的那些变体。可以对由3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E杂交瘤细胞系或其继代培养物产生之抗体的经亲和力成熟的变体进行选择，选择具有I，000、800、400、200、100、75、50、40、30、20、10、5、1或0.InM或更少的亲和力。一些类似物或变体将具有1、2、3、4、5、6、7、10或多至20个氨基酸序列修饰，例如缺失、插入或替换，类似物可以在3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E抗体的一个或更多个高变区或⑶R中具有约2至10个氨基酸替换。类似物可以是如下抗体或其抗原结合片段，其与包含下列CDR组合至少之一的MIP-Ia,MIP-1^,RANTES,MCP-1中两种或更多种结合3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E重链和/或轻链可变区的CDRl和CDR2,CDRl和CDR3,CDR2和CDR3,以及CDRUCDR2和CDR3。动物的抗原结合可变结构域与人恒定结构域偶联的嵌合抗体是本领域公知的，其制备方法通过引用Cabilly等人，美国专利No.4，816，567；Morrison,S.L.等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA81:6851-6855(1984);Boulianne，G.L.等人，Nature312643-646(1984)以及Neuberger，M.S.等人，Nature314:268-270(1985)而并入。可以选择人恒定结构域的同种型以使嵌合抗体适于参与抗体依赖的细胞毒性(ADCC)和补体依赖的细胞毒性(参见例如Bruggemann,M.等人，J.Exp.Med.1661351-1361(1987)；Riechmann,L.等人，Nature332:323-327(1988)；Love等人，MethodsinEnzymology178:515-527(1989);Bindon等人，J.Exp.Med.168:127-142(1988)，其通过引用而并入)。可以通过本领域已知的重组DNA技术产生嵌合的和人源化的单克隆抗体，例如利用PCT国际申请No.PCT/US86/02269;欧洲专利申请No.184，187;欧洲专利申请No.171,496;欧洲专利申请No.173,494；PCT国际公开No.WO86/01533;美国专利No.4，816，567;欧洲专利申请No.125,023;Better等人，Science240:1041-1043(1988)中描述的方法。可以通过已知方法对本发明的抗因子抗体进行人源化，包括由Carter，美国专利No.6，719，971，Almagro等人，Front.Biosci.13:1619-1633(2008)；Pini等人，Comb.Chem.HighThroughputScreen.5:503-510(2002)以及Wu等人，J.Mol.Biol.294151-162(1999)公开的那些，其通过引用而并入。人源化产生具有供者动物(鼠)抗体的抗体特异性但是在人中免疫原性降低并且效应物功能更好的免疫球蛋白分子。该方法涉及将已知的抗因子CDR序列嵌入人抗体轻链和重链可变区框架序列中。一般地，人源化抗体通过用小鼠CDR替换到人可变结构域框架中而产生，如果人可变结构域框架采取与CDR所来源之小鼠可变框架相同或相似的构象，这最有可能使得保留CDR的正确空间取向。这通过从人抗体中获得人可变结构域而实现，所述人抗体的框架序列表现出与CDR所来源之小鼠的可变框架结构域高度的序列同一性。重链和轻链可变框架区可以来源于同一或不同的人抗体序列。人抗体序列可以是天然之人抗体的序列，或可以是几种人抗体的共有序列。参见Kettleborough等人，ProteinEngineering.:773-783(1991);Kolbinger等人，ProteinEngineering6:971-980(1993)以及Carter等人，WO92/22653。鉴定出小鼠供者免疫球蛋白和合适人受者免疫球蛋白的互补决定区后，下一步是确定应当替换这些组分中的哪些残基(如果有的话)，以使所得人源化抗体的性质最优。一般地，应当将用鼠替换人氨基酸残基减至最少，因为引入鼠残基增加了抗体在人体内激发人抗小鼠抗体(HAMA)应答的风险。基于对CDR构象和/或与抗原结合的可能影响，从人可变区框架残基中选择某些氨基酸进行替换。鼠CDR区与人可变框架区的非天然并列安置可导致非天然的构象限制，除非通过替换某些氨基酸残基进行修正，否则这将导致结合亲和力损失。可以部分地通过计算机建模来确定对所替换氨基酸残基的选择。一般地，分子模型的产生起始于免疫球蛋白链或其结构域的经解析结构。对将要建模的链与经解析三维结构的链或结构域进行氨基酸序列相似性的比较，并选择显示最高序列相似性的链或结构域作为起点，以构建分子模型。选择共有至少50%序列同一性的链或结构域进行建模，优选地，选择共有至少60%、70%、80%、90%、95%或更高序列同一性的那些进行建模。修改经解析的起始结构，使得对免疫球蛋白链或结构域中的实际氨基酸与起始结构之间的差异建模。接着将经修改的结构组装成复合的免疫球蛋白。最后，通过能量极小化以及通过验证所有原子均处于相互适宜的距离以及键长和键角在化学上可接受的范围内，对模型进行完盡口o还可以部分地通过检查特定位点处氨基酸的特征或凭经验观察特定氨基酸替换或突变的作用，从而确定对所替换氨基酸残基的选择。例如，当鼠可变区框架残基和所选人可变区框架残基之间的氨基酸不同时，人框架氨基酸通常应当被小鼠抗体中的等同框架氨基酸替换，前提是可以合理预期该氨基酸与抗原直接非共价结合，与CDR区相邻，以另外方式与⑶R区相互作用(例如如通过计算机建模所确定地，在⑶R区的约3-6人内)或参与VL-VH界面。“与抗原直接非共价结合”的残基包括框架区位置中很有可能根据例如通过氢键、范德华力、疏水相互作用等建立的化学力与抗原上的氨基酸直接相互作用的氨基酸。“与⑶R区相邻”的残基包括位于与人源化免疫球蛋白链一级序列中一个或更多个CDR紧邻位置处的氨基酸残基，例如与如Kabat(Wu和Kabat,J.Exp.Med.132211-250(1970))所定义的CDR或如Chothia(Chothia和LeskJ.Mol.Biol.196901-917(1987))所定义的⑶R紧邻位置处。这些氨基酸特别可能与⑶R中的氨基酸相互作用，如果其选自受者，则可使供者CDR扭曲并且使亲和力降低。此外，相邻氨基酸可以与抗原直接相互作用(Amit等人，Science233:747-753(1986)，通过引用并入本文)，从供者中选择这些氨基酸对于保持提供原始抗体中亲和力的所有抗原接触是理想的。“以另外方式与CDR区相互作用”的残基包括通过二级结构分析确定其处于足以影响CDR区之空间取向的那些残基。可以通过分析供者免疫球蛋白的三维模型(例如计算机产生的模型)对“以另外方式与⑶R区相互作用”的残基进行鉴定。三维模型(通常是原始供者抗体的三维模型)显示CDR外部的某些氨基酸与CDR非常靠近，其很有可能通过氢键、范德华力、疏水相互作用等与CDR中的氨基酸相互作用。