专利名称：脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法
技术领域：
本发明属于生物技术中蛋白质材料领域，具体涉及一种鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法。
背景技术：
我国水域辽阔，渔业发达，鱿鱼资源突飞猛进，然而鱿鱼在加工处理过程中约有占8-13%鱿鱼皮废弃物。对这些废弃物的处理，大多数工厂则采用了掩埋丢弃的方法，这不仅 造成资源的极大浪费，更严重的是直接导致环境的污染。从鱿鱼加工废弃物鱿鱼皮中提取胶原蛋白，制备胶原蛋白多肽，既可以减少对环境的污染，又能提高企业的经济效益，提高水产品加工利用水平。鱿鱼皮胶原目前的提取工艺包括碱提法、酸提法和酶提法，但由于鱿鱼皮胶原含有一定量的色素，提取得到的胶原为暗红色，使胶原多肽在应用上受到很大的限制，因此，鱿鱼皮必须进行脱色处理，以提高产品的顺应性。目前生产上应用较多的是活性炭脱色，但该法操作繁琐，时间较长，且胶原中混入活性炭很难去除干净，影响胶原的进一步加工。
发明内容
本发明的目的是提供一种脱色鱿鱼皮胶原蛋白质的制备方法。本发明是脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤为(I)取较完整冷冻鱿鱼皮，用去离子水进行清洗，自然风干；(2)取干鱿鱼皮，放置于容器中，加入浓度为I %的高锰酸钾溶液，按鱿鱼皮的质量与高锰酸钾溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的高锰酸钾溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续60分钟；(3)去除容器中的高锰酸钾溶液，将鱿鱼皮清洗3次，然后再将鱿鱼皮放置到容器中，加入浓度为8%的草酸溶液，按鱿鱼皮的质量与草酸溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的草酸溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续6 6. 5小时；(4)去除容器中的草酸溶液，将鱿鱼皮用蒸馏水清洗3次，将鱿鱼皮匀浆，放置在容器中，按鱿鱼皮的质量与蒸馏水的体积比g/ml为I : 20的比例确定加入蒸馏水的体积，然后加入胰蛋白酶，加入的胰蛋白酶的质量是鱿鱼皮质量的O. 5-0. 6%，然后将放置鱿鱼皮的容器置于45°C的恒温水浴锅中进行水浴，时间持续2小时，得到最终脱色胶原蛋白液，并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。与现有技术相比，本发明的优点在于以鱿鱼加工后的废弃鱿鱼皮作为原料制备胶原蛋白多肽，不仅成本低，还可以减少对环境的污染，提高水产品加工利用水平；同时制备工艺简单、易操作，较活性炭脱色效果好，色差变化率达到85%以上；胶原损失率低于8%。本发明具有工艺简单、成本低、脱色效果好的特点，而且制备的胶原损失率低，提高了胶原蛋白的顺应性。
图I是本发明实施例I中的胶原脱色前冻干的外观图，图2是实施例I中的胶原脱色后冻干的外观图，图3以O. 5mol/L醋酸溶液做空白对照，全波长(200nm-800nm)扫描，用紫外分光光度计测定其吸收光谱，所得的紫外图谱，图4是实施例I所得胶原的紫外图谱，图5是实施例2中的胶原脱色前冻干的外观图，图6是实施例2中的胶原脱色后冻干的外观图，图7是实施例2所得胶原的紫外图谱，图8是实施例3中的胶原脱色前冻干的外观图，图9是实施例3中的胶原脱色后冻干的外观图，图10是是实施例2所得胶原的紫外图
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具体实施例方式本发明是脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤为(I)取较完整冷冻鱿鱼皮，用去离子水进行清洗，自然风干；(2)取干鱿鱼皮，放置于容器中，加入浓度为I %的高锰酸钾溶液，按鱿鱼皮的质量与高锰酸钾溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的高锰酸钾溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续60分钟；(3)去除容器中的高锰酸钾溶液，将鱿鱼皮清洗3次，然后再将鱿鱼皮放置到容器中，加入浓度为8%的草酸溶液，按鱿鱼皮的质量与草酸溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的草酸溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续6 6. 