专利名称：一种微生物转化制备(s)-环氧氯丙烷的方法及菌株的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种微生物转化制备(S)-环氧氯丙烷的方法，以及该方法中所用的菌株。背景技术：
手性环氧氯丙烷是一种重要的有机合成关键中间体，用以制备多种高光学纯度药物中间体，如芳氧丙醇胺类药物、环戊酮的衍生物、抗真菌药(S)-霉康灵、阿伐他汀、L-肉碱等。
手性环氧氯丙烷的制备方法有化学法和生物法。传统的化学合成法生产手性环氧氯丙烷因其反应剧烈、耗能大、设备贵、对映体过量值(e. e值)和得率低等缺点已基本被舍弃；新型化学合成法虽然在e. e值和得率上都取得重大成就，但仍然面临污染大，设备贵等缺点。
生物催化转化合成手性环氧氯丙烷选择性较好，且环境友好，其途径主要有(1) 单加氧酶催化的烯烃直接不对称环化；( 卤醇脱卤酶催化的邻氯醇脱卤反应；C3)亲核试剂介导，卤醇脱卤酶催化的外消旋环氧氯丙烷的非水解型动力学拆分；(4)环氧化物水解酶催化的外消旋环氧氯丙烷的水解型动力学拆分。
发明内容
本发明目的是提供一种微生物转化制备(S)-环氧氯丙烷的方法，该方法微生物催化选择性好，副产物利用率高且环境友好。
本发明采用的技术方案是
—种微生物转化制备(S)-环氧氯丙烷的方法，所述方法包括以外消旋环氧氯丙烷为底物，以黑曲霉CCTCC NO =M 2010275发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，在有机溶剂中进行选择性催化反应，反应结束后，反应液经常规分离纯化获得所述(S)-环氧氯丙烷；所述的有机溶剂为下列之一环己烷、正己烷或庚烷。
所述选择性催化反应优选在20 40°C、pH5 9的条件下进行，反应时间10 20h。
优选的，在有机溶剂中，所述外消旋环氧氯丙烷初始浓度为2 20g/L，所述含酶菌体细胞添加量以菌体干重计为0. 5 5g/L。
所述含酶菌体细胞可直接以湿菌体或发酵液形式作为催化剂参与反应，也可经固定化之后参与反应；优选的，所述含酶菌体细胞经固定化后作为生物催化剂。
优选的，所述含酶菌体细胞经固定化后参与反应时，所述固定化的方法如下将经黑曲霉CCTCC NO =M 2010275发酵培养获得的湿菌体与无菌水按质量比1 10 20混合， 获得菌悬液；将菌悬液以体积比1 1 3加入质量分数3 6%的海藻酸钠水溶液中，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液逐滴滴入质量分数0. 5 1. 5%氯化钙水溶液中，得到的固定化悬浮液，20 30°C固化5 15h，获得含有含酶菌体细胞的固定化细胞颗粒，经过滤、淋洗后作为生物催化剂。
优选的，所述分离纯化方法如下将应液在45 95°C下减压蒸馏，收集45 55°C 馏分即为产物(S)-环氧氯丙烷，收集85 95°C馏分为副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇。
所述副产物可经后处理循环使用，所述后处理方法如下将(R)-3_氯-1，2-丙二醇与有机酸溶液按摩尔比1 0. 1 0. 5混合，通入干燥的氯化氢气体，在100 130°C下卤化反应10 20h，得到(R，S)-1,3- 二氯-2-丙醇和(R，S) -2，3- 二氯丙醇混合物，将混合物与PH 8. 0 10. 0的碱溶液按摩尔比0. 5 0. 8 1混合，在55 75°C下反应5 20分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，回收用于循环制备(S)-环氧氯丙烷；所述有机酸溶液为下列之一醋酸、乳酸、甲苯磺酸或草酸；所述碱溶液为下列之一氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液。
述的固定化细胞颗粒直径为0.5 2mm。
具体的，所述的(S)-环氧氯丙烷的制备方法推荐按照以下步骤进行
(1)斜面培养将黑曲霉菌株ZJB-09173接种至斜面培养基，25 35°C下培养 5 10d，获得菌体斜面；所述的斜面培养基的终浓度组成为马铃薯100 300g/L、葡萄糖 10 30g/L、琼脂15 25g/L，溶剂为水，用lmol/L的HCl溶液或lmol/L NaOH溶液调节 pH至5. 0 7. 0 ；121°C灭菌20min，冷却制斜面；