在这些氨基酸位置，可以选择供者免疫球蛋白氨基酸，而非受者免疫球蛋白氨基酸。依照该标准的氨基酸一般具有在CDR中某个原子的约3人内的侧链原子，并且必须含有能够根据建立的化学力(例如上面列出的那些)与⑶R原子相互作用的原子。可以以另外的方式对能够与CDR中氨基酸相互作用的氨基酸进行鉴定。以两种方式对每个框架氨基酸的溶剂可及表面区域进行计算(I)在完整抗体中；(2)在去除了CDR的抗体假定分子中。这些数值之间的显著差异为约10人2或更大表明，框架氨基酸与溶剂的接近至少部分地被CDR阻断，因此这些氨基酸与CDR接触。可以利用本领域已知的算法(例如Connolly,J.Appl.Cryst.16:548(1983)以及Lee和Richards,J.Mol.Biol.55379(1971)，二者通过引用并入本文)基于抗体的三维模型对氨基酸的溶剂可及表面区域进行计算。框架氨基酸还偶尔可以通过影响与CDR接触的另一框架氨基酸的构象而间接地与⑶R相互作用。“参与VL-VH界面”的残基或“填充(packing)残基”包括VL和VH之间界面处的那些残基，例如由Novotny和Haber,Proc.Natl.Acad.Sci.USA82:4592-66(1985)或Chothia和Lesk(前述)所定义的那些。一般地，不常见的填充残基如果与人框架中的那些不同，则应当保留于人源化抗体中。一般地，满足以上标准的一个或更多个氨基酸被替换。在一些实施方案中，满足以上标准的所有或大部分氨基酸被替换。偶尔地，对于特定氨基酸是否符合上面的标准是模糊的，所产生的替代性免疫球蛋白变体中，其一具有该特定替换，而另一个则没有。可以在本文描述的任何测定中测试由此产生的替代性免疫球蛋白变体是否具有期望活性，并选择优选的免疫球蛋白。通常，人源化抗体中的⑶R区与供者抗体的相应⑶R区是基本上一致的，更通常地，其与供者抗体的相应CDR区相同。尽管通常并非需要地，有时可以在不影响所得人源化免疫球蛋白的结合活性的情况下对CDR残基进行一个或更多个保守性氨基酸替换。保守性替换意在指例如以下组合甘氨酸(gly)、丙氨酸(ala);缬氨酸(val)、异亮氨酸(ile)、亮氨酸(Ieu);天冬氨酸(asp)、谷氨酸(glu);天冬酰胺(asn)、谷氨酰胺(gin);丝氨酸(ser)、苏氨酸(thr);赖氨酸(Iys)、精氨酸(arg);以及苯丙氨酸(phe)、酪氨酸(tyr)。其它的候选替换是在人免疫球蛋白的该位置处不常见或“稀有”的受者人框架氨基酸。这些氨基酸可以被小鼠供者抗体等同位置处的氨基酸或更典型之人免疫球蛋白等同位置处的氨基酸所替换。例如，当受者免疫球蛋白的人框架区中某一位置的氨基酸是稀有的，而供者免疫球蛋白中该位置的相应氨基酸在人免疫球蛋白序列中是常见的时，或者当受者免疫球蛋白中的氨基酸在某一位置是稀有的，而供者免疫球蛋白中该位置的相应氨基酸相对于其它人序列来说也是稀有的时，替换是理想的。这些标准有助于确保人框架中的非典型氨基酸不会破坏抗体结构。此外，通过用供者抗体中对于人抗体来说是典型的氨基酸替换不常见的人受者氨基酸，可以使人源化抗体的免疫原性更低。本文中使用的术语“稀有”表示在序列的代表性样品中在少于约20%、通常少于10%的序列中出现在该位置的氨基酸，本文中使用的术语“常见”表示在代表性样品中在多于约25%、通常多于50%的序列中出现的氨基酸。例如，所有的人轻链和重链可变区序列分别分为序列“亚组”，其特别是相互同源的并且在某些关键位置具有相同的氨基酸(Wu和Kabat，前述)。当确定人受者序列中的氨基酸在人序列中是“稀有”还是“常见”时，常常优选仅考虑与受者序列属于同一亚组的那些人序列。其它的候选替换是由Chothia和Lesk(前述)提出的另一种定义下鉴定为CDR区一部分的受者人框架氨基酸。其它候选替换是对应于稀有或不常见的供者框架残基的受者框架残基。稀有或不常见的供者框架残基是鼠抗体中在该位置稀有或不常见(如本文中所定义)的那些。对于鼠抗体而言，可以依照Kabat以及经鉴定不同于共有序列的残基位置来确定亚组。这些供者特异性差异可来自于鼠序列中增强活性的体细胞突变。预测影响结合的不常见的残基被保留，而预测对于结合不重要的残基可以被替换。更多候选的替换有受者框架区出现的非谱系残基。例如，当受者抗体链(即与供者抗体链共有显著序列同一性的人抗体链)与谱系抗体链(同样地与供者链共有显著的序列同一性)进行比对时，受者链框架和谱系链框架之间不匹配的残基可以被谱系序列中的相应残基替换。除了上面讨论的特定的氨基酸替换之外，人源化免疫球蛋白的框架区通常与其所来源之人抗体的框架区是基本相同的，更通常地，其与其所来源之人抗体的框架区相同。当然，框架区中的许多氨基酸对抗体的特异性或亲和力没有或几乎没有直接贡献。因此，在所得人源化免疫球蛋白的特异性或亲和力无明显变化的情况下，可以允许框架残基的多种单个保守性替换。因此，在一个实施方案中，人源化免疫球蛋白的可变框架区与人可变框架区序列或该序列的共有序列共享至少85%的序列同一性。在另一实施方案中，人源化免疫球蛋白的可变框架区与人可变框架区序列或该序列的共有序列共享至少90%，优选95%，更优选96%、97%、98%或99%的序列同一性。然而一般地，这些替换是不理想的。在一些实施方案中，优选人源化抗体对抗原表现出与构建其所来源之小鼠抗体相似或更高的特异性结合亲和力。通常，人源化抗体对抗原之结合亲和力的上限在供者免疫球蛋白的3、4或5倍内。通常，结合亲和力的下限也在供者免疫球蛋白的3、4或5倍内。或者，可以将结合亲和力与未经替换的人源化抗体(例如具有供者CDR和受者框架区但框架区中无替换的抗体)进行比较。在这种情况下，优选抗体(具有替换)的结合比未经替换的抗体高至少2至3倍或3至4倍。为了进行比较，可以例如通过BIAcore(即利用未经标记之试剂的表面等离子共振)或竞争性结合测定确定不同抗体的活性。可以利用标准的亲和力成熟技术(例如Wu等人，J.Mol.Biol.350:126-144(2005)(通过引用而并入)所述地)，基于本文公开的单克隆抗体的序列设计改造抗体，以增加抗体与原来识别之趋化因子的亲和力和/或将趋化因子灵敏度扩展至免疫疾病中也涉及的其它CC趋化因子。可以选择类型或同种型或亚类(例如IgGl、IgG2、IgG3或IgG4)，特别是对于嵌合、人源化或经改造抗体产物来说，从而将抗体靶向或改造为具有所选类型或亚类公知的特定功能。例如，可以选择人IgG2，以使抗体产物尽可能少地穿过胎盘或者使Fe受体与对象免疫系统中其它组分的相互作用降至最低；可以选择亚类IgG4，以使抗体产物活化组分的能力降至最低。可以选择IgA同种型，以产生分泌型抗体和五聚体型(pentameric)IgM抗体产物，从而与单体型抗体相比增强抗体结合。抗体分子各种类型和亚类的功能通过引用Kuby，Immunology,WHFreeman(1997)而并入。“单链Fv”或“sFV”抗体片段包含抗因子抗体的Vh和\结构域，其中这些结构域存在于单条多肽链中。一般地，Fv多肽还包含Vh和\结构域之间的多肽接头，其使得sFv形成用于抗原结合的期望结构(参见PHickthiminThePharmacologyofMonoclonalAntibodies,113卷，Rosenburg和Moore编，Springer-Verlag,NewYork,269-315页(1994)，其通过引用而并入)。