5小时；(4)去除容器中的草酸溶液，将鱿鱼皮用蒸馏水清洗3次，将鱿鱼皮匀浆，放置在容器中，按鱿鱼皮的质量与蒸馏水的体积比g/ml为I : 20的比例确定加入蒸馏水的体积，然后加入胰蛋白酶，加入的胰蛋白酶的质量是鱿鱼皮质量的O. 5-0. 6%，然后将放置鱿鱼皮的容器置于45°C的恒温水浴锅中进行水浴，时间持续2小时，得到最终脱色胶原蛋白液，并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。下面用实施例进一步展开本发明。实施例I :取干鱿鱼皮50g，放置于容器中，加入浓度为1%高锰酸钾溶液1L，用电动搅拌器以50 60转/分速度均匀搅拌60分钟。去除容器中的高锰酸钾溶液，将鱿鱼皮用250ml蒸馏水清洗3次，再放置于容器中，加入浓度为8 %的草酸溶液1L，用电动搅拌器以50 60转/分速度均匀搅拌6小时。去除容器中的草酸溶液，将鱿鱼皮用250ml蒸馏水清洗3次。将鱿鱼皮匀浆，放置在容器中，加入IL蒸馏水，再加入O. 25g胰蛋白酶，然后将放置鱿鱼皮的容器置于45°C恒温水浴锅中水浴，水解2小时，得到脱色胶原蛋白液，将脱色后的胶原液放入真空冷冻干燥机冻干。(I)如图I、图2所示，对比脱色前的胶原液和经过氧化还原脱色的胶原液经真空冷冻干燥机冻干颜色，脱色后胶原颜色明显变浅。(2)胶原的紫外图谱分析将胶原冻干品溶于O. 5mol/L醋酸中，配成质量分数为O. 05%的胶原溶液。如图3所示，以O. 5mol/L醋酸溶液做空白对照，全波长(200nm SOOnm)扫描，用紫外分光光度计测定其吸收光谱，如图4所示，高分子量胶原在280nm处有明显吸收峰，全波长(200nm 800nm)扫描发现在225nm处有明显吸收峰,与鱿鱼皮胶原的
报道一致。
(3)色差变化率和胶原蛋白损失率以脱色前后的明胶液与蒸懼水作为空白测定色差值,并记为ΔΕΙ、ΔΕ2。色差变化率=(Λ El-Λ E2)/Λ El X 100%。脱色前后的明胶液用考马斯亮蓝法测定其吸光度记为脱色前Α595、脱色后Α595。
权利要求
1.脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤为 (1)取较完整冷冻鱿鱼皮，用去离子水进行清洗，自然风干； (2)取干鱿鱼皮，放置于容器中，加入浓度为I%的高锰酸钾溶液，按鱿鱼皮的质量与高锰酸钾溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的高锰酸钾溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续60分钟； (3)去除容器中的高锰酸钾溶液，将鱿鱼皮清洗3次，然后再将鱿鱼皮放置到容器中，加入浓度为8%的草酸溶液，按鱿鱼皮的质量与草酸溶液的体积比g/ml为I : 20 30的比例确定加入的草酸溶液的体积，搅拌均匀，搅拌时间持续6 6. 5小时； (4)去除容器中的草酸溶液，将鱿鱼皮用蒸馏水清洗3次，将鱿鱼皮匀浆，放置在容器中，按鱿鱼皮的质量与蒸馏水的体积比g/ml为I : 20的比例确定加入蒸馏水的体积，然后加入胰蛋白酶，加入的胰蛋白酶的质量是鱿鱼皮质量的O. 5-0. 6%，然后将放置鱿鱼皮的容 器置于45°C的恒温水浴锅中进行水浴，时间持续2小时，得到最终脱色胶原蛋白液，并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。
全文摘要
脱色鱿鱼皮胶原蛋白的制备方法，其步骤为取干鱿鱼皮，加鱿鱼皮质量20-30倍的浓度为1％的高锰酸钾溶液，用电动搅拌器50-60转/分速度均匀搅拌60分钟，倾倒高锰酸钾残液，用鱿鱼皮的质量3-5倍水清洗3次，加鱿鱼皮质量20-30倍的浓度为8％的草酸溶液，用电动搅拌器以50-60转/分速度均匀搅拌6-6.5小时，倾倒草酸残液，用鱿鱼皮的质量3-5倍的蒸馏水清洗3次，将鱿鱼皮匀浆，加鱿鱼皮质量20倍的蒸馏水，加鱿鱼皮质量0.5-0.6％的胰蛋白酶，置于45℃恒温水浴锅中水浴2小时，得到最终脱色胶原蛋白液，并将脱色后的胶原液放入冷冻干燥机冻干。
文档编号C12P21/06GK102628071SQ201210013039
公开日2012年8月8日 申请日期2012年1月16日 优先权日2012年1月16日
发明者付万冬, 张伟杰, 张飞, 杨明俊, 王永刚 申请人:兰州理工大学