(2)种子培养从步骤(1)获得的菌体斜面取一接种环菌体接入种子培养基，25 350C，120 250r/min摇床培养18 45h，获得种子液；所述的种子培养基的终浓度组成为葡萄糖10 30g/L、酵母提取粉10 30g/L、蛋白胨5 20g/L、KH2PO4 0. 2 1. 2g/ L、K2HPO4 0. 4 1. 2g/L、MgSO4 · 7H200. 2 1. Og/L，溶剂为水，用 1. Omol/L 的 HCl 溶液或 1. Omol/L NaOH 溶液将 pH 调至 5. 0 7. 0 ；121°C 灭菌 20min ；
(3)发酵培养将步骤( 获得的种子液以1 15% (ν/ν)的接种量接种至发酵培养基，25 35°C，100 300r/min摇床培养72 120h，获得发酵液；所述的发酵培养基终浓度组成为淀粉2 20g/L、豆饼粉0. 5 15g/L、KH2PO4 0. 2 1. 2g/L、K2HPO4 0. 4 1. 2g/L、MgSO4 · 7Η20 0· 2 1. Og/L，溶剂为水，用 1. 0mol/L 的 HCl 溶液或 1. 0mol/L NaOH 溶液将PH调至5. 0 7. 0 ；
(4)细胞固定化将步骤(3)获得的发酵液3000 IOOOOrpm离心5 20min，弃去上清液，收集菌体，将菌体与无菌水按质量比1 10 20混合，制成菌悬液，将菌悬液以体积比1 1 3与质量浓度3 6%海藻酸钠水溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液5mLz注射器针头逐滴滴入质量分数0.5 1.5%氯化钙水溶液中， 得到的固定化悬浮液，20 30°C固化5 15h，获得含有菌体的固定化细胞颗粒，所述固定化细胞颗粒用无菌纱布过滤，再用无菌水淋洗，获得的固定化细胞颗粒作为生物催化剂；
(5)生物催化用无菌量筒量取步骤(4)制备的固定化细胞颗粒1 1. 8L，装入固定床生物反应器，制成固定化细胞颗粒床层，在20 40°C、pH5 9条件下，将浓度5 15g/L的(R，幻-环氧氯丙烷的有机溶剂溶液以5 15mL/min的流速流经固定化细胞颗粒床层，循环反应10 20h，获得反应液；所述的固定床生物反应器容积为2. 0L，高径比为 5:1;
(6)分离纯化将步骤(5)获得的反应液45 95°C减压蒸馏，收集45 55°C馏分即为产物(S)-环氧氯丙烷，收集85 95°C馏分为副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇；
(7)副产物回收利用将步骤(6)所获得的副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇与有机酸按摩尔比1 0.1 0.5混合，通入干燥氯化氢气体，在100 130°C下卤化反应10 20h，获得(R，S)-1，3-二氯-2-丙醇和(R，S)-2，3-二氯丙醇混合物；将混合物与碱溶液按摩尔比0.5 0.8 1混合，在55 75°C下反应5 20分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷， 用于步骤( 生物催化制备(S)-环氧氯丙烷；所述副产物回收制备的(R，幻-环氧氯丙烷与固定化细胞颗粒床层的质量比为3 10 1。
在拆分消旋环氧氯丙烷生产手性环氧氯丙烷的时，会产生等摩尔的副产物 3-氯-1，2-二丙醇。本发明采用生物催化反应与产物分离相互耦合技术，实现连续化生产手性环氧氯丙烷。具有得率高、生产效率高、连续化生产、副产物回收利用等特点，可适合于工业化大规模生产。
本发明还涉及一株反应过程中用到的新菌株——黑曲霉(Aspergillus niger) ZJB09173，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号=CCTCC NO =M 2010275，保藏日期:2010 年 10 月 24 日。