可以通过已知方法(例如由美国专利No.4，946，778(通过引用而并入)所描述的那些)产生特异性针对CC趋化因子的单链抗体。“双功能抗体(diabody)”是指具有两个抗原结合位点的小抗体片段，该片段包含与同一多肽链(Vh和')中的轻链可变结构域(')相连的重链可变结构域(Vh)。通过利用接头(其太小而不能使同一链上的两个结构域之间配对)，使得结构域只能与另一链的互补结构域配对，从而产生两个抗原结合位点。本发明的抗因子抗体可制备成双功能抗体，其可以通过引用EP404，097、WO93/11161以及Hollinger等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA90=6444-6448(1993)而并入的方法来制备。“线性抗体”是指Zapata等人,ProteinEng.8(10):1057-1062(1995)中描述的抗体。简言之，这些抗体包含一对串联的Fd片段(Vh-ChI-Vh-ChI)，其形成一对抗原结合区。线性抗体可以是双特异性的或单特异性的。本发明的抗因子抗体可以依照由Zapata等人(通过引用并入本文)描述的方法制备。可通过其它常规方法(例如由Huse等人，Science246:1275-1281(1989)(通过引用而并入)公开的那些)构建Fab表达文库，从而能够快速有效地鉴定对CC趋化因子或其衍生物、片段、类似物或同源物具有期望特异性的单克隆Fab片段。可以使用下示的抗体之独特部分(例如其⑶R序列和含有⑶R之一部分的序列)产生抗独特型抗体。这些抗体识别抗因子抗体可变片段上的一个或更多个独特型，并能够用于鉴定或纯化抗因子抗体或调节其活性。可以通过本领域已知的步骤产生这些抗独特型抗体，例如通过将抗体的可变肽序列缀合到免疫原性载体上以及重复免疫。这些方法还通过引用Cavenaugh,等人，Pharm.Res.21:1480-1488(2004)而并入。抗独特型抗体是识别另一抗体(靶抗体)之决定簇的抗体。一般地，抗独特型抗体识别靶抗体之抗原结合位点的决定簇。通常，靶抗体是单克隆抗体。一般地，通过用靶单克隆抗体对与靶单克隆抗体来源同一物种和基因型的动物(特别是小鼠)进行免疫来制备抗独特型抗体。经免疫的动物对靶单克隆抗体之独特型决定簇产生免疫应答，并产生针对靶单克隆抗体之独特型决定簇的抗体。可以利用经免疫动物的抗体产生细胞(例如脾细胞)产生抗独特型单克隆抗体。此外，还可以用抗独特型抗体对动物进行免疫，以产生抗抗独特型抗体。可以采用标准技术利用这些经免疫的动物产生抗抗独特型单克隆抗体。抗抗独特型抗体可以与用于制备抗独特型抗体的初始靶单克隆抗体结合相同的表位。抗抗独特型抗体代表了与初始靶单克隆抗体具有相同抗原特异性的其它单克隆抗体。如果抗独特型抗体与靶抗体的结合被靶抗体的相关抗原抑制，并且如果抗独特型抗体诱导与靶抗体具有相同特异性的抗体应答，则其模拟靶抗体的抗原。这种抗独特型抗体是“内部镜像(internalimage)抗独特型”,其能够诱导抗体应答,如同其是初始抗原一样(参见Bona和Kohler,Anti-idiotypicAntibodiesandInternalImageinMonoclonalandAnti-idiotypicAntibodiesProbesforReceptorStructureandFunction，VenterJ.C.，Frasser,C.M.，Lindstrom，J.编，AlanR.Liss,N.Y.，141-149页(1984))。已显示，掺有内部镜像抗独特型抗体的疫苗能够诱导针对病毒、细菌和寄生生物的保护性应答(Kennedy等人，Science232:220-223(1986)；McNamara等人，Science226:1325-1326(1985))。还已显示，内部镜像抗独特型抗体能够诱导针对肿瘤相关抗原的免疫(Raychauhuri等人，J.Tmmuno1.137:1743-1749(1986)；Raychauhuri等人，J.Tmmun01.139:3902-3910(1987)；Bhattacharya-Chatterjee等人，J.Tmmuno1.1391354-1360(1987)；Bhattacharya-Chatterjee等人，J.Tmmuno1.141:1398-1403(1988))。本段中所引用文献的教导通过引用而并入。可以例如通过用免疫原性量的组合物(其包含CC趋化因子或含有CC趋化因子至少一个抗原性表位的CC趋化因子免疫原性片段)对动物(例如小鼠)进行免疫，来制备CC趋化因子的抗独特型抗体。所述组合物还可以含有合适的佐剂以及提供免疫原性所必需的任何载体。识别CC趋化因子的单克隆抗体可以如上所述从经免疫动物的细胞中制备。然后选择识别CC趋化因子共有表位的单克隆抗体，并用其制备包含免疫原性量之抗CC趋化因子单克隆抗体的组合物。通常，合适佐剂中25至200i!g剂量的经纯化CC趋化因子单克隆抗体是足够的。可以以14至30天的给药间隔对小鼠进行2-6次免疫。通常，通过任何合适的施用途径对动物进行免疫，例如腹膜内、皮下、静脉内或这些的组合。可以利用标准的免疫测定方法在免疫期间监测抗独特型抗体的产生。可在收获抗体产生细胞前3天，用单克隆抗体作为免疫原对具有适当效价之与靶单克隆抗体反应的抗体的动物进行再次免疫。优选地，采用脾细胞，然而也可以选择其它抗体产生细胞。收获抗体产生细胞，并使其与骨髓瘤细胞融合以产生如上所述的杂交瘤，并选择合适的抗独特型抗体产生细胞。通过利用抗独特型单克隆抗体作为免疫原通过再一轮免疫和杂交瘤产生，产生抗抗独特型抗体。如上所述，抗因子抗体的可变区段(例如CDR区段)或可变区段的肽片段(包括具有3、4、5、6、7、8、9、10、11、12或更多个连续氨基酸残基的片段，特别是对趋化因子具有结合活性的那些)可以用于除治疗自身免疫病之外的多种应用中，包括作为基于肽的药剂、疫苗、产生抗独特型抗体或作为免疫原。本发明的另一方面涉及通过向哺乳动物施用足以诱导免疫应答之量的多肽制备物而诱导哺乳动物中针对本发明多肽之免疫应答的方法。所述量将取决于动物物种、动物大小等，然而其可以由本领域技术人员确定。本发明还包括通过亲和力成熟方法从嵌合的或人源化的抗因子抗体得到的抗体或抗体片段。可以对CDR中显著提高抗体对CC趋化因子之亲和力的氨基酸替换进行鉴定，因而其包含于本文中。亲和力成熟的方法例如描述于Wu等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA95:6037-6042(1998)以及Clackson和Loman,PhageDisplay,OxfordUniversityPress(2004)中，每篇均通过引用而并入。抗CC趋化因子抗因子抗体可以用于本领域中涉及对CC趋化因子定位和/或定量的已知方法中(例如用于测定适当生理样品中的CC趋化因子水平、用于诊断方法中、用于使蛋白成像等)。在一个给定的实施方案中，CC趋化因子的抗体或含有抗体来源之结合结构域的其衍生物、片段、类似物或同源物用作药学活性化合物、药物或治疗性化合物。