专利名称：微生物检测用四唑化合物、微生物检测用试剂和微生物检测方法
技术领域：
本发明涉及一种四唑化合物、含有该化合物的微生物检测用试剂、以及微生物检测方法。
背景技术：
以往的微生物检验，例如，按照如下所述来施行。首先，将粉末琼脂培养基溶解、灭菌后保存在恒定的温度下。将一定量的该琼脂培养基，分注入于预先加入有一定量的食品悬浮液等检验试样的灭菌皮氏培养皿等中进行混合稀释。使混合稀释后的琼脂发生固化，通常培养24 48小时左右后，对生成的微生物的菌落数进行统计。如此地，以往的一般活菌检验方法，是需要提前配制培养基并在灭菌后保存在培养基不发生固化的温度下备用等非常费时费力的方法。
另外，生产有对应各种目的而易于使用地制成的简易培养基，例如，配制培养基省时省力的按压类型(Stamp Type)(例如，参照专利文献I)、过滤类型、膜(片)类型(例如，参照专利文献2 4)、抑制微生物迁移而在培养器材表面形成菌落的类型(例如，参照专利文献5)、试纸类型等。但是，对检验时间而言，与使用上述琼脂培养基时相比没有变化，需要24 48小时、或者在此以上的时间。另一方面，作为缩短检验时间的方法的例子，有如下方法对收集的菌进行短时间培养后，用表面活性剂、有机溶剂等从细胞中抽取来源于菌的腺苷三磷酸，并使其在荧光素酶的存在下与荧光素发生反应而发光，通过采用图像分析器对其发光辉点进行检测来测定活菌数(例如，参照专利文献6)。但是，该方法需要特殊的测定设备，通常只能应用于不含固体物质的液体试样的检验中。作为无需特殊的测定设备的方法，公开了一种将培养的微生物、或生物试样与色素原相接触而通过色素原的显色或者荧光信号来确认微生物存在的方法(例如，参照专利文献7 9)。这种方法，若应用于例如食品中的微生物、血清、全血等生物试样中的成分测定，则难以简易且可靠地检测作为对象的微生物、成分。其原因在于，未快速发生致使色素原得到显色所必需的酶反应，或者有时会导致由色素原产生的色素的色与食品、生物试样等色相似。现有技术文献专利文献专利文献I :日本特开平4-117299号公报专利文献2 日本特公平2-49705号公报专利文献3 :日本特开平3-15379号公报专利文献4 :国际公开第2001/44437号小册子专利文献5 :国际公开第1997/24432号小册子专利文献6 :日本特开平4-30798号公报
专利文献7 :日本特开2005-110638号公报专利文献8 :日本特开2005-287452号公报专利文献9 :日本特开2009-72136号公报
发明内容
发明要解决的课题在如上所述的状况中，希望一种在用于无需特殊的设备而快速且可靠地检测微生物的微生物检测用试剂中使用的化合物、微生物检测用试剂、以及微生物检测方法。
解决课题的方法如下所述，本发明提供一种四唑化合物、含有四唑化合物的微生物检测用试剂、以及微生物检测方法。<1> 一种四唑化合物，其特征在于，其通过下式(I)表示，
权利要求
1.一种四唑化合物，其特征在于，其通过式(I)表示，
2.如权利要求I所述的四唑化合物，其中，在式(I)中，在R1和R2中的任一者是CV6烷氧基，并且另一者是氧。
3.如权利要求2所述的四唑化合物，其中，在式(I)中，R1是甲氧基，R2是氢，并且R3和R4中至少任一者是硝基。
4.如权利要求I所述的四唑化合物，其中，所述四唑化合物是2-(2-甲氧基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基-四唑盐、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-苯基-四唑盐、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3，5 二苯基-四唑盐、2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3- (4-甲氧基苯基)-5-苯基-四唑盐或者2- (3-甲氧基苯基)-3- (4-硝基苯基)-5-苯基-四唑盐。
5.一种微生物检测用显色试剂，其特征在于，其含有权利要求I至4中任一项所述的四唑化合物。
6.如权利要求5所述的微生物检测用显色试剂，其中，通过四唑化合物的还原而产生的甲臜色素的吸收波长范围是400nm 420nm。
7.一种微生物检测方法，其特征在于，其通过将权利要求5或6中任一项所述的显色试剂与含有微生物的试样相接触而从四唑化合物产生甲臜色素，并根据该甲臜色素的显色信号来检测微生物。
8.如权利要求7所述的微生物检测方法，其中，通过酶循环反应来增敏显色信号。
全文摘要
本发明的课题在于提供一种在用于无需特殊设备而快速且可靠地检测微生物的微生物检测用试剂中使用的化合物、微生物检测用试剂和微生物检测方法。上述课题能够采用下列通式(I)[式中的标记参照说明书中的定义]所示的四唑化合物、含有四唑化合物的微生物检测用显色试剂、或者使用了该显色试剂的微生物检测方法来解决，
文档编号C12Q1/04GK102844308SQ20118001953
公开日2012年12月26日 申请日期2011年3月16日 优先权日2010年4月19日
发明者恩地裕一, 牛山正志 申请人:Jnc株式会社