本发明所述的黑曲霉(Aspergillus niger)ZJB-09173菌落特征为菌落的颜色由浅黄色逐渐变深黄色，在中间深黄色菌圈中可看到棕色孢子，整个菌落不透明，边缘粗糙但较整齐，表面较干燥。显微镜(10X40)观察，菌丝发达，从气生菌丝分化出的分生孢子梗由特化的足细胞长出，顶端膨大成球形，表面着生两层分生孢子小梗，次生小梗上着生成串的分生孢子，分生孢子头球形。
本发明所述的黑曲霉菌株(Aspergillus niger)ZJB-09173菌株来源土壤。
本发明产物( -环氧氯丙烷可用气相色谱(HP-5极性色谱柱)检测纯度。
本发明产物(S)-环氧氯丙烷对映体过剩值(ee.)用手性气相色谱(手性毛细管柱BGB-175)测定。
与现有技术相比，本发明的有益效果主要体现在1)步骤简单，污染低，环境友好；2)固定化细胞颗粒作为生物催化剂具有高度的对映体选择性，保证了(S)-环氧氯丙烷的高光学纯度；幻副产物的循环拆分和生物催化剂的循环使用，大大降低了原料成本和生产成本。
图1为本发明工艺路线示意图。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此
实施例1
(1)斜面培养培养基马铃薯200g/L、葡萄糖20g/L、琼脂20g/L，用1. Omol/L的 HCl或1. Omol/L NaOH溶液将pH调到7. 0。121°C灭菌20min后，冷却制斜面，将保藏在4°C 冰箱中的黑曲霉CCTCC NO =M 2010275菌株接种至斜面培养基中，在30°C下培养至长出单菌落，获得菌体斜面；
(2)种子培养培养基葡萄糖20g/L、酵母提取粉15g/L、蛋白胨15g/L、NaH2PCM · 2H20 1. Og/L,用 1. Omol/L 的 HCl 或 1. Omol/L NaOH 溶液将 pH 调到 7. O。装液量为250mL三角瓶装液50mL。121°C灭菌20分钟，灭菌后冷却接步骤(1)获得的斜面种子， 180r/min摇床，30°C培养M小时，作为种子液；
(3)发酵培养培养基淀粉 10g/L、豆饼粉 10g/L、KH2P04 1. Og/L,K2HPO4 0. 8g/L、 MgSO4 · 7H20 0. 4g/L,用 1. Omol/L 的 HCl 或 1. Omol/L NaOH 溶液将 pH 调到 7. 0。装液量为 250mL三角瓶装液100mL。121°C灭菌20分钟，灭菌后冷却接(ν/ν)步骤⑵获得的种子液，180r/min摇床，30°C培养96小时，作为发酵酶液。
(4)细胞固定化将步骤(3)获得的发酵液SOOOrpm离心lOmin，弃去上清液收集菌体，将湿菌体与水按质量比1 10混合，配成菌悬液，将菌悬液以体积比1 1与3%( / w)海藻酸钠溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液用0. 2mm注射器针头逐滴滴入0. 5% CaCl2水溶液中，25°C固化10小时，用无菌纱布进行过滤，再用50mL 无菌水淋洗，获得固定化化细胞颗粒；
(5)生物催化用无菌量筒量取步骤(4)制备的固定化细胞颗粒约1. 0L，装入无菌的固定床生物反应器(S212-S-1L，上海鸿经生物仪器制造有限公司)，组成固定化细胞颗粒床层，该反应器的总容积为2. 0L，高径比为5 1，在30°C和pH 7. 0条件下，将10g/L (R， S)-环氧氯丙烷的环己烷溶液以lOmL/min流速流经固定化细胞颗粒床层，固定化细胞颗粒与(R，S)-环氧氯丙烷的体积比为1 3，循环反应12h，获得反应液；
(6)分离纯化将步骤( 获得的反应液，50°C和90°C温度下减压蒸馏，分别获得产物(S)-环氧氯丙烷和副产物(R) -3-氯-1，2-丙二醇；
(7)副产物回收利用将步骤(6)分离的副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇溶于30ml 冰醋酸，5mL/min流速通入干燥的氯化氢气体，110°C下卤化反应15h，得到消旋的1，3_ 二氯-2-丙醇和2，3- 二氯丙醇混合物；将混合物与NaOH溶液按摩尔比0. 6 1混合，在65°C 下反应15分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，用于步骤(5)开始的循环拆分制备(S)-环氧氯丙烷；