抗CC趋化因子抗因子抗体(例如单克隆抗体)可以用于通过标准技术(例如亲和色谱或免疫沉淀)分离CC趋化因子。抗CC趋化因子抗体可有利于纯化细胞中的天然CC趋化因子以及宿主细胞中表达的重组产生之CC趋化因子。此外，抗CC趋化因子广泛抗体(pan-antibody)可以用于检测CC趋化因子(例如在细胞裂解液中或细胞上清液中)，以评估CC趋化因子表达的丰度和模式。抗CC趋化因子抗因子抗体可以诊断性地用于监测组织中的蛋白质水平，以作为临床测试方法的一部分，从而例如确定给定治疗方案的效力。可以通过将抗体与可检出物质偶联(即物理性连接)而利于进行检测。可检出物质的实例包括多种酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料和放射性材料。合适的酶的实例包括辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、3-半乳糖苷酶或乙酰胆碱酯酶；合适的辅基复合物的实例包括链霉亲和素/生物素和亲和素/生物素；合适的荧光材料的实例包括伞形酮、荧光素、异硫氰酸突光素、罗丹明、二氯三嗪基氨基(dichlorotriazinylamine)突光素、丹磺酰氯或藻红蛋白；发光材料的实例包括鲁米诺(Iuminol);生物发光材料的实例包括萤光素酶、萤光素(Iuciferin)和水母发光蛋白，合适的放射性材料的实例包括125I、131I、35S和3H。此外，本发明的抗体可以与毒素(例如，可以与抗体缀合的放射性同位素、蛋白毒素和化学毒素)相缀合。这样的毒素包括但不限于铅-212、铋-212、砹-211、碘-131、钪-47、铼-186、铼-188、钇-90、碘-123、碘-125、溴-77、铟-111、硼-10、锕系元素、蓖麻毒素、阿霉素(adriamycin)、刺孢霉素(calicheamicin)、5_氟尿卩密卩定、auristatin和类美坦素(maytansinoid)。嵌合的、人源化和人的抗体以及其抗原结合片段通常通过重组表达产生。将编码人源化轻链和重链可变区(其任选地与恒定区相连)的核酸插入表达载体中。可以将轻链和重链克隆到同一或不同的表达载体中。编码免疫球蛋白链的DNA区段与表达载体中确保免疫球蛋白多肽表达的调控序列有效连接。表达调控序列包括但不限于启动子(例如，天然相关的或异源的启动子)、信号序列、增强子元件和转录终止序列。优选地，表达调控序列是能够转化或转染真核宿主细胞之载体中的真核启动子系统。载体一经进入合适的宿主中，在适于高水平表达核苷酸序列以及适于对交叉反应之抗体进行收集和纯化的条件下培养宿主。这些表达载体通常可以作为附加体或作为宿主染色体DNA的整合部分在宿主生物中复制。表达载体常含有选择标记(例如氨苄青霉素抗性、潮霉素抗性、四环素抗性或新霉素抗性)，以允许对经期望DNA序列转化的细胞进行检测(参见例如Itakura等人，美国专利No.4，704，362，其通过引用而并入)。大肠杆菌(E.coli)是特别适用于克隆本发明之多核苷酸(例如DNA序列)的一种原核宿主。适用的其它微生物宿主包括芽孢杆菌(例如枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilus))和其它肠杆菌(例如沙门氏菌(Salmonella)、沙雷氏菌(Serratia))以及多种假单胞菌(Pseudomonas)菌种。在这些原核宿主中，还可以制备通常含有与宿主细胞相容之表达调控序列(例如复制起点)的表达载体。此外，存在任意数目的多种公知启动子，例如乳糖启动子系统、色氨酸(trp)启动子系统、￠-内酰胺酶启动子系统或来自噬菌体X的启动子系统。启动子通常任选地与操纵子序列一起调控表达，并且具有核糖体结合位点序列等，用于起始并完成转录和翻译。另一些微生物(例如酵母)也可以用于表达。具有合适载体的酵母属(Saccharomyces)是优选的酵母宿主,所述载体具有期望的表达调控序列(例如启动子)、复制起点、终止序列等。典型的启动子包括3-磷酸甘油酸激酶和其它糖酵解酶。诱导型酵母启动子包括来自乙醇脱氢酶、异细胞色素C以及负责麦芽糖和半乳糖利用的酶的启动子。除了微生物之外，还可以利用哺乳动物组织细胞培养物表达和产生本发明的多肽(例如编码免疫球蛋白或其片段的多核苷酸)。参见Winnacker,FromGenestoClones,VCHPublishers,N.Y.，N.Y.(1987)。事实上，优选真核细胞，因为本领域已开发了多种能够分泌异源蛋白质(例如完整的免疫球蛋白)的合适的宿主细胞系，包括CHO细胞系、多种Cos细胞系、HeLa细胞，优选骨髓瘤细胞系或经转化的B细胞或杂交瘤。优选地，所述细胞是非人细胞。用于这些细胞的表达载体可包括表达调控序列(例如复制起点、启动子、增强子(Queen等人,Immunol.Rev.89:49-68(1986)))，以及必要的加工信息位点(例如核糖体结合位点、RNA剪接位点、多聚腺苷酸化位点以及转录终止序列)。优选的表达调控序列是来源于免疫球蛋白基因、SV40、腺病毒、牛乳头瘤病毒、巨细胞病毒等的启动子。参见Co等人，J.Immunol.148:1149-1154(1982)，上述每篇文献均通过引用而并入。或者，可以将编码抗体的序列整合到转基因中，从而引入转基因动物的基因组中并使其随后在转基因动物的乳汁中表达，例如由Deboer等人，美国专利No.5，741,957；Rosen，美国专利No.5，304，489以及Meade等人，美国专利No.5，849，992所述地(每篇均通过引用而并入)。合适的转基因包括与来自乳腺特异性基因(例如酪蛋白或￠-乳球蛋白)的启动子和增强子有效连接的轻链和/或重链编码序列。可通过公知方法(取决于细胞宿主的类型)将含有目的多核苷酸序列(例如重链和轻链编码序列或其片段以及表达调控序列)的载体转移至宿主细胞中。例如，对于原核细胞常使用氯化钙转染，而对于其它细胞宿主可以使用磷酸钙处理、电穿孔、脂质转染、基因枪法或基于病毒的转染。用于转化哺乳动物细胞的其它方法包括使用聚凝胺、原生质体融合、脂质体、电穿孔和显微注射(一般参见Samtoook等人(前述))。对于产生转基因动物来说，可以将转基因显微注射到已受精的卵母细胞中，或者，将其整合到胚胎干细胞的基因组中，并将这些细胞的细胞核转移至去核的卵母细胞中。所有这些方法通过引用Sambrook等人，MolecularCloningALaboratoryManual(ColdSpringHarborPress,第2版(1989)而并入。当重链和轻链克隆到不同表达载体上时，将所述载体共转染，以使其表达并组装成完整的免疫球蛋白。一经表达，可以依照本领域标准方法对完整抗体、其二聚体、单条轻链和重链或其它免疫球蛋白形式进行纯化，包括通过利用硫酸铵沉淀、亲和柱、柱层析、HPLC纯化、凝胶电脉及其它类似方法,包括由Scopes,ProteinPurification,Springer-Verlag,N.Y.(1982)(通过引用而并入)公开的那些。对于药用而言，使用具有至少9095%或甚至9899%纯度和/或匀质度的基本上纯的免疫球蛋白是理想的。