专利名称：与己糖转运相关的蛋白及其编码基因与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种与己糖转运相关的蛋白及其编码基因与应用。
背景技术：
近几年来，我国蔬菜产业飞速发展，据农业部统计，2005年全国蔬菜播种面积1772. 07万公顷，总产量达56451. 49万吨，人均占有量432kg。另据联合国粮农组织(FAO)统计，2005年我国蔬菜播种面积及产量均居世界第一位，其中蔬菜播种面积占世界的43%，总产量占世界的49%。目前，我国蔬菜播种面积占世界蔬菜播种总面积的三分之一以上，产量占世界总产量的50%左右，是当今世界上蔬菜播种面积最大、产出量最多的国家。蔬菜产业的发展，不仅改善了人们的生活水平，而且促进了加工工业的发展，大力提高了出口创汇，在农业结构战略性调整中，已成为农业和农村经济新的增长点和支柱产业。黄瓜是世界各国普遍栽培的重要蔬菜之一，也是我国五大蔬菜作物之一，我国的黄瓜栽培面积约为110万公顷。与大多数高等植物相同，黄瓜的光合作用主要发生在成熟的叶片、果实和茎等绿色组织中，我们称之为“源”。而对于根和花等不具有光合能力的非绿色组织，我们称之为“库”。植株生长发育所需的碳水化合物从源器官合成后以一定的形式通过韧皮部运输到各个库器官中贮存或吸收利用。由于单糖在运输过程中常会引起细胞渗透压发生变化且还易被调节细胞代谢活性的酶所水解，故长距离运输途径中的碳水化合物都是以多糖的形式存在。到达库器官后，少部分的二糖或多糖可以被库器官直接吸收利用，但是大多数多糖还是被水解为单糖后才被植物所吸收。在库器官中，部分单糖直接通过共质体被吸收，还有一部分单糖则是在单糖转运蛋白的协助下通过质外体被吸收。尽管目前对黄瓜的生理生化特性以及各种逆境条件下的相关指标的变化均作了广泛的研究，但还没有发现对于黄瓜的单糖转运蛋白相关基因的克隆及功能的研究，研究黄瓜中单糖转运蛋白基因的功能和定位有助于弄清黄瓜糖代谢的机理
发明内容
本发明的目的是提供一种与己糖转运相关的蛋白及其编码基因。本发明所提供的与己糖转运相关的蛋白，名称为CsHTl (Hexose Transporter),来源于葫芦科、甜瓜属、黄瓜(Cucumis sativus L.)品种国农25号，是如下I)或2)的蛋白质I)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加，且与己糖转运相关的由I)衍生的蛋白质。序列表中的序列2由518个氨基酸残基组成，为了使上述I)中的CsHTl便于纯化，可在由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质的氨基末端或羧基末端连接上如表I所示的标签。表I标签的序列
权利要求
1.蛋白质，为下述I)或2):1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加，且与己糖转运相关的由I)衍生的蛋白质。
2.编码权利要求1所述蛋白的基因。
3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于所述基因的序列为如下1)-3)中任一种1)序列表中的序列I;2)在严格条件下与序列表中序列I限定的DNA序列杂交的核苷酸序列，且该核苷酸序列所示DNA分子编码权利要求1所述蛋白；3)与I)或2)限定的基因序列具有90%以上同源性的核苷酸序列，且该核苷酸序列编码权利要求1所述蛋白；所述3)中的基因，与I)或2)限定的基因最好有95%以上的同源性。
4.含有权利要求2或3所述基因的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.根据权利要求4所述的重组表达载体或重组菌，其特征在于所述重组表达载体为在PDR196的多克隆位点间插入权利要求2或3所述基因得到的重组表达载体；所述重组菌为携带有权利要求2或3所述基因的酵母。
6.权利要求1所述的蛋白，或权利要求2或3所述的基因，或权利要求4所述的重组表达载体或表达盒在提闻微生物对己糖吸收中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述微生物为酵母；所述己糖为葡萄糖。
8.培育具有高己糖吸收性能的微生物的方法，所述方法包括如下步骤将权利要求4 或5所述的重组表达载体转化目的微生物，得到己糖吸收性能高于所述目的微生物的重组微生物。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于所述微生物为酵母；所述己糖为葡萄糖。
10.扩增权利要求2或3所述基因的全长或任一片段的引物。
全文摘要
本发明公开了一种与己糖转运相关的蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的蛋白为下述1)或2)1)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2)将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代、缺失或添加，且与己糖转运相关的由1)衍生的蛋白质。实验证明本发明所提供的CsHT1蛋白能够使己糖运输缺陷的酵母突变体恢复葡萄糖的吸收功能，这证实了黄瓜己糖载体蛋白CsHT1具有葡萄糖转运的功能。这些结果说明与己糖转运相关蛋白CsHT1及其编码基因可用于调控黄瓜体内的糖代谢、提高黄瓜品质，可广泛用于植物体内糖代谢的研究。
文档编号C12N1/19GK103044533SQ201110307028
公开日2013年4月17日 申请日期2011年10月11日 优先权日2011年10月11日
发明者眭晓蕾, 成金桃, 王振雨, 张振贤 申请人:中国农业大学