专利名称：绿豆用于制备ace抑制剂的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于食品领域，具体地说，是关于绿豆用于制备血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme, ACE)抑制剂的应用。
背景技术：
绿豆(学名Vigna radiata)是ー种豆科、蝶形花亚科豇豆属 植物，原产印度、緬甸地区。现在东亚各国普遍种植，非洲、欧洲、美国也有少量种植，中国、緬甸等国是主要的绿豆出口国。种子和茎被广泛食用。绿豆是ー种高蛋白、中淀粉、低脂肪的药食同源作物，每IOOg干物质含有22 26g蛋白质，是禾谷类的2倍，含淀粉50g左右，膳食纤维6. 4g左右，脂肪含量低，仅占1%。此外，緑豆中还含有丰富的维生素及微量元素，维生素BI是鸡肉的17. 5倍，维生素B2是禾谷类的2 4倍，磷是禾谷类及猪肉、鸡肉、鱼、鸡蛋的2倍，钙是禾谷类的4倍，还含有铁、硒、镁、锌等微量元素。緑豆营养成分全面，不仅蛋白质含量高，而且蛋白质功效比高，居各种豆类之首，蛋白质中氨基酸种类齐全且构成比例较好，尤其以赖氨酸含量较为丰富。ACE (血管紧张素转化酶,Angiotensin Converting Enzyme)在人体内的作用是将血管紧张素 I (Angiotensin I Converting Enzyme)转化成血管紧张素 II (Angiotensin
IIConverting Enzyme)，而血管紧张素II为强烈的血管收缩物质，可使血管收缩，从而使体内血压升高。此外，ACE还可以失活体内调节血压的舒缓激肽，也从而使体内血压升高。ACE是ー种金属肽酶，含有2个结合Zn2+的位点，即所谓“必须结合位点(Obligatory Binding Site)”。Zn2+结合位点是ACE催化反应的活性基团所在部位。各种ACE抑制物的共同作用是与ACE活性部位的Zn2+结合，使之失活。降血压肽是由数个氨基酸组成的肽，是对ACE活性区域亲和カ较强的竞争性抑制齐U，它们与ACE的亲和カ比血管紧张素转化酶I (AngI)或舒缓激肽更强，而且也较不容易从ACE结合区释放，降低ACE活性或使其失去活性，从而阻碍ACE催化血管紧张素I转化成血管紧张素II，使血管不收縮，以及催化水解舒缓激肽成为失活片段的两种生化反应过程，起到降血压的作用。到目前为止，未发现有关于利用緑豆制备ACE抑制物或降血压药物的报道。
发明内容
本申请的发明人在长期研究緑豆的用途的过程中发现，緑豆的水解产物具有明显的血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性。因此，本发明的目的在于提供一种绿豆用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。根据本发明，所述绿豆为绿豆经蛋白酶水解后的产物。根据本发明的优选实施例，所述蛋白酶选自胃蛋白酶，胰蛋白酶，或者它们的组
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基于绿豆具有抑制血管紧张素转化酶活性的作用，緑豆可进ー步用于开发具有降血压功能的食品或保健品本发明为緑豆的开发利用开辟了一条全新的途径，具有非常广泛的应用前景。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明的降血压多肽的制备方法作进ー步详细说明。应理解，以下实施例仅用于实施本发明而非用于限定本发明的范围。以下实施例中，ACE抑制活性的測定原理及方法步骤如下緑豆的蛋白水解物(多肽)的ACE抑制活性测定采用体外模拟測定，体外ACE抑制率测试原理为底物马尿酰组氨酰亮氨酸(HHL)在ACE酶的催化作用下，可以生产马尿酸(Hip)和ニ肽，通过液相的方法测定马尿酸的含量，进而可以间接測定ACE酶的酶活；而ACE抑制剂的存在可以抑制ACE酶的活性，致使Hip的生成減少，从而间接反映了 ACE抑制肽的活性。测试ACE抑制率的方法步骤如下选取EP管作为反应器，编号0、1、2、3等。O号管加入15 μ L去离子水为对照，I、2、3等管加入15 μ L的ACE抑制剂。然后各管内均加入15 μ L的底物HHL，37°C温浴5min后，加入5 μ L的ACE酶启动反应，在37°C水浴中反应40min。反应结束后，加入300 μ L IM HCl终止反应。反应液进行高速离心，过4. 5μπι的滤头，然后进行高效液相色谱(HPLC)測定。HPLC条件是10%こ腈90%水(O. 1%TFA)，检测波长228nm，柱温30°C，上样量20yL ;ACE抑制率(X)按下式计算X= (A 对照-Al) /A 对照 X 100%式中X—ACE抑制率(％) A对照一对照组生成Hip的峰面积Al—实验组生成Hip的峰面积实施例I_8、绿豆多肽水解物的制备取緑豆，洗浄，捣碎研磨后收集，取一定量的緑豆粉末，进行干燥，得干燥的緑豆粉。按表I所示，对获得的干燥緑豆粉分别用不同组合的蛋白酶进行处理，具体如下称取2g粉末,配制成20mg/ml的溶液,按照表I的蛋白酶水解条件，调pH值至相应的酶反应PH条件，加入相应的酶O. 1% (w/v)，在相应的反应温度下水浴酶解O. 17^10小吋，搅拌。当使用两种不同蛋白酶处理时，在第一种蛋白酶酶解结束后，煮沸IOmin灭酶活，再进行第二种蛋白酶的处理步骤。終止反应后，调节PH至7，水解物离心(12000r/min,lOmin)，取上清液，在_40°C冷冻干燥，收集水解物粉末。表I、不同蛋白酶水解条件
实施例酶的组合I温度(°C) Γ~ρ 时间(hr)
I胃蛋白酶371.5O. 1权利要求
1.绿豆用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。
2.如权利要求I所述的应用，其特征在于，所述绿豆为绿豆经蛋白酶水解后的产物。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述蛋白酶选自胃蛋白酶，胰蛋白酶，或者它们的组合。
4.绿豆用于制备降血压食品或保健品的应用，其特征在于，所述降血压食品或保健品用于抑制血管紧张素转化酶的活性。
全文摘要
本发明公开了一种绿豆用于制备血管紧张素转化酶抑制剂的应用。优选的，所述绿豆为绿豆经蛋白酶水解后的产物。本发明为绿豆的开发利用开辟了一条全新的途径，具有非常广泛的应用前景。
文档编号A23L1/20GK102626206SQ20121013771
公开日2012年8月8日 申请日期2012年5月4日 优先权日2012年5月4日
发明者吴燕玲, 张旭晟, 方明, 李莹, 李鹏, 杜磊, 束雯婷, 王波, 谢静莉, 邓高静 申请人:华东理工大学