抗因子抗体的片段或截短形式(例如Fab片段、Fab’片段、F(ab’)2片段和Fv片段)以及包含参与趋化因子结合之单条轻链和/或重链CDR的单个抗体链可用于结合或中和一种或更多种CC趋化因子。可以对抗因子抗体进行化学修饰或衍生化，以提供期望作用。可以利用通过肽键与异源蛋白连接的抗因子抗体或其片段制备抗体缀合物或经缀合的抗体。在这些实施方案中，抗体的抗原结合部分与MIP-1a,MIP-1^,RANTES,MCP-1和/或其它相关CC趋化因子结合。抗因子抗体还可以作为效应部分与酶、毒素或细胞因子缀合。其还可以含有辅助部分(例如化学或放射性标签、毒素、生物活性部分或靶向性部分，或者例如通过与聚乙二醇或白蛋白缀合而使其生物半衰期或生物学可利用度增加的其它物质)或进一步与其缀合或共价连接。本发明的抗因子抗体可以含有例如由Carter和Senter,CancerJ.14:154-169(2008)(通过引用而并入)公开的那些辅助部分或与其缀合。本发明的抗体和抗体产物可以固定到固体基质或免疫亲和树脂(例如由AntibodiesALaboratoryManual；E.Harlow和D.Lane编(1988)(通过引用而并入)描述的那些)上。可通过本领域已知的任何聚乙二醇化反应进行本发明之抗体和抗体片段的聚乙二醇化，例如如以下参考文献所描述FocusonGrowthFactors3:4-10(1992)；EP0154316以及EP0401384，每篇均作为整体通过引用并入本文。优选地，通过与反应性聚乙二醇(PEG)分子(或类似的反应性水溶性聚合物)发生酰基化反应或烷基化反应，以实现聚乙二醇化。用于本发明抗体和抗体片段聚乙二醇化的优选水溶性聚合物是PEG。本文中使用的“聚乙二醇”意在包括已用于衍生化其它蛋白质的任何形式的PEG，例如单(Cl-ClO)烷氧基聚乙二醇或芳氧基聚乙二醇。本发明经聚乙二醇化的抗体和抗体片段的制备方法一般地包括如下步骤(a)在使抗体或抗体片段能够与一个或更多个PEG基团结合的条件下，使抗体或抗体片段与PEG(例如PEG的活性酯或醛衍生物)反应，以及(b)获得反应产物。基于已知参数和期望结果选择最佳的反应条件或酰基化反应对于本领域普通技术人员来说显见的。经聚乙二醇化的抗体和抗体片段一般可以用于治疗通过施用本文所述之抗体和抗体片段能够得以缓解或调节的病症。一般地，与未经聚乙二醇化的抗体和抗体片段相比，经聚乙二醇化的抗体和抗体片段半衰期增长。经聚乙二醇化的抗体和抗体片段可以单独使用、一起使用或与其它药物组合物联合使用。在本发明的另一些实施方案中，利用本领域认可的技术使抗体或其抗原结合片段与白蛋白缀合。在本发明的另一实施方案中，对抗体或其片段进行修饰，以减少或消除潜在的糖基化位点。这种经修饰的抗体通常被称为“去糖基化(aglycosylated)”抗体。为了提高抗体或其抗原结合片段的结合亲和力，可以例如通过诱变(例如定点诱变)改变抗体的糖基化位点。“糖基化位点”是指被真核细胞识别为糖残基附着位点的氨基酸残基。碳水化合物(例如寡糖)附着的氨基酸通常有天冬酰胺(N-连接)、丝氨酸(0-连接)和苏氨酸(0-连接)残基。为了鉴定抗体或抗原结合片段内的潜在糖基化位点，例如通过利用公众可获得的数据库对抗体序列进行研究，例如由CenterforBiologicalSequenceAnalysis提供的网站(对于预测N-连接的糖基化位点，参见http://www.cbs.dtu.dk/services/NetNGlyc/,对于预测0-连接的糖基化位点，参见http://www.cbs.dtu.dk/services/NetOGlyc/)。用于改变抗体之糖基化位点的额外方法描述于美国专利No.6，350,861和5，714，350中，其通过引用而并入。在本发明又一实施方案中，可以通过对抗体恒定区进行修饰来改变抗体或其片段，从而相对于未经修饰的抗体而言使由恒定区介导的至少一种生物学效应物功能降低。为了对本发明的抗体进行修饰以使其表现出与Fe受体的结合降低，可以使抗体恒定区区段在与Fe受体(FcR)相互作用所必需的特定区域中发生突变，参见例如Canfield，S.M.和S.L.Morrison,J.Exp.Med.1731483-1491(1991)以及Lund,J.等人，J.Tmmuno1.1472657-266(1991)，所有均通过引用而并入。抗体结合FcR的能力降低还可以使依赖于FcR相互作用的另一些效应物功能(例如调理素作用和吞噬作用以及抗原依赖的细胞毒性)降低。增强或降低抗体效应物功能以及减少或延长血清持久性的恒定区衍生物由Carter，P.J.，Nat.Rev.Immunol.6:343-357(2006)描述，其通过引用而并入。本发明的抗因子抗体可以掺入到例如上面描述的药物组合物中或者掺入到用于储存、保存或向有治疗需要之对象施用抗体的组合物中。用于上述治疗或诊断应用的试剂盒可以包含一种或更多种抗因子抗体、阳性或阴性对照抗体、与抗因子抗体结合的CC趋化因子、不与抗因子抗体结合的对照趋化因子和其它药学或诊断用组分，以及试剂盒使用的书面说明。本发明的抗体或抗原结合片段可以用于例如治疗性目的(通过调节CC趋化因子的活性)、诊断性目的(对CC趋化因子进行检测或定量)以及纯化CC趋化因子。因此，本发明的范围囊括了出于本文所述任何目的的包含本发明抗体的试剂盒。已显示，CC趋化因子(特别是MIP-1a、MIP_1^,RANTES和/或MCP-1)在与炎症相关的病理学情形中发挥作用。还已显示肩1-10、10-10、狀见^5和/或1^-1对于白等人，TrendsImmunol.26:268-274(2005)(通过引用并入本文)描述的那些。MIP-1a、MIP-1^、RANTES和/或MCP-1是对于单核细胞和T淋巴细胞具有强效趋化活性的分子。考虑到它们的活性有重叠以及在人类疾病中所有这4种这些趋化因子的表达均增强，预期与仅仅抑制单一CC趋化因子相比，阻断2、3或4种CC趋化因子分子具有更有益的作用。因此，本发明的抗体和抗体片段可以用于调节这些趋化因子的活性，影响与这些趋化因子相关的疾病之病理。所以，这些抗体和片段可以用于治疗与CC趋化因子分子表达相关之炎性病症和病理情形的治疗性组合物中。在这些实施方案中，例如通过患者表现出所述疾病或功能异常之至少一个指征或症状鉴定患者是否患有待治疗的一种疾病。本发明的至少一种抗体或其抗原结合片段或者包含本发明之至少一种抗体或其抗原结合片段的组合物以足以缓解所述疾病或功能异常之至少一个症状或降低MIP-1a、MIP-1^、RANTES和/或MCP-I中至少一种的活性的量施用。可预防或治疗的病症。本文使用的术语“CC趋化因子活性导致的病症”和“CC趋化因子相关病症”旨在包括这样的疾病或病症在患有该病症的对象中CC趋化因子(包括MIP-1a,MIP-1^,RANTES,MCP-1和其它CC趋化因子)的存在已证明或怀疑是导致该病症发病原因或引起该病症的因素。因此，CC趋化因子活性导致的病症是这样的病症预期抑制CC趋化因子的活性能够预防或减轻该病症的症状和/或进程。这些病症可以例如通过患有该病症之对象的生物学液体中CC趋化因子浓度增加(例如可利用抗RANTES抗体检测出对象的血清、血浆、滑液、尿等中RANTES浓度增加)来证实。CC趋化因子活性导致的病症有诸多实例。以下进一步讨论本发明的抗体和抗体部分在预防或治疗特定病症中的用途。