连续进行3个循环，共进行5批次固定化细胞生物催化反应生产(S)-环氧氯丙烷，合并各批次的(S)-环氧氯丙烷馏分，干燥，得到71g(S)_环氧氯丙烷，其ee. >99%，产率为47%。
实施例2:
(1)黑曲霉(Aspergillus niger)CCTCC NO :M 2010275 按实施例 1 方法产酶培养和离心收集菌体后，将湿菌体与水按质量比1 10混合，配成菌悬液，将菌悬液以体积比 1 2与3%海藻酸钠溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液用 0. 5mm注射器针头逐滴滴入0. 5% CaCl2水溶液中，30°C固化10小时，用无菌纱布进行过滤， 再用50mL无菌水淋洗，获得固定化化细胞颗粒；
(2)生物催化用无菌量筒量取制备的固定化细胞颗粒约1. 5L，装入无菌的固定床生物反应器(S212-S-1L，上海鸿经生物仪器制造有限公司)，组成固定化细胞颗粒床层， 该反应器的总容积为2. 0L，高径比为5 1，在30°C和pH 7. 0条件下，将10g/L(R，S)-环氧氯丙烷的环己烷溶液以lOmL/min流速流经固定化细胞颗粒床层，固定化细胞颗粒与(R， S)-环氧氯丙烷的体积比为1 3，循环反应12h，获得反应液；
(3)分离纯化将获得的反应液，50°C和90°C温度下减压蒸馏，分别获得产物(S)-环氧氯丙烷和副产物(R) -3-氯-1，2-丙二醇；
(4)副产物回收利用将分离的副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇溶于30ml冰醋酸， 5mL/min流速通入干燥的氯化氢气体，120°C下卤化反应15h，得到消旋的1，3_ 二氯-2-丙醇和2，3- 二氯丙醇混合物；将混合物与NaOH溶液按摩尔比0. 6 1混合，在65°C下反应 15分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，用于步骤O)开始的循环拆分制备(S)-环氧氯丙烷；
连续进行6个循环，共进行5批次固定化细胞生物催化反应生产(S)-环氧氯丙烷。合并各批次的(S)-环氧氯丙烷馏分，按实施例1进行，得到146g(S)-环氧氯丙烷，其 ee. > 99%，产率为 65%。
实施例3
(1)黑曲霉(Aspergillus niger)CCTCC NO :M 2010275 按实施例 1 方法产酶培养和离心收集菌体后，将湿菌体与水按质量比1 15混合，配成菌悬液，将菌悬液以体积比 1 2与5%海藻酸钠溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液用 0. 5mm注射器针头逐滴滴入1 % CaCl2水溶液中，30°C固化15小时，用无菌纱布进行过滤， 再用50mL无菌水淋洗，获得固定化化细胞颗粒；
(2)生物催化用无菌量筒量取制备的固定化细胞颗粒约1. 5L，装入无菌的固定床生物反应器(S212-S-1L，上海鸿经生物仪器制造有限公司)，组成固定化细胞颗粒床层，该反应器的总容积为2. 0L，高径比为5 1，在30°C和pH 7. 0条件下，将5g/L (R，S)-环氧氯丙烷的环己烷溶液以5mL/min流速流经固定化细胞颗粒床层，固定化细胞颗粒与(R， S)-环氧氯丙烷的体积比为1 3，循环反应15h，获得反应液；
(3)分离纯化将获得的反应液，50°C和90°C温度下减压蒸馏，分别获得产物 (S)-环氧氯丙烷和副产物(R) -3-氯-1，2-丙二醇；
(4)副产物回收利用将分离的副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇溶于30ml冰醋酸， 5mL/min流速通入干燥的氯化氢气体，120°C下卤化反应15h，得到消旋的1，3_ 二氯-2-丙醇和2，3- 二氯丙醇混合物；将混合物与NaOH溶液按摩尔比0. 6 1混合，在65°C下反应 15分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，用于步骤O)开始的循环拆分制备(S)-环氧氯丙烷；