类风湿性关节炎(RA)以白细胞(包括T和B淋巴细胞、巨噬细胞以及中性粒细胞)流入关节的滑膜衬里层(synoviallining)为特征(参见Koch的综述，ArthritisRheum.52:710-721(2005))。发现MIP-1a在RA患者的滑液中水平很高，其水平的增加与疾病的严重程度有相关性。类似地，在啮齿类动物鼠RA模型中，在关节炎关节中发现了高水平的鼠MIP-1a。在胶原诱导的关节炎模型中，中和性抗体使关节炎评分减少约50%(Kasama，等人，J.Clin.Invest.95:2868-2876(1995))。在佐剂诱导的啮齿类动物关节炎模型中，关节中的RANTES水平也增加。在该模型中，RANTES抗体使症状减轻(Barnes等人，J.Clin.Invest.101:2910-2919(1998))。还显示，在RA患者中MCP-I由滑膜细胞和浸润白细胞产生。在关节炎的啮齿类动物模型中，MCP-I的中和性抗体也使临床评分减少(Ogata等人，J.Pathol.182106-114(1997))。多发性硬化(MS)以神经周围的髓鞘破坏以及白细胞流入神经组织为特征。发现在MS患者的脑病变中的趋化因子(包括MIP-1a、RANTES和MCP-1)水平很高(Sorensen等人，J.Clin.Invest.103:807-815(1999))。实验性自身免疫性脑炎(EAE)是与人MS极其相似的疾病模型。如利用中和性抗体所显示地，MIP-1a和MCP-I均参与诱导疾病症状和复发(Kennedy等人，J.Neuroimmunol.92:98-108(1998))。纤维化疾病包括以间质纤维性组织增加为标志的任何病症。已知CC趋化因子与纤维化病症有关。例如，在患有系统性硬化的患者中，MCP-1、MIP-1a和MIP-1P所有均升高，并且这些患者中CC趋化因子的高水平与肺纤维化的发生有关(Hasegawa等人，Clin.Exp.TniMiriciI.117:159_165(1999))。动脉粥样硬化以血管脂质沉积以及巨噬细胞高度浸润为特征。在动脉粥样硬化的鼠模型中，MCP-I敲除小鼠显不巨曬细胞和脂质沉积显著减少(Gu等人，Mol.Cell2275-281(1998))。哮喘患者的肺部具有显著的白细胞浸润以及CC趋化因子水平增加，导致气道高反应性。在哮喘的啮齿类动物模型中，MIP-1a、MCP-I或RANTES的中和性抗体使炎症和/或该疾病典型的气道高反应性降低(Lukacs等人，J.Immunol.158:4398-4404(1997))。上述文献中描述的动物模型可以用于评估抗因子抗体在治疗相关病症、功能异常或疾病中的效力，这些模型及其使用方法通过弓I用上述文献而并入。除了上面提到的疾病之外，还有许多其它病症、功能异常或疾病与一种或更多种趋化因子的活性相关，这些包括但不限于致癌疾病、炎性肠病、特应性皮炎、银屑病、中风、器官移植、C0PD、肾小球性肾炎、狼疮肾炎、硬皮症、肝硬化、阿尔茨海默病、CHF-缺血、冠状动脉再狭窄、糖尿病性肾病/神经病变/视网膜病变、骨关节炎、牙周炎、酵母和病毒感染以及妊娠功能失调。当CC趋化因子在这些病症中发挥作用时，可以施用抗因子抗体，以减轻这些病症的严重程度。这种方法一般地涉及向有此需要的对象(例如动物或人)施用通常在可药用载体中的一定量抗因子抗体。选择抗因子抗体或其截短形式或片段的量以使其能够抑制对象中一种或更多种趋化因子的活性。可以对从对象中取出的生物材料(例如血液、骨髓、器官组织)离体进行类似方法，或者对体外维持的生物材料进行类似方法。抗因子抗体可以用于阻断趋化性。这种方法包括使抗因子抗体与含有抗因子抗体所结合之CC趋化因子的介质或与含有产生这些CC趋化因子之细胞的介质混合或接触。本发明的抗因子抗体可以有用地用于诊断性测定中。这种测定涉及使对CC趋化因子具有已知特异性的抗因子抗体与怀疑含有抗因子抗体所结合之至少一种趋化因子的生物样品接触，以及例如通过测定复合物形成从而确定结合量。抗因子抗体可以以游离或基质结合形式使用。本发明进一步提供了用于检测样品中CC趋化因子的体外免疫测定。本发明的抗体和抗体片段可以用于利用多种公知的免疫学测定对样品中的CC趋化因子进行检测。抗体可以用于例如ELISA、Western印迹、放射性免疫测定、免疫沉淀、免疫亲和层析、组织切片的免疫染色、利用电子显微镜在组织样品中进行免疫金检测等。这些测定以及其它测定的方案是本领域公知的，其在技术人员的能力范围内。利用本发明的抗体和抗体片段的免疫测定可以用于检测样品中CC趋化因子的存在和相对量。样品可以包括但不限于经匀浆的组织或细胞、用于光学和电子显微镜的组织学组织切片、组织或细胞的蛋白提取物、脑脊液、关节液、血液、血浆、血清、粘膜分泌物、精液、阴道液、泪液、唾液、汗液、尿液、粪便等。例如，相对于正常样品来说，存在增加量的CC趋化因子可表明存在疾病状态，指示可以用本发明的治疗剂进行治疗。在一些情况下，CC趋化因子的量相对于正常样品要低，可以用合适的CC趋化因子或模拟CC趋化因子的内部镜像抗体进行处理，以刺激免疫功能。在一些实施方案中，可以利用免疫测定来辅助纯化CC趋化因子。例如，可以利用免疫亲和树脂，其中本发明的抗体或抗体片段被固定在基质上。将含有CC趋化因子的样品加入到免疫亲和树脂中，抗体结合到树脂上，而样品中的其它组分保留于溶液中。清洗树月旨，并随后将CC趋化因子从树脂上洗脱，实现基本的纯化并分离。优选地，用于免疫测定中的抗体将具有如本文中定义的高结合亲和力。实施例本发明通过以下实施例进一步阐述，所述实施例不应被理解为是限制性的。本申请中引用的所有参考文献、专利和已公开专利申请的内容以及附图和序列表通过引用并入本文。实施例I-产牛抗因子抗体之杂交瘤的产牛用3种CC趋化因子以随机次序对小鼠进行序贯免疫，所述3种趋化因子选自初始包括MIP-1a、RANTES和MCP-1(P^roTech)的组。对于产生MAb3C12F的杂交瘤融合物3，用MIP-1a对小鼠进行初次免疫，随后用RANTES、接着用MCP-1、然后再次用MCP-I进行加强免疫。对于产生MAb7012八和7016的杂交瘤融合物7，用祖-10对小鼠进行初次免疫，随后用MCP-1、接着用RANTES、然后用MIP-1a和RANTES的组合进行加强免疫。对于产生MAb18V4F和18P7E的杂交瘤融合物18，用MIP-1^对小鼠进行初次免疫，随后用MIP-1a、接着用RANTES进行加强免疫，然后再次用RANTES进行加强免疫。对于每次免疫,使用10iig蛋白，依照标准的免疫方案(参见CurrentProtocolsinImmunology,JEColigan等人编(2006),第2.I节)进行。初次免疫在完全弗氏佐剂中进行，随后用不完全弗氏佐剂中的2种不同趋化因子以3周的间隔时间进行加强。末次加强后10天，收集血清并通过ELISA测试其与CC趋化因子MIP-1a,RANTES,MCP-1和MIP-13的反应性，如CurrentProtocolsinImmunology,2006,JEColigan等人编，第2.4节所描述，其通过引用而并入。对于MIP-1a，将趋化因子包被到96孔ELISA板上(以IUg/mL)，并以I:50至I:6400的稀释范围与血清孵育。