这样连续进行9个循环，共进行5批次固定化细胞生物催化反应生产( -环氧氯丙烷。合并各批次的(S)-环氧氯丙烷馏分，按实施例1进行，得到96g(S)-环氧氯丙烷，其 ee. > 99%，产率为 86%。
实施例4
(1)黑曲霉(Aspergillus niger)CCTCC NO :M 2010275 按实施例 1 方法产酶培养和离心收集菌体后，将湿菌体与水按质量比1 20混合，配成菌悬液，将菌悬液以体积比 1 3与6%海藻酸钠溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液用 0. 5mm注射器针头逐滴滴入1 % CaCl2水溶液中，30°C固化15小时，用无菌纱布进行过滤， 再用50mL无菌水淋洗，获得固定化化细胞颗粒；
(2)生物催化用无菌量筒量取制备的固定化细胞颗粒约1. 8L，装入无菌的固定床生物反应器(S212-S-1L，上海鸿经生物仪器制造有限公司)，组成固定化细胞颗粒床层， 该反应器的总容积为2. 0L，高径比为5 1，在30°C和pH 7. 0条件下，将10g/L(R，S)-环氧氯丙烷的环己烷溶液以5mL/min流速流经固定化细胞颗粒床层，固定化细胞颗粒与(R， S)-环氧氯丙烷的体积比为1 5，循环反应15h，获得反应液；
(3)分离纯化将获得的反应液，50°C和90°C温度下减压蒸馏，分别获得产物 (S)-环氧氯丙烷和副产物(R) -3-氯-1，2-丙二醇；
(4)副产物回收利用将分离的副产物00-3-氯-1，2-丙二醇溶于60ml冰醋酸， 5mL/min流速通入干燥的氯化氢气体，120°C下卤化反应20h，得到消旋的1，3_ 二氯-2-丙醇和2，3- 二氯丙醇混合物；将混合物与NaOH溶液按摩尔比0. 6 1混合，在65°C下反应 15分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，用于步骤O)开始的循环拆分制备(S)-环氧氯丙烷；
连续进行5个循环，共进行5批次固定化细胞生物催化反应生产(S)-环氧氯丙烷。合并各批次的(S)-环氧氯丙烷馏分，按实施例1进行，得到312g(S)-环氧氯丙烷，其 ee. > 99%，产率为 69%。
实施例5
(1)黑曲霉(Aspergillus niger)CCTCC NO :M 2010275 按实施例 1 方法产酶培养和离心收集菌体后，将湿菌体与水按质量比1 15混合，配成菌悬液，将菌悬液以体积比 1 2与5%海藻酸钠溶液混合，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液用 0. 5mm注射器针头逐滴滴入1 % CaCl2水溶液中，30°C固化15小时，用无菌纱布进行过滤， 再用50mL无菌水淋洗，获得固定化化细胞颗粒；
(2)生物催化用无菌量筒量取制备的固定化细胞颗粒约1.8L，装入无菌的固定床生物反应器(S212-S-1L，上海鸿经生物仪器制造有限公司)，组成固定化细胞颗粒床层， 该反应器的总容积为2. 0L，高径比为5 1，在30°C和pH 7. 0条件下，将15g/L(R，S)-环氧氯丙烷的环己烷溶液以15mL/min流速流经固定化细胞颗粒床层，固定化细胞颗粒与(R， S)-环氧氯丙烷的体积比为1 5，循环反应15h，获得反应液；
(3)分离纯化将获得的反应液，50°C和90°C温度下减压蒸馏，分别获得产物 (S)-环氧氯丙烷和副产物(R) -3-氯-1，2-丙二醇；
(4)副产物回收利用将分离的副产物(R)-3-氯-1，2-丙二醇溶于30ml冰醋酸， 5mL/min流速通入干燥的氯化氢气体，120°C下卤化反应15h，得到消旋的1，3_ 二氯-2-丙醇和2，3- 二氯丙醇混合物；将混合物与NaOH溶液按摩尔比0. 6 1混合，在65°C下反应 15分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，用于步骤O)开始的循环拆分制备(S)-环氧氯丙烷；
连续进行9个循环，共进行5批次固定化细胞生物催化反应生产(S)-环氧氯丙烷。合并各批次的(S)-环氧氯丙烷馏分，按实施例1进行，得到351. 2g(S)_环氧氯丙烷， 其ee. >90%，产率为52%。