对于RANTES、MCP_1和MIP-1^，将生物素化的趋化因子(0.5iig/mL)加入到链霉亲和素包被的板(Pierce)上，接着与稀释后的血清孵育。利用HRP缀合的抗小鼠Fe第二抗体检测与所包被趋化因子结合的抗体。用于ELISA测定之趋化因子的生物素化使用磺基-NHS-LC-生物素(Pierce)进行。将PBS中的趋化因子与约2倍摩尔过量的磺基-NHS-LC-生物素混合，并于室温孵育30分钟。利用截断值(cutoff)为3，500MW的Slide-a-lyzer微型透析组件(Pierce)通过在PBS中透析过夜，从而将游离的生物素试剂去除。对来自利用MIP-1a、RANTES和MCP-I进行初始免疫组之血清的ELISA结果显示多种应答(参见表I)，包括对MIP-1^的一定应答(尽管其未用作直接免疫原)。几只小鼠对3种甚至4种趋化因子产生应答。这些是寻找与多种趋化因子反应之单个抗体的融合杂交瘤候选物。如下表I所示，经免疫的小鼠产生与多种CC趋化因子反应的多克隆血清。表I.经免疫小鼠的血清反应性I权利要求1.分离的抗体或其抗原结合片段，其与至少3种不同的CC趋化因子结合，其中至少一种CC趋化因子是CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-1β或CCL5/RANTES。2.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与至少4种不同的CC趋化因子结口ο3.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其不与MCP-l、MCP-2或MCP-3结合。4.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1α、CCL4/MIP-1β、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1的至少3种不同的CC趋化因子结合。5.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1α、CCL4/MIP-1β、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1的至少一个决定簇结合，其中所述决定簇位于所述CC趋化因子的CC残基与所述趋化因子的最后一个C残基之间。6.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL2/MCP-1、CCL3/MIP-1α、CCL4/MIP-1β、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1、CCL15/HCC-2、CCL18/PARC和CCL23/MPIF-1的至少一个决定簇结合，其中所述决定簇位于所述CC趋化因子的N环、30’s环或40’s环中。7.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CC趋化因子之CC受体结合残基内的至少一个决定簇结合。8.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其中和其所结合之CC趋化因子的趋化活性。9.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其由杂交瘤细胞系3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系3C12F、7D1G、7D12A、18V4F或18P7E产生之抗体的结合。10.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-鼠抗体，或其抗原结合片段。11.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL3/MIP-1α、CCL4/MIP-Iβ、CCL5/RANTES、CCL15/HCC-2和CCL23/MPIF-1的至少5种CC趋化因子结合，并且其基本上不与CCL2/MCP-1结合。12.权利要求11的分离的抗体或其抗原结合片段，其与所述CC趋化因子中至少一种的N环、30’s环或40’s环中的决定簇结合。13.权利要求11的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL3/MIP-1α的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；其与CCL4/MIP-1β的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；其与CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。14.权利要求11的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含MAb3C12F的至少一个⑶R，所述CDR选自SEQIDNO:3、4、5、8、9、10、53、54、55、58、59和60。15.权利要求11的分离的抗体或其抗原结合片段，其由产生MAb3C12F的杂交瘤细胞系或其继代培养物产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系3C12F产生之抗体的结合。16.权利要求11的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-鼠抗体，或其抗原结合片段。17.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL3/MIP-la、CCL4/MIP-Iβ、CCL5/RANTES、CCL14/HCC-1和CCL18/PARC的至少4种CC趋化因子结合，并且其基本上不与CCL2/MCP-1结合。18.权利要求17的分离的抗体或其抗原结合片段，其与所述CC趋化因子中至少一种的N环、30’s环或40’s环中的决定簇结合。19.权利要求17的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL3/MIP-1α的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EffVQKYVSDLE)内；其与CCL4/MIP-1β的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；其与CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。20.权利要求17的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含MAb7D1G的至少一个⑶R，所述CDR选自SEQIDNO:23、24、25、28、29或30。21.权利要求17的分离的抗体或其抗原结合片段，其由产生MAb7DlG的杂交瘤细胞系或其继代培养物产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系7D1G产生之抗体的结合。22.权利要求17的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-小鼠抗体，或其抗原结合片段。23.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL3/MIP-la、CCL4/MIP-Iβ、CCL5/RANTES和CCL23/MPIF-1的至少4种CC趋化因子结合，并且其基本上不与CCL2/MCP-1结合。24.权利要求23的分离的抗体或其抗原结合片段，其与所述CC趋化因子中至少一种的N环、30’s环或40’s环中的决定簇结合。25.权利要求23的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL3/MIP-1α的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EWVQKYVSDLE)内；其与CCL4/MIP-1β的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；其与CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。26.权利要求23的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含MAB7D12A的至少一个⑶R，所述CDR选自SEQIDNO:13、14、15、18、19或20。27.权利要求23的分离的抗体或其抗原结合片段，其由产生MAb7D12A的杂交瘤细胞系或其继代培养物产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系7D12A产生之抗体的结合。28.权利要求23的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-小鼠抗体，或其抗原结合片段。29.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL3/MIP-la、CCL4/MIP-Iβ和CCL5/RANTES的3种CC趋化因子结合，并且其基本上不与CCL2/MCP-1结合。30.权利要求29的分离的抗体或其抗原结合片段，其与所述CC趋化因子中至少一种的N环、30’s环或40’s环中的决定簇结合。31.权利要求29的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL3/MIP-1α的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EffVQKYVSDLE)内；其与CCL4/MIP-1β的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；其与CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。32.权利要求29的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含MAbl8V4F的至少一个⑶R，所述CDR选自SEQIDNO:33、34、35、38、39、40、63、64、65、68、69和70。33.权利要求29的分离的抗体或其抗原结合片段，其由产生MAbl8V4F的杂交瘤细胞系或其继代培养物产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系18V4F产生之抗体的结合。34.权利要求29的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-鼠抗体，或其抗原结合片段。35.权利要求I的分离的抗体或其抗原结合片段，其与选自CCL3/MIP-1a、CCL4/MIP-Iβ和CCL5/RANTES的至少3种CC趋化因子结合，并且其基本上不与CCL2/MCP-1结八口ο36.权利要求35的分离的抗体或其抗原结合片段，其与所述CC趋化因子中至少一种的N环、30’s环或40’s环中的决定簇结合。37.权利要求35的分离的抗体或其抗原结合片段，其与CCL3/MIP-1α的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:71的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(SRQIPQNF)、残基34-35(QC)或残基57-67(EffVQKYVSDLE)内；其与CCL4/MIP-1β的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:72的残基11-15(CCFSY)、残基17-24(ARKLPHNF)、残基34-35(LC)或残基57-67(SffVQEYVYDLE)内；其与CCL5/RANTES的至少一个抗原决定簇结合，所述决定簇位于SEQIDNO:73的残基10-14(CCFAY)、残基16-23(ARPLPRAH)、残基33-34(KC)或残基56-66(KffVREYINSLE)内。38.权利要求35的分离的抗体或其抗原结合片段，其包含MAbl8P7E的至少一个⑶R，所述CDR选自SEQIDNO:43、44、45、48、49和50。39.权利要求35的分离的抗体或其抗原结合片段，其由产生MAbl8P7E的杂交瘤细胞系或其继代培养物产生，或者其竞争性阻断由杂交瘤细胞系18P7E产生之抗体的结合。40.权利要求35的分离的抗体或其抗原结合片段，其是人抗体、人源化抗体，或嵌合的人-鼠抗体，或其抗原结合片段。41.产生权利要求I之单克隆抗体的杂交瘤细胞系。42.包含权利要求I之抗体或其抗原结合片段以及载体、赋形剂或缓冲剂的组合物。43.制备产生与两种或更多种CC趋化因子结合之抗因子抗体的杂交瘤细胞系的方法，其包括用一种CC趋化因子对哺乳动物进行序贯免疫，随后用一种或更多种不同的CC趋化因子加强免疫，从所述哺乳动物产生杂交瘤细胞系，以及分离产生抗因子抗体的杂交瘤细胞系。44.治疗由一种或更多种CC趋化因子介导之疾病、功能异常或病症的方法，其包括向有此需要的对象施用权利要求I的抗因子抗体或其抗原结合片段。45.权利要求44的方法，其中所述疾病、功能异常或病症是炎性疾病或由炎症介导或与其相关的疾病。46.权利要求44的方法，其中所述疾病、功能异常或病症是自身免疫病。全文摘要抗因子抗体(antikineantibody)与2、3、4、5种或更多种CC趋化因子(例如RANTES/CCL5、MIP-1α/CCL3、MIP-1β/CCL4或MCP-1/CCL2)结合。还公开了抗因子抗体的亲和力成熟和人源化方法，以及通过序贯免疫得到产生抗因子抗体之杂交瘤细胞系的方法。文档编号C12P21/08GK102782148SQ201080048961公开日2012年11月14日申请日期2010年8月27日优先权日2009年8月28日发明者丹·阿莉森,卡罗尔·拉波特申请人:Vlst公司