权利要求
1.一种微生物转化制备(S)-环氧氯丙烷的方法，所述方法包括以外消旋环氧氯丙烷为底物，以黑曲霉CCTCC NO =M 2010275发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，在有机溶剂中进行选择性催化反应，反应结束后，反应液经分离纯化获得所述(S)-环氧氯丙烷；所述的有机溶剂为下列之一环己烷、正己烷或庚烷。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述选择性催化反应在20 40°C、pH5 9的条件下进行，反应时间10 20h。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述外消旋环氧氯丙烷初始浓度为2 20g/L，所述含酶菌体细胞添加量以菌体干重计为0. 5 5g/L。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述含酶菌体细胞经固定化后作为生物催化剂。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于所述固定化的方法如下将经黑曲霉CCTCC NO =M 2010275发酵培养获得的湿菌体与无菌水按质量比1 10 20混合，获得菌悬液； 将菌悬液以体积比1 1 3加入质量分数3 6%的海藻酸钠水溶液中，搅拌均勻，获得含有菌体的海藻酸钠混合液，将混合液逐滴滴入质量分数0. 5 1. 5%氯化钙水溶液中，得到的固定化悬浮液，20 30°C固化5 15h，获得含有含酶菌体细胞的固定化细胞颗粒，经过滤、淋洗后作为生物催化剂。
6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述分离纯化方法如下将应液在45 95°C下减压蒸馏，收集45 55°C馏分即为产物( -环氧氯丙烷，收集85 95°C馏分为副产物(R)_3-氯-1，2-丙二醇。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于所述副产物经后处理循环使用，所述后处理方法如下将(R)-3-氯-1，2-丙二醇与有机酸溶液按摩尔比1 0. 1 0.5混合，通入干燥的氯化氢气体，在100 130°C下卤化反应10 20h，得到(R，S)-1，3-二氯-2-丙醇和(R， S) -2，3- 二氯丙醇混合物，将混合物与pH 8. 0 10. 0的碱溶液按摩尔比0. 5 0. 8 1混合，在55 75°C下反应5 20分钟，得到(R，S)-环氧氯丙烷，回收用于循环制备(S)-环氧氯丙烷；所述有机酸溶液为下列之一醋酸、乳酸、甲苯磺酸或草酸；所述碱溶液为下列之一氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液或碳酸钠水溶液。
8.黑曲霉(Aspergillusniger) ZJB-09173，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址 中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC NO =M 2010275，保藏日期2010年10月M 曰。
全文摘要
本发明提供了一种微生物转化制备(S)-环氧氯丙烷的方法，所述方法包括以外消旋环氧氯丙烷为底物，以黑曲霉CCTCC NOM2010275发酵获得的含酶菌体细胞为生物催化剂，在有机溶剂中进行选择性催化反应，反应结束后，反应液经分离纯化获得所述(S)-环氧氯丙烷；所述的有机溶剂为下列之一环己烷、正己烷或庚烷。本发明的有益效果主要体现在1)本发明步骤简单，污染低，环境友好；2)固定化细胞颗粒作为生物催化剂具有高度的对映体选择性，保证了(S)-环氧氯丙烷的高光学纯度；3)副产物的循环拆分和生物催化剂的循环使用，大大降低了原料成本和生产成本。
文档编号C12R1/685GK102533921SQ20111035071
公开日2012年7月4日 申请日期2011年11月8日 优先权日2011年11月8日
发明者胡忠策, 邹树平, 郑裕国, 金火喜 申请人:浙江工业大学